仔猪饲用微生态发酵剂及其制备方法和活性固态发酵饲料.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105400706A(43)申请公布日2016.03.16(21)申请号201510861730.5A23K10/18(2016.01)C12R1/665(2006.01)(22)申请日2015.11.30C12R1/685(2006.01)(71)申请人朝阳市德凤生态养殖有限责任公司C12R1/74(2006.01)地址122000辽宁省朝阳市龙城区海龙街道C12R1/645(2006.01)科技大厦611室C12R1/865(2006.01)(72)发明人王凤娥张福娟马文波郭健C12R1/69(2006.01)董德民王雨时(74)专利代理机构锦州辽西专利事务所21225代理人李辉葛春波(51)Int.Cl.C12N1/14(2006.01)A23K50/30(2016.01)A23K10/30(2016.01)A23K10/37(2016.01)权利要求书2页说明书9页(54)发明名称仔猪饲用微生态发酵剂及其制备方法和活性固态发酵饲料(57)摘要一种仔猪饲用微生态发酵剂及其制备方法和活性固态发酵饲料，通过对多个菌株的筛选和组合，按照重量份数计由如下原料配制而成：泡盛曲霉(Aspergillusawamori)1～3份、黑曲霉(Aspergillusniger)1～3份、热带假丝酵母(Candidatropicalis)2～4份、白地霉(Geotrichumcandidum)2～4份、扣囊复膜孢酵母(Saccharomycescerevisiae)1～3份、宇佐美曲霉(Aspergillususamii)2～4份和米曲霉(Aspergillusoryzae)2～4份。解决现有微生物发酵制剂存在的过于单一、发酵不全面和发酵效果差的问题，达到提高产品质量和降低生产成本的目的，提高营养饲料的营养效价和利用率。应用本发明的饲料饲养仔猪，具有促进生长和增强抗病能力效果显著、饲料利用效率高以及减轻养殖环境污染等特点；饲养的仔猪，无抗生素、激素等药物残留，营养丰富且口味纯正天然。CN105400706ACN105400706A权利要求书1/2页1.一种仔猪饲用微生态发酵剂，其特征在于，按照重量份数计由如下原料配制而成：2.如权利要求1所述的仔猪饲用微生态发酵剂的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：步骤一、一级培养(1)配制PDA固体培养基A1、取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml；80℃浸泡1h，用纱布过滤，然后补足失水至1000ml；100Pa灭菌20min，即得20％马铃薯浸汁，贮存备用；A2、按每100ml马铃薯浸汁加入2g葡萄糖，加热煮沸后按每100ml马铃薯浸汁加入2g琼脂，继续加热融化并补足失水；A3、分装、加塞、包扎；A4、高压蒸汽灭菌，100Pa灭菌20min；A5、卧斜，待冷却后30℃恒温培养24h，排除冷凝水，观察试管培养基表面光滑无菌则可以进行接菌；(2)斜面接种将各菌种分别斜面接种，30℃恒温培养24～72h；步骤二、二级培养(1)三角瓶的制作工艺B1、装料：按照重量比,麸皮：水＝1:1的比例将两者进行拌料，每千克混合料加入2ml浓硫酸；B2、装入三角瓶内高度为20～25cm，装料为50g/瓶；B3、棉塞堵塞封口，再用16层无菌纱布封口；B4、高压蒸汽灭菌，100Pa灭菌20min。自然冷却；B5、接菌，接菌量每1g斜面接种20～25g物料；B6、28～32℃恒温培养，培养过程中每两个小时摇三角瓶一次，摊平；至24小时后扣瓶，培养6小时后扣瓶，全程36小时，得到种曲，粉碎后过40～60目筛，并测定样品酶活力；其中，按照国标方法酶活力定义如下：木聚糖酶活力：在37℃和pH5.5条件下，每分钟从浓度为5mg/ml的木聚糖溶液中降解释放1μmol还原糖所需要的酶量为1个酶活单位u；果胶酶活力：在37℃和pH5.5条件下，每分钟从浓度为4mg/ml的聚半乳糖醛酸溶液中2CN105400706A权利要求书2/2页降解释放1μmol还原糖所需要的酶量为1个酶活单位u；纤维素酶活力：在37℃和pH5.5条件下，每分钟从浓度为4mg/ml的羧甲基纤维素钠溶液中降解释放1μmol还原糖所需要的酶量为1个酶活单位u；淀粉酶活力：在37℃、pH6.8的条件下，每分钟水解淀粉生成1mg还原糖所需的酶量；所得二级发酵产物要求细菌总数≥108cfu/g,总酶活≥500u/g，低于此标准不在用于进行三级接种培养；步骤三、三级培养(1)筐式培养基的制作B1、装料：按照重量比将麸皮：水＝5:3的比例进行拌料，每公斤混合料加入2ml浓硫酸、1％硫酸铵；B2、高压灭菌100Pa，20min，自然冷却；B3、装入筐中高度2～3cm的培养基；B5、按筐式培养基物料重量