检测高效氯氟氰菊酯残留的试纸卡.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105807056A(43)申请公布日2016.07.27(21)申请号201610159895.2(22)申请日2016.03.21(71)申请人贵州勤邦食品安全科学技术有限公司地址550009贵州省贵阳市小河区小孟工业园标准厂房二期1#楼1-2楼(72)发明人扶胜冯才伟杨梅邓传玉谢体波陆苇刘红王大敏牛治存庞宏宇(51)Int.Cl.G01N33/577(2006.01)权利要求书1页说明书10页附图2页(54)发明名称检测高效氯氟氰菊酯残留的试纸卡(57)摘要本发明公开了一种检测高效氯氟氰菊酯残留的试纸及应用。试纸包括样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)和底板(7)，所述反应膜上具有包被有高效氯氟氰菊酯半抗原-载体蛋白偶联物的检测线(5)和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线(6)，所述结合物释放垫(2)包被有高效氯氟氰菊酯单克隆抗体-胶体金标记物。本发明还提供了一种应用上述试纸检测高效氯氟氰菊酯残留的方法。本发明所提供的试纸，具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低等特点，适合大量样本的筛查和现场监控。CN105807056ACN105807056A权利要求书1/1页1.一种检测高效氯氟氰菊酯残留的胶体金试纸卡，包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和PVC底板，其特征在于所述反应膜上有包被有高效氯氟氰菊酯-载体蛋白偶联物构成的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体构成的质控线，所述结合物释放垫包被有高效氯氟氰菊酯单克隆抗体-胶体金标记物，所述高效氯氟氰菊酯-载体蛋白偶联物由高效氯氟氰菊酯半抗原与载体蛋白偶联得到，所述高效氯氟氰菊酯半抗原的制备方法如下：（1）以高效氯氟氰菊酯为原料，溶于经干燥后的二氯甲烷中，通氮气保护，加入琥珀酸酐常温搅拌溶解，加入三氯化铝固体进行催化反应，用TLC薄层板监测反应进行，直至没有原料或原料点很浅，停止反应，硅胶柱净化，浓缩得产物，即为式I所示化合物；高效氯氟氰菊酯与琥珀酸酐的反应摩尔比为1：（1-3），优选为1:2，催化剂与高效氯氟氰菊酯质量比为1%-5%;（2）称取适量高效氯氟氰菊酯半抗原溶解于DMF溶液中，加入EDC和NHS进行活化30分钟，得到溶液I；将载体蛋白溶于含30%DMF水溶液中,得到溶液II;将溶液I加入到溶液II中，进行偶联，得到溶液III;用0.02mol/LPB缓冲液透析溶液III，获得高效氯氟氰菊酯抗原。2.如权利要求1所述的胶体金试纸卡，其特征在于所述的高效氯氟氰菊酯单克隆抗体-胶体金标记物中的高效氯氟氰菊酯单克隆抗体由高效氯氟氰菊酯半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原免疫动物获得；所述的载体蛋白为牛血清白蛋白、鼠血清蛋白、兔血清蛋白、甲状腺蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白或人血清白蛋白；所述羊抗鼠抗抗体是将鼠源抗体免疫羊得到的。3.如权利要求1所述的胶体金试纸卡，其特征在于所述的结合物释放垫的部分区域被覆盖于样品吸收垫之下。4.一种权利要求1～3任一项所述的胶体金试纸卡的制备方法，主要包括如下步骤：(1)制备包被有高效氯氟氰菊酯单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫；(2)制备具有包被有高效氯氟氰菊酯-载体蛋白偶联物构成的检测线和包被有羊抗鼠IgG构成的质控线的反应膜；(3)将(1)和(2)制备好的结合物释放垫、反应膜与样本吸收垫、吸水垫和PVC底板组装成试纸卡。5.一种应用权利要求1～4任一项所述的高效氯氟氰菊酯胶体金试纸卡检测高效氯氟氰菊酯残留的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)样品的前处理；(2)用胶体金试纸卡进行检测；(3)分析检测结果。2CN105807056A说明书1/10页检测高效氯氟氰菊酯残留的试纸卡技术领域[0001]本发明涉及一种检测高效氯氟氰菊酯残留的试纸卡，具体是一种检测高效氯氟氰菊酯残留的胶体金试纸卡。背景技术[0002]高效氯氟氰菊酯，英文名Lambda-Cyhalothrin，又称为爱克宁、λ-三氟氯氰菊酯，属拟除虫菊酯类，具有触杀作用的卫生杀虫剂，化学名称：α-氰基-3-苯氧苄基-3-(2-氯-3,3,3-三氯氟-1-丙烯基)-2,2-二甲基环丙烷羧酸酯(Z)-(1R,3R),S-酯及(Z),(1S,3S),R-酯的1:1混合物。具有触杀作用，是对环境卫生害虫极为有效的一种广效杀虫剂，具有击倒速度快、击倒力强，用药量少等优点。能消灭传播疾病的媒介害虫和防治各种卫生害虫。拟除虫菊酯类被称为是杀虫剂农药的一个新突破，是杀虫剂历史上的第三个里程碑。在农业生产上，用途广泛。[0003]对高效氯氟氰菊酯残留的检测，国家制定了严格的残留检测标准，如GB/T5009-2008《植物性食品中有机氯和拟除虫菊酯类农药多种残留的鉴定》、GB/T19649-2006《粮谷