一种检测TORCH病原体的基因芯片和试剂盒.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112029905A(43)申请公布日2020.12.04(21)申请号202010831925.6(22)申请日2020.08.18(71)申请人珠海赛乐奇生物技术股份有限公司地址519085广东省珠海市唐家湾镇金峰西路24号6栋5层(72)发明人肖杰王丽玲胡荣余义文宋家武(74)专利代理机构广州嘉权专利商标事务所有限公司44205代理人郑晨鸣(51)Int.Cl.C12Q1/70(2006.01)C12Q1/6893(2018.01)C12Q1/6837(2018.01)权利要求书1页说明书7页序列表3页附图1页(54)发明名称一种检测TORCH病原体的基因芯片和试剂盒(57)摘要本发明属于体外基因检测技术领域，公开了一种检测TORCH病原体的基因芯片和试剂盒。所述检测TORCH病原体的基因芯片，包括生物传感器及固定在生物传感器上的检测探针；所述检测探针包括TOX探针、CMV探针、HSVI探针和HSVII探针，其序列依次为SEQIDNO.1‑4。本发明具有特异性好、准确性高、快速简便、可同时检测TORCH病原体等优点。CN112029905ACN112029905A权利要求书1/1页1.一种检测TORCH病原体的基因芯片，其特征在于，包括生物传感器及固定在生物传感器上的检测探针；所述检测探针包括TOX探针、CMV探针、HSVI探针和HSVII探针，其序列依次为SEQIDNO.1-4。2.根据权利要求1所述的基因芯片，其特征在于，所述检测探针的5’端设置有6-20个单核苷酸组成的重复序列。3.根据权利要求1所述的基因芯片，其特征在于，所述基因芯片上还包括PolyA探针、阳性质控探针和阴性质控探针。4.权利要求1-3中任一项所述的基因芯片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)在衬底上镀膜，得到生物传感器；(2)在生物传感器上覆盖涂层，经6-肼基烟酸琥珀酰亚胺酯盐酸盐处理后，水洗；(3)将探针点样在生物传感器上，制得基因芯片。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，采用醛基或氨基对探针在生物传感器的点样端进行修饰。6.一种检测TORCH病原体的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1-3中任一项所述的基因芯片、检测引物和RPA相关酶。7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述检测引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物包括TOX-F、CMV-F、HSVI-F和HSVII-F，其序列依次为SEQIDNO.7-10；所述下游引物包括TOX-R、CMV-R、HSVI-R和HSVII-R，其序列依次为SEQIDNO.11-14，所述下游引物的5’端标记有生物素。8.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括杂交缓冲液、洗涤液、BW反应液和TMB显色液。9.权利要求6-8任一项所述试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取待测物的DNA，采用检测引物和RPA相关酶进行等温扩增，得到扩增产物；(2)在基因芯片上加入扩增产物和杂交缓冲液，进行反应；(3)用SSC溶液对基因芯片进行洗涤，洗涤后风干；(4)取BW反应液于基因芯片上，在室温条件下反应；(5)加入TMB显色液进行显色，加入TMB显色液的前后均使用SSC溶液对基因芯片进行洗涤并风干，通过拍照或肉眼读取检测结果。10.根据权利要求9所述的使用方法，其特征在于，步骤(1)中扩增过程为：37-42℃下反应15-35min。2CN112029905A说明书1/7页一种检测TORCH病原体的基因芯片和试剂盒技术领域[0001]本发明属于体外基因检测技术领域，特别涉及一种检测TORCH病原体的基因芯片和试剂盒。背景技术[0002]TORCH指可导致先天性宫内感染及围产期感染而引起围产儿畸形的病原体，它是一组病原微生物的英文名称缩写，其中T(Toxoplasma)是弓形虫，O(Others)是其他病原微生物，如梅毒螺旋体、带状疱疹病毒、细小病毒B19、柯萨奇病毒等，R(Rubella.Virus)是风疹病毒，C(Cytomegalo.Virus)是巨细胞病毒，H(Herpes.Virus)即是单纯疱疹I/II型，由此组病原体所引起的感染称之为TORCH感染。[0003]弓形虫(ToxoplasmaGondii)也叫三尸虫，属于专性细胞内寄生虫，球虫亚纲，真球虫目，等孢子球虫科、弓形体属。弓形虫可随血液流动到达全身各部位，破坏大脑、心脏、眼底，致使人的免疫力下降，从而导致多种疾病发生。[0004]弓形虫属于形体最小、结构简单的一类叫作原虫的寄生虫。猫和其他猫科动物是弓形虫的终宿主，它寄生在这些动物的小肠上皮细胞内，形成囊合子，随粪便排出，其他哺乳动物和鸟吃进去发生感染，在它们身体的组织内