一种烫骨碎补配方颗粒特征图谱及其建立方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106053658A(43)申请公布日2016.10.26(21)申请号201610514569.9(22)申请日2016.06.29(71)申请人四川新绿色药业科技发展股份有限公司地址610000四川省成都市彭州市致和镇东河东路279号(72)发明人周厚成胡昌江周维李文兵冯健(74)专利代理机构成都九鼎天元知识产权代理有限公司51214代理人吕玲钱成岑(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图4页(54)发明名称一种烫骨碎补配方颗粒特征图谱及其建立方法(57)摘要本发明涉及药物分析技术领域，具体为一种烫骨碎补配方颗粒特征图谱及其建立方法。该特征图谱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.1v/v％磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为290nm；柱温为20℃；流速为每分钟1.0ml。理论板数按柚皮苷峰计算应不低于50000。供试品特征图谱中应呈现6个特征峰，其相对保留时间应在规定值的±5％之内。规定值为：0.299（峰1）、0.446（峰2）、0.557（峰3）、0.579（峰4）、0.911（峰5）、1.00（峰6）。本方法根据配方颗粒的特点，加强专属性鉴别和多成分、整体质量控制，特建立了该品种的特征图谱，进行全面质量控制。CN106053658ACN106053658A权利要求书1/1页1.一种烫骨碎补配方颗粒特征图谱的建立方法，其特征在于包括以下步骤：参照物溶液的制备取5-羟甲基糠醛、原儿茶酸、柚皮苷对照品适量，加甲醇制成每1ml分别含20μg、80μg、60μg的溶液，即得参照物溶液；供试品溶液的制备取烫骨碎补配方颗粒适量，研细，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流40分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，即得供试品溶液；测定分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，按照高效液相色谱法测定，记录色谱图，即得烫骨碎补配方颗粒特征图谱；其中色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.1v/v％磷酸溶液为流动相B，按规定进行梯度洗脱，检测波长为290nm；柱温为20℃；流速为每分钟1.0ml。2.根据权利要求1所述烫骨碎补配方颗粒特征图谱的建立方法，其特征在于所述的按规定进行梯度洗脱的条件为：0-10min，流动相A的体积百分比为2%-15%，流动相B的体积百分比为98%-89%；10-15min，流动相A的体积百分比为15%，流动相B的体积百分比为85%；15-27min，流动相A的体积百分比为15%-27%，流动相B的体积百分比为85%-73%；27-35min，流动相A的体积百分比为27%-40%，流动相B的体积百分比为73%-60%；35-50min，流动相A的体积百分比为40%-50%，流动相B的体积百分比为60%-50%。3.根据权利要求1所述烫骨碎补配方颗粒特征图谱的建立方法建立的特征图谱，其特征在于：特征图谱中呈现6个特征峰，其中3个峰应分别与相应的参照物峰保留时间相同，与柚皮苷参照物峰相应的峰为S峰，计算特征峰与峰6的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±5％之内，规定值为：峰1，0.299、峰2，0.446、峰3，0.557、峰4，0.579、峰5，0.911、峰6，1.00。2CN106053658A说明书1/8页一种烫骨碎补配方颗粒特征图谱及其建立方法技术领域[0001]本发明涉及药物分析技术领域，具体为一种烫骨碎补配方颗粒特征图谱及其建立方法。背景技术[0002]骨碎补，为水龙骨科植物槲蕨的干燥根茎，疗伤止痛，补肾强骨，外用消风祛斑，该药材及其饮片的质量标准收载于《中国药典》2015年版一部。然而，关于烫骨碎补配方颗粒却缺乏相应的质量标准。[0003]目前，公开关于烫骨碎补配方颗粒的测定方法的有《烫骨碎补配方颗粒的提取工艺优选及其含量测定》，其采用HPLC测定柚皮苷含量,流动相甲醇-乙酸-水(35∶4∶65),检测波长283nm。结果:最佳提取工艺为浸泡0.5h,加10,8倍量水提取2次,每次0.5h；柚皮苷质量分数0.77％,出膏率12.6％。柚皮苷在0.063-1.575μg与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率100.70％,RSD1.2％；暂定本品配方颗粒每1g含柚皮苷≥5.0mg。结论:该提取工艺和含量测定方法稳定可行,有效成分提取效率高,为烫骨碎补配方颗粒的生产和质量控制提供参考。但是，该文献是烫骨碎补配方颗粒的提取工艺及含量测定，其含量测定部分仅仅测定柚皮苷的含量，没有对其他成分进行控制，仅仅对其中的某一个成分