防风的提取工艺研究.docx

防风的提取工艺研究摘要：本实验以5-O-甲基维斯阿米醇苷为指标对防风提取工艺进行研究。5-O-甲基维斯阿米醇苷最佳提取工艺为加入10倍量70%乙醇超声提取35分钟连续提取2次。本工艺稳定、可行、收率高。关键词：防风；提取；工艺防风是中药材是伞形科多年生草本植物防风的根。防风主要用于外感风寒、头痛、骨节酸痛、四肢挛急、目眩、风寒湿痹、破伤风等。《日华子本草》记载：“治三十六般风男子一切劳劣补中益神风赤眼止泪及瘫缓通利五脏关脉五劳七伤羸损盗汗心烦体重能安神定志匀气脉。”防风具有解热、镇痛、镇静、抗菌、抗炎作用等药理作用[1-4]。本实验以5-O-甲基维斯阿米醇苷为指标对防风提取工艺进行研究。1仪器与试药KQ250DE超声波清洗器超声波检测仪器（烟台鑫康商贸有限公司）；EX1600四元低压梯度液相色谱仪（南京皓而普分析设备有限公司）；FA1204CFAC型全自刃k子分析天平（北京同德创业科技有限公司）；PHS-550智能型台式酸度计（杭州陆恒生物科技有限公司）；实验室用高纯水制备器（北京科誉兴业科技发展有限公司）；TMSH-6050B超级恒温水槽（上海添时科学仪器有限公司）；UV1600紫外可见分光光度计（西安华辰乐天实验室设备有限公司）。5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品（中国药品生物制品检定所提供）。乙腈（广州市西陇化工有限公司）；甲醇（北京亚太龙兴化工有限公司）；乙醇（北京亚太龙兴化工有限公司）。2方法与结果2.1单因素考察2.1.1提取次分别取药材粉碎为20目精密称定至于圆底烧瓶内分别提取四次第一次加10倍70%乙醇超声提取25分钟过滤减压浓缩；第二次加10倍70%乙醇超声提取25分钟连续提取两次过滤合并滤液减压浓缩；第三次加10倍70%乙醇超声提取25分钟连续提取三次过滤合并滤液减压浓缩。第四次加10倍70%乙醇超声提取25分钟连续提取四次过滤合并滤液减压浓缩。采用高效液相测定浓缩膏中5-O-甲基维斯阿米醇苷含量并计算5-O-甲基维斯阿米醇苷收率。2.1.2药材粉碎目数分别取药材分别粉碎为10目、20目、40目精密称定至于圆底烧瓶内加10倍70%乙醇超声提取25分钟连续煎煮三次过滤合并滤液减压浓缩。采用高效液相测定浓缩膏中5-O-甲基维斯阿米醇苷含量并计算5-O-甲基维斯阿米醇苷收率。2.1.3加醇倍数分别取药材粉碎为20目精密称定至于圆底烧瓶内分别提取四次第一次加14倍70%乙醇超声提取25分钟连续四次第二次加12倍70%乙醇超声提取25分钟连续四次第三次加10倍70%乙醇超声提取25分钟连续四次第四次加8倍70%乙醇超声提取25分钟连续四次分别过滤合并滤液减压浓缩。采用高效液相测定浓缩膏中5-O-甲基维斯阿米醇苷含量并计算5-O-甲基维斯阿米醇苷收率。2.1.4提取时间分别取药材粉碎为20目精密称定至于圆底烧瓶内分别提取三次第一次加10倍70%乙醇超声提取25分钟连续四次第二次加10倍70%乙醇超声提取30分钟连续四次第三次加10倍70%乙醇超声提取35分钟连续四次分别过滤合并滤液减压浓缩。采用高效液相测定浓缩膏中5-O-甲基维斯阿米醇苷含量并计算5-O-甲基维斯阿米醇苷收率。2.2正交试验设计实验结果表明粉碎目数对5-O-甲基维斯阿米醇苷收率影响不大提取次数、加醇倍数和提取时间对5-O-甲基维斯阿米醇苷收率影响较大。选择提取次数、加醇倍数和提取时间作为考察因素采用正交试验法对影响提取效率的其它工艺条件进行优选。采用3个考察水平用L9（34）正交表进行试验因素水平表见表1。3含量测定3.1色谱条件：依据查阅文献及考查的结果确定色谱条件如下[5]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm5μm）；流动相以甲醇：水（4：6）；检测波长为254nm；流速1.0mL・min-1；柱温：35℃。理论板数按5-O-甲基维斯阿米醇苷峰计算应不得低于2000。3.2供试品溶液的制备取提取膏适量精密量取置50mL量瓶中加50%乙醇适量超声处理十分钟放置至室温加50%乙醇稀释至刻度过滤精密吸取25mL续滤液蒸干残渣加水20mL分次充分溶解转移至分液漏斗中用水饱和的正丁醇提取3次每次20mL合并正丁醇液用正丁醇饱和的氨试液洗涤3次每次10mL。分取正丁醇液置水浴上蒸干残渣用50%甲醇分次溶解转移到10mL量瓶中加50%甲醇至刻度摇匀用微孔滤膜（0.45μm）滤过即得。3.3对照品溶液的制备分别精密称取5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品5mg置250mL容量瓶中用甲醇