一种提高L-谷氨酸发酵产量和糖酸转化率的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112251474A(43)申请公布日2021.01.22(21)申请号202011297550.6C12R1/15(2006.01)(22)申请日2020.11.19(71)申请人乐康珍泰（天津）生物技术有限公司地址300457天津市滨海新区经济技术开发区洞庭路220号天津国际生物医药联合研究院实验楼13层，S1308申请人天津科技大学(72)发明人徐庆阳李志华刘景阳张宁杨柳(74)专利代理机构天津市三利专利商标代理有限公司12107代理人李蕊(51)Int.Cl.C12P13/14(2006.01)C12N1/20(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种提高L-谷氨酸发酵产量和糖酸转化率的方法(57)摘要本发明提供了一种提高L‑谷氨酸发酵产量和糖酸转化率的方法，将氨基酸螯合微量元素一部分添加到发酵培养基中，另一部分随葡萄糖流加发酵，所述氨基酸螯合微量元素由蛋氨酸螯合铁、蛋氨酸螯合锰和丙氨酸螯合锌组成，其中，氨基酸螯合微量元素由蛋氨酸螯合铁、蛋氨酸螯合锰和丙氨酸螯合锌的重量比为：10‑20：10‑15：2‑6；所述方法采用氨基酸螯合微量元素，一方面补充了发酵培养基中有效氨基酸的营养成分，另一方面增加了菌体对于微量元素的吸收效果，提高了菌体的生长活力和生产性能，从而提高了L‑谷氨酸的产量和糖酸转化率，发酵38h，菌体量（OD600）最高达到了40，L‑谷氨酸的产量为181g/L，糖酸转化率为68.1%，分别比常规发酵提高了17.6%、13.8%和3.1%。CN112251474ACN112251474A权利要求书1/1页1.一种提高L-谷氨酸发酵产量和糖酸转化率的方法，其特征在于：将氨基酸螯合微量元素一部分添加到发酵培养基中，另一部分随葡萄糖流加发酵，所述氨基酸螯合微量元素由蛋氨酸螯合铁、蛋氨酸螯合锰和丙氨酸螯合锌组成，其中，氨基酸螯合微量元素由蛋氨酸螯合铁、蛋氨酸螯合锰和丙氨酸螯合锌的重量比为：10-20：10-15：2-6。2.根据权利要求1所述的提高L-谷氨酸发酵产量和糖酸转化率的方法，其特征在于：具备步骤如下：（1）菌体活化：将保藏在-80℃冰箱中的生物素亚适量型谷氨酸棒杆菌接种到斜面上传代活化，传代两次；斜面培养基为蛋白胨5g/L，牛肉膏10g/L，酵母粉4g/L，玉米浆干粉25mL/L，KH2PO41g/L，MgSO40.2g/L，NaCl1g/L，琼脂粉25g/L，甲硫氨酸0.2g/L，pH=6.8-7.0；（2）种子培养：将活化好的菌株用无菌水洗脱，洗脱后全部接种到配置好的种子培养基中进行种子培养，所述种子培养基为：葡萄糖40g/L，玉米浆干粉10g/L，KH2PO42g/L，MgSO4·7H2O0.8g/L，蛋氨酸螯合铁80mg/L，蛋氨酸螯合锰60mg/L，丙氨酸螯合锌20mg/L；种子培养条件为：温度维持在32±2℃，溶氧控制在20-40%，pH通过氨水控制在近7.0；（3）发酵培养：当种子培养基中的菌体量（OD600）达到15以上时，按20%的接种量接种到发酵培养基，发酵过程中氨基酸螯合微量元素随葡萄糖溶液流加，所述氨基酸螯合微量元素包括蛋氨酸螯合铁、蛋氨酸螯合锰、丙氨酸螯合锌，各组分在葡萄糖溶液中的含量分别为100-200mg/L、100-150mg/L、20-60mg/L，所述发酵培养基为葡萄糖60g/L，玉米浆30g/L，豆浓20mL/L，KH2PO42.5g/L，MgSO4·7H2O1.2g/L，KCL1g/L，蛋氨酸螯合铁80mg/L，蛋氨酸螯合锰60mg/L，丙氨酸螯合锌20mg/L，甜菜碱1g/L，VB10.5mg/L；发酵培养条件为：温度控制在34±2℃，溶氧维持在30-50%，pH通过氨水控制在近7.0。3.根据权利要求2所述的提高L-谷氨酸发酵产量和糖酸转化率的方法，其特征在于：所述蛋氨酸螯合铁、蛋氨酸螯合锰、丙氨酸螯合锌在葡萄糖溶液中的含量分别为150-170mg/L、110-130mg/L、30-50mg/L。4.根据权利要求3所述的提高L-谷氨酸发酵产量和糖酸转化率的方法，其特征在于：所述蛋氨酸螯合铁、蛋氨酸螯合锰、丙氨酸螯合锌在葡萄糖溶液中的含量分别为160mg/L、120mg/L、40mg/L。5.根据权利要求2所述的提高L-谷氨酸发酵产量和糖酸转化率的方法，其特征在于：流加的所述葡萄糖溶液的质量浓度为80%，发酵过程中维持残糖含量为3-5g/L。2CN112251474A说明书1/4页一种提高L-谷氨酸发酵产量和糖酸转化率的方法技术领域[0001]本发明涉及L-谷氨酸发酵领域，尤其是一种提高L-谷氨酸发酵产量和糖酸转化率的方法。背景技术[0002]近几年来，随着L-谷氨酸在