一种羧甲基几丁质临界水凝胶的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106474569A(43)申请公布日2017.03.08(21)申请号201611093569.2(22)申请日2016.12.02(71)申请人上海其胜生物制剂有限公司地址201106上海市闵行区吴漕路1008号(72)发明人魏长征吴祎宋瑞瑞蒋丽霞(51)Int.Cl.A61L31/04(2006.01)A61L31/14(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图2页(54)发明名称一种羧甲基几丁质临界水凝胶的制备方法(57)摘要本发明提供了一种全新的凝胶形式——临界凝胶的制备方法，即采用羧甲基几丁质为原料，天然无毒氨基酸——赖氨酸作为修饰物，经偶联试剂4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐（DMTMM）的催化作用制备而成。本凝胶的最主要特点是粘性模量和弹性模量始终相等，即拥有高粘性和高弹性两种特质。改性后凝胶的“临界态”可实现终端灭菌，延长了体内残留时间，实现单剂量注射；无毒的氨基酸修饰物保留了羧甲基几丁质固有的生物相容性和生物活性，不会带来任何的安全隐患；粘性模量和弹性模量同时增加且始终保持相等，提高了羧甲基几丁质的粘弹性能，同时保持其本身的原有的液体状态，易于注射减小疼痛。CN106474569ACN106474569A权利要求书1/1页1.一种羧甲基几丁质临界态水凝胶的制备方法，其特征在于：该凝胶针剂以羧甲基几丁质为基质，采用天然氨基酸——赖氨酸作为修饰物，经4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐（DMTMM）的催化作用后，完成一定程度的酰胺化反应，并经均质化处理、乙醇沉淀、真空干燥、复溶、灌装灭菌后制成。2.一种羧甲基几丁质临界态水凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将羧甲基几丁质溶于注射用水中，充分搅拌均匀，使其浓度达到0.5%-10%（w/v），然后依次加入赖氨酸与DMTMM，混匀后，调节pH值为4.0-8.5，于开始羧甲基几丁质的改性反应;（2）将步骤（1）中得到的反应混合物进行均质化处理，并在搅拌状态下缓慢滴加乙醇，过滤得到赖氨酸改性羧甲基几丁质临界态水凝胶干粉;（3）将步骤（2）中得到的干粉经过2-6次乙醇洗涤，并经真空干燥30min-24h后经真空干燥后，溶于磷酸盐缓冲液中，充分搅拌均匀，调节pH值为6.0-8.0，使其浓度达到0.5%-3%（w/v），得到透明均一的临界态凝胶;（4）将步骤（3）中得到的溶解后临界态凝胶罐装于一次性玻璃注射器中，经高温高压灭菌后得到可用于关节腔注射的羧甲基几丁质临界态水凝胶。3.权利要求1中的一定程度的酰胺化反应是指赖氨酸的交联度为1%-10%。4.权利要求2中步骤（1）的反应液中羧甲基几丁质的分子量为30-150万道尔顿，羧甲基取代度为0.5-2.0，脱乙酰度为5-50%。5.权利要求2中步骤（1）的反应液中赖氨酸的浓度为0.01%-25%（w/v）。6.权利要求2中步骤（1）的反应液中DMTMM的浓度为0.1%-10%（w/v）。7.权利要求2中步骤（1）的反应温度为2℃-60℃，反应时间为1h-240h。8.权利要求2中步骤（4）的灭菌参数为120℃-122℃，F0为9-11。2CN106474569A说明书1/4页一种羧甲基几丁质临界水凝胶的制备方法技术领域[0001]本发明涉及医用生物材料技术领域，具体涉及一种可注射、可水溶的、同时具有粘性与弹性的羧甲基几丁质临界态水凝胶的制备方法，该临界态水凝胶兼具粘性和弹性，在关节腔注射、眼科粘弹剂等方面有潜在应用价值。技术背景[0002]骨关节炎(osteoarthritis，OA)是影响人类健康最常见的关节疾患之一，是一种临床常见的由于关节软骨退行性变引起的以关节疼痛和关节功能障碍(包括关节畸形)为主要临床表现的疾病。其人群发病率约为5％以上，是导致50岁以上人群功能残疾、造成经济损失和影响社会发展的主要疾病之一。多年研究发现骨关节炎与外伤、炎症、衰老、代谢和免疫等因素有关。总体而言，OA的主要病理特征为关节软骨细胞凋亡和细胞外基质的进行性降解。骨关节炎的治疗目标是控制疼痛、改善关节功能和生活质量，尽可能避免治疗的毒副作用。目前，推荐的髋、膝关节骨关节炎的临床治疗包括非药物治疗，药物治疗以及外科手术治疗。对于轻度和中度关节炎患者及年轻患者，关节腔内注射粘弹补充剂是首选。[0003]目前市面上的关节腔注射液大都是以透明质酸钠为主，其主要作用机理为改善关节滑液的粘弹性，增加润滑作用，激活软骨组织的自身修复过程，抑制软骨基质的分解，增加蛋白聚糖聚集，诱导内源性透明质酸钠的产生；但由于透明质酸钠体内的半衰期仅为2-3天，因此体内残留时间非常短。为了提高关节腔注射的疗效，必须进行多次注射，这势必给患