一种从乳酸菌发酵液中分离纯化γ‑氨基丁酸的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107916281A(43)申请公布日2018.04.17(21)申请号201710556738.XC07C229/08(2006.01)(22)申请日2017.07.10C12R1/24(2006.01)(83)生物保藏信息CGMCCNo.114372015.09.21(71)申请人广西多得乐生物科技有限公司地址530001广西壮族自治区南宁市秀厢大道56号3号综合楼6层(72)发明人杨齐黄斌良江朝明吴华德蓝健益黄燕菲(74)专利代理机构北京中誉威圣知识产权代理有限公司11279代理人朱志宽(51)Int.Cl.C12P13/00(2006.01)C07C227/40(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图1页(54)发明名称一种从乳酸菌发酵液中分离纯化γ-氨基丁酸的方法(57)摘要本发明属于生物技术领域，特别是涉及一种从发酵液中分离纯化γ-氨基丁酸的方法。一种从乳酸菌发酵液中分离纯化γ-氨基丁酸的方法，包括如下步骤：(1)发酵液的制备及预处理；(2)阴阳离子柱脱色脱盐；(3)膜浓缩；(4)电渗析脱盐；(5)真空浓缩及干燥等步骤，制备得到纯度高于85％的固态γ-氨基丁酸。本发明具有工艺简单、能耗低、生产环境良好、无安全隐患等特点，对γ-氨基丁酸的工业化生产具有良好的促进作用。CN107916281ACN107916281A权利要求书1/1页1.一种从乳酸菌发酵液中纯化γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)发酵液的制备及预处理：短乳杆菌SC221发酵制备含γ-氨基丁酸的发酵液，然后用陶瓷膜对发酵液进行过滤除菌，得到除菌发酵液；(2)树脂对发酵液的脱色脱盐：稀盐酸对酸性弱阳离子树脂进行预处理，得到氢型弱阳离子树脂；稀碱溶液对碱性强、弱阴离子树脂分别进行预处理，得到氯型阴离子树脂；再按照弱阳离子树脂-弱阴离子树脂-强阴离子树脂的顺序将树脂串联使用，对除菌发酵液进行脱色脱盐；(3)浓缩：对脱色脱盐发酵液进行纳滤膜反渗透浓缩；(4)电渗析脱盐：对纳滤膜浓缩液进行电渗析脱盐，收集脱盐样品；(5)浓缩及干燥：电渗析脱盐样品真空浓缩后喷雾干燥，即可得到固态γ-氨基丁酸。2.根据权利要求1所述的从发酵液中纯化γ-氨基丁酸的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的弱阳离子树脂型号为D113。3.根据权利要求1所述的从发酵液中纯化γ-氨基丁酸的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的弱阴离子树脂型号为D900，所述的强阴离子树脂型号为D201。4.根据权利要求1所述的从发酵液中纯化γ-氨基丁酸的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的阴、阳离子树脂联用脱色脱盐时的上样速度为1-5BV/h。5.根据权利要求1所述的从发酵液中纯化γ-氨基丁酸的方法，其特征在于：步骤(3)中纳滤膜反渗透浓缩的膜压力为0.25-0.45MPa。6.根据权利要求1所述的从发酵液中纯化γ-氨基丁酸的方法，其特征在于：步骤(4)中所述的电渗析脱盐至γ-氨基丁酸流出液电导率降至500μs/cm以下时停止脱盐。2CN107916281A说明书1/5页一种从乳酸菌发酵液中分离纯化γ-氨基丁酸的方法技术领域[0001]本发明属于生物技术领域，特别是涉及一种从发酵液中分离、纯化γ-氨基丁酸的方法。背景技术[0002]γ-氨基丁酸(GABA)是一种非蛋白质氨基酸，广泛存在于动植物体内，具有降血压、改善脑功能，延缓脑衰老、增强记忆等功能，在食品、医药行业都有广泛应用，因此受到越来越多的科研工作者的关注。[0003]目前，GABA的生产主要可分为化学合成、植物富集及生物转化三种方法。化学合成法生产速度快，产率高，但是具有成本高、安全性差的缺点。植物富集法主要是从富含GABA的植物组织中提取，该法产率低，不利于大规模工业化生产。生物转化法是通过微生物发酵生产GABA，该方法安全、环保且生产成本低，最利于工业化生产。但我国目前对GABA的纯化研究尚浅，提纯工艺尚不成熟。因此，有必要对发酵液中GABA的分离、纯化展开研究，提高GABA的生产效率，促进工业化生产。[0004]公开号为CN201410477049.6的《一种γ-氨基丁酸的提取分离纯化方法申请》公开了一种γ-氨基丁酸的提取分离纯化方法，包括以下步骤：(1)将稻米捣碎，捣碎后加入乙醇水溶液进行浸提，浸提后将提取液离心分离，取上清液；(2)将上清液浓缩，浓缩后将上清液pH调节后，通过活化过的732阳离子交换树脂；(3)再用氨水对732阳离子交换树脂进行洗脱，洗脱后收集洗脱液，将洗脱液浓缩，浓缩后再用乙醇纯化浓缩物，纯化3次后，得到γ-氨基丁酸。独立权利要求项为：1.一种γ-氨基丁酸的提取分离纯化方法，其特征在于，所述的γ-氨基丁酸的提取分离纯化方法包括以下