兔肉中己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚标准样品、制备方法及应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106404492A(43)申请公布日2017.02.15(21)申请号201610961866.8(22)申请日2016.11.04(71)申请人辽宁省检验检疫科学技术研究院地址116000辽宁省大连市中山区长江东路60号(72)发明人王秋艳林维宣王贵滨牛承辉(74)专利代理机构大连博晟专利代理事务所(特殊普通合伙)21236代理人于忠晶(51)Int.Cl.G01N1/28(2006.01)权利要求书1页说明书10页附图3页(54)发明名称兔肉中己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚标准样品、制备方法及应用(57)摘要本发明提供一种兔肉中己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚标准样品的制备方法及应用，属于分析化学技术领域。用含有己烯雌酚、己二烯雌酚和己烷雌酚的饲料饲喂兔，使兔体内组织中含有己烯雌酚、己二烯雌酚和己烷雌酚，给药结束后宰杀取肌肉，均质匀浆，制成肉糜，真空冷冻干燥，过筛装瓶封装，得到含有己烯雌酚、己二烯雌酚和己烷雌酚的兔肉标准样品。该方法解决了目标物和基体结合情形与真实检测样品不完全一致而导致提取、净化等处理结果与日常分析样本存在较大差异的问题，标准样品为实物标准样品，均匀稳定，无防腐剂及抗氧化剂，易保存，用于非甾体类同化激素类药物残留测试项目的能力验证、检测方法的验证、测试仪器的校准、测试结果的质量控制与考核。CN106404492ACN106404492A权利要求书1/1页1.兔肉中己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚标准样品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A)、选择实验用兔，人工饲喂添加己烯雌酚、己二烯雌酚和己烷雌酚的饲料，使兔体内含有己烯雌酚、己二烯雌酚和己烷雌酚；B)、给药结束后，宰杀、取大块肌肉，搅碎，混匀制成肉糜，均质、真空冷冻干燥得到粗样；C)、研磨步骤B所述粗样，过筛，得到兔肉冻干粉标准样品；D)、封装所述标准样品，冷藏保存；E)、检验所述标准样品的均匀性和稳定性；F)、对所述标准样品中的己烯雌酚、己二烯雌酚和己烷雌酚含量进行定值。2.如权利要求1所述的兔肉中己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚标准样品的制备方法，其特征在于，所述步骤A中实验动物的选择，操作为：在养兔场筛选个体健康，体重1.5-2.5kg左右的獭兔，雌雄随机，在20℃-25℃环境下隔离，每日上午8时喂食1次，驯养3日后备用，给药前一天禁食。3.如权利要求1所述的兔肉中己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚标准样品的制备方法，其特征在于，所述步骤A中药物添加，操作为：称取己烯雌酚、己二烯雌酚和己烷雌酚三种药物各0.2~2.6g，同时加入到2.0kg饲料中，搅拌均匀，即配制出三种药物浓度为0.1~1.3g/kg的饲料A。4.如权利要求1所述的兔肉中己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚标准样品的制备方法，其特征在于，所述步骤A中采用人工饲喂方式进行实验，操作为：每只兔每日饲喂饲料A87g，即投药剂量为3.5~75.4mg/kg体重；每日给药一次，连续给药3-6日。5.如权利要求1所述的兔肉中己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚标准样品的制备方法，其特征在于，所述步骤B中的宰杀时间为最后一次给药结束后6~12h。6.如权利要求1所述的兔肉中己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚标准样品的制备方法，其特征在于，所述步骤B中的真空冷冻干燥条件为：预冷冻阶段：-80℃--30℃，相应预冷时间0.5-10h；真空冷冻阶段：压力控制在0.01-1.0mbar，相应时间8-15h；干燥升华阶段：-10℃-30℃，相应时间2-10h。7.如权利要求1所述的兔肉中己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚标准样品的制备方法，其特征在于，所述步骤C过筛的目数为30~80目。8.如权利要求1所述的兔肉中己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚标准样品的制备方法，其特征在于，所述步骤D中所用瓶子为带有铝箔垫片的白色聚乙烯塑料瓶，每瓶装10g冻干粉，电磁感应封盖，2-8℃冷藏保存。9.根据权利要求1~8中任一项所述的兔肉中己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚标准样品的制备方法制备的标准样品，其特征在于，所述标准样品中己烯雌酚、己二烯雌酚和己烷雌酚的含量为10~3000μg/kg。2CN106404492A说明书1/10页兔肉中己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚标准样品、制备方法及应用技术领域[0001]本发明属于分析化学领域，涉及一种兽药残留的自然基体标准样品的制备，具体地说，涉及一种兔肉中己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚残留基体冻干粉标准样品及其制备方法与应用。背景技术[0002]己烯雌酚(Diethylstilbestrol,DES)己烷雌酚(Hexoestrolum，HEX)和双烯雌酚(Dienestrol,DS)均属1,2-二苯乙烯类化合物，为非甾体类同化激