一种黄精育苗方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108849501A(43)申请公布日2018.11.23(21)申请号201810554204.8(22)申请日2018.06.01(71)申请人乐山市沙湾区长宏中药材种植专业合作社地址610000四川省乐山市沙湾区谭坝乡复兴路68号(72)发明人陈志强谭长虹(74)专利代理机构成都点睛专利代理事务所(普通合伙)51232代理人李玉兴(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书2页说明书4页(54)发明名称一种黄精育苗方法(57)摘要本发明公开了一种能够大大缩短种子育苗周期的黄精育苗方法。该黄精育苗方法包括选种、诱导培养、继代培养、分化培养、培养室培养、炼苗、移栽，并针对黄精种子特有的休眠特性，对诱导培养基进行改良设计，使其能够在诱导过程中破除黄精种子的休眠特性，使其能够快速发芽，并提高发芽率，通过炼苗处理可以大大提高黄精幼苗的成活率，同时在幼苗根部施加外源添加剂可以有效缓解干旱胁迫下黄精生长受阻、叶片萎蔫，可以显著的提高黄精的抗旱性，为选育黄精优良品种提供了技术参考，同时采用黄精种子作为外植体，克服了外植体供给的季节限制，同时该育苗方法只需三个月左右即可，能够实现黄精的快速繁殖。适合在生物技术领域推广运用。CN108849501ACN108849501A权利要求书1/2页1.一种黄精育苗方法，其特征在于包括以下步骤：A、选种：选取黄精种子，并对黄精种子进行消毒处理；B、将清洗灭菌后的黄精种子接种到诱导培养基中在无菌环境下培养26～30d得到愈伤组织，所述诱导培养基由N6培养基、150mg/L的GA3、100mg/L的IAA、300mg/LETH、500mg/L的SNP、Vbstock、30g/L的蔗糖、5.0mg/L的2，4-D、100mg/L的双氧水、4.5g/L的琼脂组成，所述诱导培养基的PH＝5.8；C、将愈伤组织转入继代培养基中在无菌环境下培养5～9d，所述继代培养基由MS培养基、30g/L的蔗糖、5.0mg/L的2，4-D、100mg/L的6-BA、100mg/L的高锰酸钾、1.0g/L的活性炭、4.5g/L的琼脂组成，所述继代培养基的PH＝5.8；D、将经过步骤C处理的愈伤组织转接到分化培养基中在无菌环境下培养18～22d，所述分化培养基由MS培养基、30g/L的蔗糖、0.2mg/L的NAA、50mg/L的GA3、1g/L的硫酸铜、100mg/L的6-BA、4.5g/L的琼脂组成，所述分化培养基的PH＝5.8；E、将经过步骤D处理的愈伤组织转接到组培瓶中，并将组培瓶放置在光照强度为1500～3000lx，温度为25～30℃的无菌环境中培养5～8d，光照时间为38～42h/d；F、将组培瓶放置在温度为20～30℃的有菌环境中炼苗培养4～7d，在炼苗培养过程中，在幼苗根部施加外源添加剂，所述外源添加剂包括溶剂和溶质，所述溶剂为霍格兰氏营养液，所述溶质包括壳聚糖(CTS)和精胺(Spm)，所述CTS的浓度为0.5g/L-1.5g/L，所述Spm的浓度为50.58mg/L-151.74mg/L；G、当幼苗长至2～3cm时，将其移栽。2.如权利要求1所述的黄精育苗方法，其特征在于：在步骤A中，对黄精种子清洗灭菌的处理方式采用如下所述的方式：首先，将黄精种子放入瓶中，并在瓶中添加无水乙醇浸泡1分钟，接着黄精种子取出用蒸馏水清洗干净，然后在瓶中加入蒸馏水并将清洗干净的黄精种子放入瓶中，将瓶子置于40℃冰箱中进行泡种处理，所述泡种的时间为24-30h，泡种结束后，将黄精种子取出放入浓度为13.8mg/Ld的水杨酸溶液中浸泡30min，，后将鸭茅成熟种子取出后用双蒸水清洗3-5次，并将其置于灭菌滤纸，晾干多余水分。3.如权利要求1所述的黄精育苗方法，其特征在于：在步骤B中，所述诱导培养中含有的Vbstock由20mg/L的Vb1、19.5mg/L的Vb6、9mg/L的烟酸组成。4.如权利要求1所述的黄精育苗方法，其特征在于：在步骤B中，所述诱导培养的环境温度为25℃，且培养方式为暗培。5.如权利要求1所述的黄精育苗方法，其特征在于：所述诱导培养中含有的N6培养基由KNO3、NH4SO4、CaCl2·2H2O、MgSO4·7H2O、KH2PO4、FeSO4·7H2OZnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、H2BO3、KI、甘氨酸、烟酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆素组成，各组分的含量如下所述：KNO3为2830mg/L，NH4SO4为463mg/L，CaCl2·2H2O为166mg/L，MgSO4·7H2O为,185mg/L，KH2PO4为400mg/L，MnSO4·4H2O为4.4mg/L，ZnSO4·7H2O为1.6mg/L，H3B