泰乐菌素发酵新工艺.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106244650A(43)申请公布日2016.12.21(21)申请号201610608398.6(22)申请日2016.07.29(71)申请人山东鲁抗生物制造有限公司地址273517山东省济宁市邹城市太平镇工业园区华鲁路88号(72)发明人张代领郑向伟张现峰孙丽美胡德银李飞飞(74)专利代理机构青岛发思特专利商标代理有限公司37212代理人赵双霞(51)Int.Cl.C12P19/62(2006.01)权利要求书1页说明书3页(54)发明名称泰乐菌素发酵新工艺(57)摘要本发明泰乐菌素发酵新工艺，属于生物发酵技术领域，包括以下步骤：泰乐菌素一级种子培养成熟后，接入两个二级种子罐进行培养，得到种子液，两个二级种子罐的接种量的比例为2:1；待二级种子罐的菌丝浓度到达18-22％时，发酵罐配料，在发酵罐灭菌前，将接种量大的二级种子罐内的种子液压入发酵罐内做为微生物氮源，灭菌后待用；发酵罐灭菌结束，温度降至30℃，将接种量小的二级种子罐内的种子液接入发酵罐做为二级种子使用，发酵培养。本发明泰乐菌素发酵新工艺，采用泰乐菌素自身菌体作为微生物氮源，不受加工、运输、产地、季节等因素的影响，氮源质量稳定；微生物氮源容易吸收利用，缩短了发酵周期，有效的解决了发酵周期长的问题。CN106244650ACN106244650A权利要求书1/1页1.一种泰乐菌素发酵新工艺，其特征在于，包括以下步骤：1)培养：泰乐菌素一级种子培养成熟后，通过分种的方式接入两个二级种子罐进行培养，得到种子液，两个二级种子罐的接种量的比例为2:1；2)利用：待二级种子罐的菌丝浓度到达18-22％时，发酵罐开始配料，在发酵罐灭菌前，将接种量大的二级种子罐内的种子液压入发酵罐内做为微生物氮源，灭菌后待用；3)发酵：发酵罐灭菌结束，温度降至30℃，将接种量小的二级种子罐内的种子液接入发酵罐做为二级种子使用，开始发酵培养，待发酵120h后，使用HPLC检测发酵液组分情况，根据C组分的含量确定升温至38℃的转化时间，将C组分转化为有效组分A，经过10-30h的转化，待A组分的含量在85％-95％，C组分的含量在5％以下时，发酵结束，发酵液可以放罐。2.根据权利要求1所述的泰乐菌素发酵新工艺，其特征在于，步骤1)所述二级种子罐中接种量大的二级种子罐，0-10h每升种子液每分钟通入0.8L无菌空气，10-45h每升种子液每分钟通入1.2L无菌空气；接种量小的的二级种子罐，0-10h每升种子液每分钟通入0.6L无菌空气，10-45h每升种子液每分钟通入0.9L无菌空气。3.根据权利要求1所述的泰乐菌素发酵新工艺，其特征在于，所述步骤3)的发酵温度为28℃，0-30h空气流量为每升发酵液每分钟通气量为0.5L，30h到发酵结束每升发酵液每分钟通气量为0.8L。2CN106244650A说明书1/3页泰乐菌素发酵新工艺技术领域[0001]本发明属于生物发酵技术领域，具体涉及一种泰乐菌素发酵新工艺。背景技术[0002]目前泰乐菌素发酵生产中主要的氮源来源为棉籽饼粉、麸质粉和鱼粉等植物氮源或动物氮源，使用以上的动植物氮源主要有以下缺点：[0003]1、棉籽饼粉和麸质粉等植物氮源，受品种、产地、季节、储存、加工和运输等因素的影响，产品质量波动较大，影响生产的稳定性。[0004]2、鱼粉等动物氮源受渔场、季节、鱼种、加工等因素的影响，产品质量也有波动，从而影响了生产。[0005]3、棉籽饼粉、麸质粉和鱼粉都是迟效氮源，需要微生物自身的酶，来酶解成小分子的物质才能被利用，所需发酵周期较长。发明内容[0006]本发明的目的是提供一种泰乐菌素发酵新工艺，以解决上述问题。[0007]本发明泰乐菌素发酵新工艺，包括以下步骤：[0008]1)培养：泰乐菌素一级种子培养成熟后，通过分种的方式接入两个二级种子罐进行培养，得到种子液，两个二级种子罐的接种量的比例为2:1；[0009]2)利用：待二级种子罐的菌丝浓度到达18-22％时，发酵罐开始配料，在发酵罐灭菌前，将接种量大的二级种子罐内的种子液压入发酵罐内做为微生物氮源，灭菌后待用；[0010]3)发酵：发酵罐灭菌结束，温度降至30℃，将接种量小的二级种子罐内的种子液接入发酵罐做为二级种子使用，开始发酵培养，待发酵120h后，使用HPLC检测发酵液组分情况，根据C组分的含量确定升温至38℃的转化时间，将C组分转化为有效组分A，经过10-30h的转化，待A组分的含量在85％-95％，C组分的含量在5％以下时，发酵结束，发酵液可以放罐。[0011]步骤1)所述二级种子罐中接种量大的二级种子罐，0-10h每升种子液每分钟通入0.8L无菌空气，10-45h每升种子液每分钟通入1.2L无菌空