一种脆茎大麦的育种方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106106157A(43)申请公布日2016.11.16(21)申请号201610495902.6(22)申请日2016.06.29(71)申请人无锡南理工科技发展有限公司地址214192江苏省无锡市锡山区芙蓉中三路99号瑞云六座三楼(72)发明人安剑石许建中林少会(74)专利代理机构北京众合诚成知识产权代理有限公司11246代理人龚燮英(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书2页说明书7页(54)发明名称一种脆茎大麦的育种方法(57)摘要本发明公开一种脆茎大麦的育种方法，具有通过选种、茎秆强度测试、播种和移栽、杂交种F1的获取、杂交种F1的花药愈伤诱导步骤，将茎脆的遗传物质与抗倒伏的遗传物质保留在大麦杂交种体内。通过本发明育种方法选育的脆茎大麦品种不仅容易被粉碎直接作为动物饲料使用，还具有很好的抗倒伏性能，具有广阔的市场应用前景。CN106106157ACN106106157A权利要求书1/2页1.一种脆茎大麦的育种方法，其特征在于：具体步骤如下：(1)选种：根据大田种植大麦材料目测情况，选择茎脆与不易倒伏的大麦种子材料分别作为用于杂交的亲本材料，茎脆的选择为茎秆表现最脆、株叶形态良好；(2)茎秆强度测试：用可显示压强的穿刺仪器在选取茎脆大麦种子材料的秸秆上进行测试，在不同分蘖的茎秆上进行同位置穿刺，并记录每次穿刺时该脆茎大麦刺穿瞬间的压强值，压强值越小证明其茎秆强度越低；(3)播种和移栽程序：将步骤(2)大麦种子材料浸种于稀释的浸种液中，浸种1～2天后，催芽并播种于实验田，单株移栽，株行距为30×30cm；一般大田肥水和病虫草害管理，至植株正常生长到扬花期，进行步骤(4)；(4)杂交种F1的获取：将母本植株的大麦穗浸入39～46℃的温水中，浸泡6～10分钟后取出，自然冷却30分钟，剪去l/3颖壳及未开颖的小花，用纸袋将母本植株的大麦穗套好并作标记，待用；当父本植株进入开花期时，将父本植株上大麦穗的花药均匀落到纸袋中母本植株大麦穗的柱头上，人工授粉完成后将纸袋继续套好，等待杂交大麦穗的籽粒成熟，即获得杂交种F1；(5)杂交种F1的花药愈伤诱导：杂交种F1正季播种，从大田中选取中部小花小孢子发育处于单核早期、中期的小穗，取穗后用70％乙醇表面消毒，然后用塑料薄膜包住整个大麦穗，保持大麦穗湿润放入冰箱中，在4℃下低温预处理3天；每个试管接5个穗子，倒入30ml提取液，用高速分散器超速旋切，用300目筛网过滤，滤液离心2～10min，重复3～5次，收集小孢子；小孢子用提取液于25℃、黑暗预处理2d；培养前将小孢子先用20％麦芽糖纯化，再用第一培养基洗涤1次，然后将小孢子悬浮液接种于第一培养基中，进行诱导培养，在22～28℃下暗培养2～3天后，转移至第二培养基中，于25～29℃、光周期16h7500lx光照8h黑暗下进行继代培养，继续培养出花培苗、育苗、移植到大田，等待籽粒成熟，通过筛选即获得脆茎大麦的新品系。2.根据权利要求1所述的一种脆茎大麦的育种方法，其特征在于：步骤(3)中所述浸种液为2mL10％二硫氰基甲烷乳油、2g咪酰胺、2mL70％吡虫啉水分散粒剂，加500倍水稀释配制而成。3.根据权利要求1所述的一种脆茎大麦的育种方法，其特征在于：步骤(4)中所述母本植株的大麦穗浸入的温水温度为40℃，所述浸泡时间为8分钟。4.根据权利要求1所述的一种脆茎大麦的育种方法，其特征在于：步骤(5)中所述提取液的成分为：10～15％甘露醇、1～2g/LCaCl2、1.2～1.5g/LN-吗啡乙烷磺酸MES，15～20％蔗糖。5.根据权利要求4所述的一种脆茎大麦的育种方法，其特征在于：所述提取液的成分为：12％甘露醇、1.5g/LCaCl2、1.3g/LN-吗啡乙烷磺酸MES，17％蔗糖。6.根据权利要求1所述的一种脆茎大麦的育种方法，其特征在于：步骤(5)中所述第一培养基的成分为：N6基础培养基1900mg/L、甘氨酸2.0mg/L，烟酸0.5mg/L，琼脂7.5g/L；激动素KT2.0mg/L，山梨醇25g/L，2-氨基-5-羧基戊酰胺500mg/L，丙氨酸0.6mg/L，叶酸0.5mg/L，秋水仙碱0.3mg/L；pH值为6.0。2CN106106157A权利要求书2/2页7.根据权利要求1或6所述的一种脆茎大麦的育种方法，其特征在于：步骤(5)中所述第二培养基的成分为：MS基本培养基1900mg/L、肌醇100mg/L，甘氨酸2.0mg/L，维生素B10.4mg/L，维生素B60.5mg/L，蔗糖25g/L，萘乙酸NAA0.5mg/L，生物素0.1mg/L，甲基亚硝基脲0.8mg/L，调环酸钙0.4mg/L，水解蛋白1.0g/L