利用酶膜反应器连续制备蚕蛹蛋白抗氧化肽的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利(10)授权公告号(10)授权公告号CNCN103233054103233054B(45)授权公告日2014.07.23(21)申请号201310137894.4张明春等.酶解与膜法联用制备蚕蛹生物功能活性肽.《食品科学》.2005,第26卷(第8期),(22)申请日2013.04.19第156-157页.(73)专利权人江苏科技大学地址212003江苏省镇江市梦溪路2号审查员蔡苗(72)发明人贾俊强吴琼英桂仲争颜辉(74)专利代理机构南京经纬专利商标代理有限公司32200代理人楼高潮(51)Int.Cl.C12P21/06(2006.01)C07K1/34(2006.01)(56)对比文件CN102212600A,2011.10.12,第[0006]-[0013]段、实施例1-3、图1.CN1546682A,2004.11.17,全文.CN101215594A,2008.07.09,全文.权权利要求书1页利要求书1页说明书4页说明书4页附图2页附图2页(54)发明名称利用酶膜反应器连续制备蚕蛹蛋白抗氧化肽的方法(57)摘要利用酶膜反应器连续制备蚕蛹蛋白抗氧化肽的方法，先将蚕蛹蛋白用蒸馏水配制成悬浮液，利用均质机均质后，与内切酶一起加入到酶膜反应器中进行连续制备抗氧化肽，酶解产物溶液透过超滤膜，未完全反应的蚕蛹蛋白和内切酶被截留后重新流至反应罐中继续反应，透过超滤膜的酶解产物透过液被收集，经浓缩后喷雾干燥，即得到粉末状蚕蛹蛋白抗氧化肽产品。本发明所得到的蚕蛹蛋白抗氧化肽具有良好的活性，其清除DPPH自由基的IC50为0.9-1.6mg/mL，清除羟自由基能2+力的IC50为0.2-0.6mg/mL，螯合Fe能力的IC50为1.4-2.7mg/mL。CN103233054BCN103254BCN103233054B权利要求书1/1页1.利用酶膜反应器连续制备蚕蛹蛋白抗氧化肽的方法，其特征为：将蚕蛹蛋白用蒸馏水配制成4.0％溶液，均质后调节其pH至7.5，加热至60℃后和中性蛋白酶一起加入到反应罐中，搅拌均匀后进行酶膜反应，加酶量为6000U/g，pH为7.5，温度为60℃，超滤膜的截留分子量为10kDa，超滤压力为0.9kg/cm2，出肽速率为4mL/min；酶解产物溶液透过超滤膜，未完全反应的蚕蛹蛋白和中性蛋白酶被截留后重新流至反应罐中继续反应，透过超滤膜的酶解产物透过液被收集；同时，在酶膜反应过程中依据酶解产物透过液中肽的浓度，在反应罐中补充相同浓度的蚕蛹蛋白溶液；收集的酶解产物透过液用真空浓缩装置浓缩至肽含量8％左右，在进风温度220℃和出风温度110℃下进行喷雾干燥，即得到粉状蚕蛹蛋白抗氧化肽产品；所用的酶膜反应器，通过管道连接各单元，包括原料储存罐（1）、蛋白酶储存罐（2）和碱液储存罐（3），其中原料储存罐设于储存罐恒温水浴（5）中，三个储存罐分别与反应罐（6）连接，所述反应罐内设有搅拌器（8）和pH检测器（4）探头，罐体设于反应罐恒温水浴（7）中，反应罐出料口与超滤膜组件（11）进口连接，连接管道上设有泵（9）和压力表（10），超滤膜组件设有两个出口，其中回流出口与反应罐连接，连接管道上设有控制阀（13），另一个出口与透过液储存罐（12）连接。2CN103233054B说明书1/4页利用酶膜反应器连续制备蚕蛹蛋白抗氧化肽的方法技术领域[0001]本发明涉及食品生物化学领域，可作为功能性添加剂用于食品、化妆品和药物，具体涉及一种利用酶膜反应器连续制备蚕蛹蛋白抗氧化肽的方法。背景技术[0002]自由基与人类许多慢性疾病如癌症、冠状动脉心脏病和老年痴呆症等有关，因此，清除体内自由基能够提高机体对疾病的抵抗和预防能力，目前已引起社会各界的广泛关注。人工合成的抗氧化剂如丁基羟基茴香醚（BHA）和2,6-二叔丁基对甲基酚等（BHT）常被作为食品添加剂用于保鲜，但人工合成的抗氧化剂对人类健康具有一定的危害，因而，开发高效、安全的抗氧化剂成为人们研究的热点。抗氧化肽作为生物活性肽的一种，具有成本低、效果好和食用安全等特性，适宜作为人类保健的抗氧化剂使用。现已从麦胚蛋白、燕麦蛋白、花生蛋白和胶原蛋白等食源蛋白中获得了大量高活性的抗氧化肽。[0003]蚕蛹中蛋白含量约为60%左右，氨基酸种类齐全，组成合理，但因其在缫丝过程中受到热和碱液处理，蛋白不仅具有异味，而且蛋白严重变性，因而限制了蚕蛹蛋白在工业中的应用。现主要被作为饲料使用，经济价值极低。开发蚕蛹蛋白抗氧化肽对有效利用蚕蛹资源具有重要意义。中国专利CN102690322A（申请公布号）中公开了一种蚕蛹蛋白酶解抗氧化肽的脱色方法，脱色后的蚕蛹蛋白抗氧化肽可用于保健食品行业。王伟等报道了利用双酶分步法制备蚕蛹蛋白抗氧化肽，所得的酶解