《生物技术概论》课程总复习.pptx

现代生物技术的概念技术手段（种类）第二章基因工程（GeneEngineering）基因工程的一般流程基因工程中常用的工具酶基因克隆载体的概念：载体类型目的基因片段的获取①模板DNA的变性：95℃②模板DNA与引物的退火(复性)：60℃③引物的延伸：72℃目的基因导入受体细胞重组子的筛选1根据重组DNA分子特征鉴定重组子根据重组DNA分子大小鉴定重组子、根据重组DNA分子酶切图谱鉴定、PCR法、DNA杂交、应用DNA芯片鉴定重组子、根据DNA核苷酸序列鉴定重组子基因工程的一般步骤(目的基因未知）第三章细胞工程第二节植物细胞工程化学或物理法诱导2.3人工种子用人工种皮包被植物胚状体或芽、营养成分、激素以及其他成分的人工胶囊。人工种子制作过程1.动物细胞、组织培养技术2.动物细胞融合技术合成抗体3.微生物细胞工程第四章发酵工程一、发酵工程概况：现代发酵工程的定义;发酵周期；放罐时间三、液体深层发酵：液体深层发酵的操作方式（分批发酵；连续发酵；补料分批发酵）；各自优缺点；发酵过程主要影响参数第五章酶工程第一节酶的发酵生产提高酶产量的措施诱导物阻遏物表面活性剂产酶促进剂第二节酶的分离纯化酶的制备技术(破碎细胞、溶剂抽提、离心分离、过滤、浓缩、干燥);纯化与精制的方法（酶分子大小、电荷性质、专一性结合特性）；第三节酶分子的改造酶分子的修饰方法第四节酶的固定化技术固定化酶（细胞）的优点（不溶于水便于分离；能回收、反复使用；稳定性；生产自动化；但不会持续维持生产能力逐渐提高）酶固定化方法（载体结合、共价交联、包埋）细胞固定化方法（直接法包埋法物理吸附法）酶生物合成的模式蛋白质工程概念表达体系、设计目标蛋白质工程研究的技术和方法：蛋白质结晶学（X光衍射技术、核磁共振NMR）；蛋白质动力学（生物信息学、计算机辅助设计）；改变蛋白质结构的核心技术是人工定点突变技术（位点特异性突变技术）目前蛋白质工程研究的主要领域研究程序一般如下：（4）通过表达载体获得较大量(0.1－1.0克)该蛋白质用于空间结构测定及结构与功能研究借助计算机提出分子预测性质及改造方案蛋白质组学（Proteomics）双向电泳技术第七章生物技术的应用领域