一种具有防控苹果树根腐病微生物菌剂及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108485990A(43)申请公布日2018.09.04(21)申请号201810287516.7A01N63/00(2006.01)(22)申请日2018.04.03A01N63/04(2006.01)A01P3/00(2006.01)(71)申请人山东丰乐生物科技有限公司C12R1/885(2006.01)地址276000山东省临沂市罗庄区傅庄街C12R1/07(2006.01)道循环经济示范区通达南路与樱花路C12R1/125(2006.01)交汇西北汤庄变电站西侧C12R1/065(2006.01)(72)发明人王欣王宪法C12R1/78(2006.01)(74)专利代理机构济南泉城专利商标事务所37218代理人徐明双(51)Int.Cl.C12N1/14(2006.01)C12N1/20(2006.01)C12N1/16(2006.01)C12N11/10(2006.01)权利要求书1页说明书6页(54)发明名称一种具有防控苹果树根腐病微生物菌剂及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种具有防控苹果树根腐病微生物菌剂及其制备方法，是由以下重量份的原料制得的：哈茨木霉菌20-30份、纳豆芽孢杆菌10-20份、枯草芽孢杆菌15-25份、异常汉逊酵母20-30份、圆褐固氮菌5-15份、多孔磁性壳聚糖微球5-10份。本发明具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，完全没有因化学药剂的使用所带来的化学抗药性等问题，因而有利于苹果的无公害生产。依靠相互间协同作用、增殖关系形成一个复杂、结构稳定、功能广泛的具有多种多样细菌微生物群落的生物菌群，对苹果树根腐病具有良好的防控作用。CN108485990ACN108485990A权利要求书1/1页1.一种具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，其特征在于，是由以下重量份的原料制得的：哈茨木霉菌20-30份、纳豆芽孢杆菌10-20份、枯草芽孢杆菌15-25份、异常汉逊酵母20-30份、圆褐固氮菌5-15份、多孔磁性壳聚糖微球5-10份。2.根据权利要求1所述具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，其特征在于，所述多孔磁性壳聚糖微球是由以下步骤制得的：1）将氨水、纳米四氧化三铁、羧甲基壳聚糖和吐温-20混合均匀，密封浸泡2-4h，50-55℃水浴加热并搅拌至羧甲基壳聚糖完全溶解，且静止至气泡完全逸出，得羧甲基壳聚糖相；2）将司班-80和液体石蜡加至烧瓶中，50-60℃水浴加热，搅拌至混合均匀，作为石蜡相；3）50-60℃水浴加热条件下，边搅拌边将羧甲基壳聚糖相滴加到石蜡相中，滴加完毕继续搅拌5min；匀速将50-60℃的水浴换成冰水浴，5-10min后撤去冰水浴，室温条件下添加混合溶液，反应5-9h，停止搅拌，依次用石油醚、无水乙醇洗涤数次，真空干燥，得粒径为5-10μm的多孔磁性壳聚糖微球。3.根据权利要求2所述具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，其特征在于，所述氨水、纳米四氧化三铁、羧甲基壳聚糖和吐温-20的重量比为100：5-15：10-15：10-20；所述氨水的浓度为20%。4.根据权利要求2所述具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，其特征在于，所述司班-80和液体石蜡的重量比为1：25-30。5.根据权利要求2所述具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，其特征在于，所述羧甲基壳聚糖相、石蜡相和混合溶液的重量比为1：6-8：0.4-0.6。6.根据权利要求2所述具有防控苹果树根腐病微生物菌剂，其特征在于，所述混合溶液是由正硅酸乙酯和无水乙醇按照1：10-20的重量比混合得到的。7.一种权利要求1-6中任一项所述具有防控苹果树根腐病微生物菌剂的制备方法，其特征在于，是由以下步骤制得的：1）分别取斜面保种的异常汉逊酵母和圆褐固氮菌各两环，分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基，培养温度37℃，培养时间20h，分别得异常汉逊酵母和圆褐固氮菌的种子液；2）分别将异常汉逊酵母和圆褐固氮菌的种子液按5%接种量接入500L种子罐培养基中，35℃、180r/min条件下培养24h，分别得异常汉逊酵母和圆褐固氮菌的菌液；3）分别将异常汉逊酵母和圆褐固氮菌的菌液用硅藻土吸附，吸附完成后板框压滤机压滤，喷雾干燥，进风温度140-180℃、进料流量13-17ml/min，分别得异常汉逊酵母菌剂和圆褐固氮菌菌剂；4）将哈茨木霉菌、纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、异常汉逊酵母菌剂、圆褐固氮菌菌剂和多孔磁性壳聚糖微球混合均匀，加入气流粉碎机，细度控制300-400目，即可制得具有防控苹果树根腐病微生物菌剂。8.根据权利要求7所述具有防控苹果树根腐病微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述牛肉膏蛋白胨培养基的具体组成：牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，NaCl5g/L，琼脂15g/L，其余为水