蒲公英中绿原酸纤维素酶法提取工艺.doc

蒲公英中绿原酸纤维素酶法提取工艺的优化摘要：为了研究纤维素酶法提取蒲公英（ｔａｒａｘａｃｕｍｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍｈａｎｄ．－ｍａｚｚ）中绿原酸的工艺通过单因素试验探讨加酶量、料液比、提取温度、提取时间、ｐｈ对绿原酸提取率的影响并通过正交试验对影响绿原酸提取率的参数进行优化。结果表明蒲公英中绿原酸提取的最佳工艺条件为ｐｈ６．０、加酶量３．０ｍｌ、提取温度５０℃、提取时间１．０ｈ此条件下绿原酸提取率为１０．０３１ｍｇ／ｇ。关键词：蒲公英（ｔａｒａｘａｃｕｍｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍｈａｎｄ．－ｍａｚｚ）；绿原酸；提取工艺ａｂｓｔｒａｃｔ：ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄｉｎｄａｎｄｅｌｉｏｎ（ｔａｒａｘａｃｕｍｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍｈａｎｄ．－ｍａｚｚ．）ｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙｃｅｌｌｕｌｏｓｅ．ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｎｚｙｍｅｄｏｓａｇｅｒａｗｍａｔｅｒｉａｌｔｏｓｏｌｖｅｎｔｒａｔｉｏｔｒｅａｔｍｅｎｔｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｔｉｍｅａｎｄｐｈｏｎｔｈｅｙｉｅｌｄｏｆｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄｗｅｒｅｏｐｔｉｍｉｚｅｄｂｙｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｂａｓｅｄｏｎｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒｔｅｓｔｓ．ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅｐｈ６．０；ｅｎｚｙｍｅｄｏｓａｇｅ３．０ｍｌ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ５０℃；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ１．０ｈ；ｔｈｅｙｉｅｌｄｏｆｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄｕｎｄｅｒｔｈｅｓｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗａｓ１０．０３１ｍｇ／ｇ．ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｔａｒａｘａｃｕｍｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍｈａｎｄ．－ｍａｚｚ；ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ蒲公英（ｔａｒａｘａｃｕｍｍｏｎｇｏｌｉｃｕｍｈａｎｄ．－ｍａｚｚ）别名蒲公草、黄花地丁、黄花三七、婆婆丁等原产于欧洲在中国大部分地区均有分布其味甘苦性寒既是营养保健野菜也是常用的中药材为药食同源植物之一是开发绿色天然植物型营养保健品理想的宝贵资源。蒲公英含碳水化合物、脂肪、蛋白质、多种矿物质、微量元素以及维生素等营养成分此外还含有蒲公英甾醇、蒲公英苦素、皂苷、胆碱、肌醇、咖啡酸、绿原酸、黄酮类等功能性化学成分对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性链球菌、卡他球菌均有显著的抑制作用即具有广谱抑菌作用此外还具有利胆保肝、抗胃损伤、抗肿瘤、抗氧化、增强免疫等功能［１２］。其中的绿原酸是一种多酚类物质具有重要的生理活性有抗氧化、抗艾滋病毒、抗致畸、抗过敏、抗肿瘤细胞毒活性、对透明质酸酶和葡萄糖－６－磷酸酶有抑制作用等功能［3］。因此蒲公英及其绿原酸成为功能性食品研究开发的热点中国国内外已开发出蒲公英饮料、蒲公英酒、咖啡、糕点、糖果以及蒲公英花粉和蒲公英根粉等保健食品。目前绿原酸提取的原料主要是金银花、杜仲叶另外有葵粕、稻壳、甘薯、杭白菊、牛蒡叶等［4－１５］其中蒲公英来源丰富部分学者用水提或醇提方法进行了蒲公英中绿原酸提取的研究［１６］而纤维素酶法具有条件温和、没有溶剂残留等优点。研究采用纤维素酶法提取蒲公英中的绿原酸用分光光度法测定提取液中绿原酸含量计算绿原酸提取率并对影响绿原酸提取率的因素进行了初步探讨优化了绿原酸提取的工艺为提高蒲公英的综合利用价值提供参考。１材料与方法１．１材料１．１．１原料与试剂蒲公英为２０１１年５月２７日采自山东省烟台市郊区的农田将其于低温烘干粉碎过４０目筛；３５ｋｕ／ｇ纤维素酶购自北京梦怡美生物科技有限公司使用前配成5g/l纤维素酶；绿原酸标准品（纯度＞９８％）购自北京中科三捷生物有限公司；无水甲醇、无水乙醇、盐酸均为分析纯。１．１．２仪器与设备ｈｗ·ｙｓ型数显恒温水浴锅购自浙江舟山市定海区海源仪器厂电子分析天平购自赛多利斯科学仪器（北京）有限公司ｔ６新世纪紫外可见分光光度计购自北京普析通用仪器有限公司ｐｈｓ－３ｃ型精密酸度计购自上海精密科学仪器有限公司。１．２方法１．２．１纤维素酶法１）工艺流程。选材→称量→加去离子水→加酶液→水浴加热→灭酶→用壳聚糖澄清→抽滤→取滤液定容→用分光光度法测定计算绿原酸提取率。绿原酸提取率＝提取液中绿原酸质量（ｍｇ）／原料用量（ｇ）２）单因素试验。酶法提取的效果主要取决于加酶量、提取温度、