一种海带内生地衣芽孢杆菌蛋白及其在保鲜方面的应用和应用方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103966283103966283A(43)申请公布日2014.08.06(21)申请号201310034681.9A23L3/3463(2006.01)(22)申请日2013.01.30A23B4/20(2006.01)C12R1/10(2006.01)(83)生物保藏信息CGMCCNo.70772012.12.31(71)申请人大连海洋大学地址116000辽宁省大连市西岗区黄河路219号申请人张付云(72)发明人张付云杨阳苍桂璐王维才徐凤(74)专利代理机构大连非凡专利事务所21220代理人曲宝威(51)Int.Cl.C12P21/00(2006.01)权利要求书1页权利要求书1页说明书3页说明书3页(54)发明名称一种海带内生地衣芽孢杆菌蛋白及其在保鲜方面的应用和应用方法(57)摘要一种海带内生地衣芽孢杆菌蛋白，制备步骤为：取菌株为海带内生地衣芽孢杆菌DNN6进行培养，液体培养基配方为：蔗糖50g/L和蛋白胨10g/L，pH调配成9；地衣芽孢杆菌发酵条件：每瓶装150-250mL液体培养基，温度25-30℃，转速为150-250rpm,摇床培养3-6天；在8000r/min条件下离心去除菌体的发酵液，在50℃下减压浓缩至原体积的二分之一，然后加入硫酸铵，硫酸铵的饱和终浓度为95%，4℃静置过夜，过滤将沉淀用蒸馏水溶解后，再用截留分子量为3600道尔顿的透析袋透析4天，取透析袋中物冷冻干燥，得海带内生地衣芽孢杆菌蛋白。将该海带内生地衣芽孢杆菌蛋白配制成200μg/mL的溶液，用于食品保鲜。本发明制备过程简单、成本低廉。CN103966283ACN1039628ACN103966283A权利要求书1/1页1.一种海带内生地衣芽孢杆菌蛋白，其特征在于：按如下步骤制备：a.取菌株为海带内生地衣芽孢杆菌DNN6（BacilluslicheniformisDNN6），该菌株已于2013年1月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号:CGMCCNo:7077；b.地衣芽孢杆菌DNN6的液体培养基配方为：蔗糖50g/L和蛋白胨10g/L，pH调配成9；c.地衣芽孢杆菌发酵条件：每瓶装150-250mL液体培养基，温度25-30℃，转速为150-250rpm,摇床培养3-6天；d.在8000r/min条件下离心去除菌体的发酵液，在50℃下减压浓缩至原体积的二分之一，然后加入硫酸铵，硫酸铵的饱和终浓度为95%，4℃静置过夜，过滤将沉淀用蒸馏水溶解后，再用截留分子量为3600道尔顿的透析袋透析4天，取透析袋中物冷冻干燥，得海带内生地衣芽孢杆菌蛋白。2.一种根据权利要求1所述的海带内生地衣芽孢杆菌蛋白在保鲜方面的应用。3.一种根据权利要求2所述的海带内生地衣芽孢杆菌蛋白在保鲜方面的应用方法，其特征在于：将该海带内生地衣芽孢杆菌蛋白配制成200μg/mL的溶液，用于食品保鲜，所述的食品包括水产品。2CN103966283A说明书1/3页一种海带内生地衣芽孢杆菌蛋白及其在保鲜方面的应用和应用方法技术领域[0001]本发明涉及食品保鲜领域，特别是一种海带内生地衣芽孢杆菌蛋白及其在保鲜方面的应用和应用方法。背景技术[0002]水产品具有低脂肪、高蛋白的特点，是合理膳食结构中不可缺少的重要组分，已成为人们摄取动物性蛋白质的重要来源。并且鱼、虾、蟹等水产品肉质鲜美，风味独特，具有“海鲜”之美称，深受广大消费者的青睐。水产品的鲜度是其最主要的品质指标，是决定其价格的主要因素，另外水产品容易腐败变质，因此加强水产品的保鲜技术研究，延长水产品的保质期和货架期，使新鲜水产品能够远距离运输，满足非沿海城市消费者对水产品的需求，对带动我国水产养殖业的发展具有重大意义。[0003]水产品等目前常用的保鲜剂从来源上分可以分为化学保鲜剂和天然保鲜剂，化学保鲜剂虽然化学防腐剂效果快、使用方便，但存在一些安全隐患，其残留还会引起化学药剂污染，因此人们将目光转向对副作用小、时效长的天然防腐保鲜剂的开发。近年来，生物保鲜技术已有了一定的发展，尤其在生物提取物保鲜方面进展迅速，但仍存在很多问题。一是酶制剂等价格昂贵限制了其推广应用，二是许使用的天然微生物防腐保鲜剂，只有乳酸球菌素和纳他霉素等少数几种，其他生物技术应用很少，整体发展缓慢，品种单一。发明内容[0004]本发明的目的是提供一种操作简单、成本低廉的一种海带内生地衣芽孢杆菌蛋白及其在保鲜方面的应用和应用方法，克服现有技术的不足。[0005]本发明的一种海带内生地衣芽孢杆菌蛋白，按如下步骤制备：a.取菌株为海带内生地衣芽孢杆菌DNN6（BacilluslicheniformisDNN6），该菌