可控药物释放速度的丝素蛋白纳米微球制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106729741A(43)申请公布日2017.05.31(21)申请号201710093172.1(22)申请日2017.02.21(71)申请人南通大学地址226019江苏省南通市啬园路9号(72)发明人张鲁中刘鑫杨宇民徐莉梁如宇鞠静怡(74)专利代理机构南京瑞弘专利商标事务所(普通合伙)32249代理人陈建和(51)Int.Cl.A61K47/62(2017.01)A61K47/42(2017.01)A61K9/16(2006.01)A61K31/573(2006.01)A61P25/00(2006.01)权利要求书2页说明书7页(54)发明名称可控药物释放速度的丝素蛋白纳米微球制备方法和应用(57)摘要一种负载甲强龙和地塞米松释放速度可控的丝素蛋白纳米微球，包括释放速度较慢与较快的丝素蛋白，所述的释放速度较慢与较快的丝素蛋白在溶解后，所述的药物释放速度较慢丝素蛋白透析后截留分子量为12000-14000；药物释放速度较快丝素蛋白透析截留的分子量为100-500；所述负载甲强龙和地塞米松的丝素蛋白纳米微球平均粒径为35-125nm。本发明负载甲强龙和地塞米松的释放速度可控的丝素蛋白纳米微球可以根据损伤后给药时间有效的控制特定剂量下甲强龙和地塞米松作用时间，控制半衰期的长短，同时在联合给药情况下可以有效的发挥药效，提高疗效，减少单独用药时的毒副作用和不良反应。CN106729741ACN106729741A权利要求书1/2页1.一种负载甲强龙和地塞米松释放速度可控的丝素蛋白纳米微球，其特征是包括释放速度较慢与较快的丝素蛋白，所述的释放速度较慢与较快的丝素蛋白在溶解后，所述的药物释放速度较慢丝素蛋白透析后截留分子量为12000-14000；药物释放速度较快丝素蛋白透析截留的分子量为100-500；所述负载甲强龙和地塞米松的丝素蛋白纳米微球平均粒径为35-125nm。2.根据权利要求1所述的负载甲强龙和地塞米松释放速度可控的丝素蛋白纳米微球的制备，其特征是将天然蚕丝纤维脱丝胶后使用溶剂溴化锂溶解和盐酸水解，得到不同分子量的丝素蛋白纳米微球，①使用溴化锂处理得到药物释放速度较慢的丝素蛋白微球；②使用盐酸处理得到药物释放速度较快的丝素蛋白微球；通过透析2-4天以去除盐分子：药物释放速度较慢丝素蛋白截留分子量：12000-14000，药物释放速度较快丝素蛋白截留分子量：100-500，得到具有慢速和快速药物释放速度的丝素蛋白溶液。3.根据权利要求2所述的方法，其特征是天然蚕丝脱丝胶的方法是，通过0.5±0.1％碳酸氢钠碱性溶液处理，经一至四次煮沸后清洗。4.根据权利要求2所述的方法，其特征是所述的负载甲强龙和地塞米松释放速度较慢的丝素蛋白微球，使用的溴化锂摩尔浓度是8.0-10M,水解温度为25-70℃，水解时间为180-250min，丝素蛋白与溴化锂溶液的质量体积比为1：20-25，经透析后待用；所述的负载甲强龙和地塞米松释放速度较快的丝素蛋白微球，经盐酸处理得到快速药物释放速度的丝素蛋白，具体制备方法是盐酸或氢氧化钠摩尔浓度是0.3-1M，水解温度为70-80℃，水解时间60-180min,三元溶液溶解时间20-40min，丝素蛋白与三元溶液的质量体积比为1:3-8，盐酸或氢氧化钠与含丝素蛋白三元溶液体积比为1：2-6，透析后待用。5.根据权利要求2所述的方法，其特征是丝素蛋白水溶液透析后再通过浓缩而成质量5-30％丝素蛋白溶液。然后可制备出负载有甲强龙和地塞米松的释放速度可控的丝素蛋白纳米微球。6.根据权利要求2-5之一释放速度可控的丝素蛋白纳米微球负载甲强龙和地塞米松的方法，具体步骤如下：首先将甲强龙和地塞米松(质量比5:1-5)按质量体积比1:3-20溶解到无水乙醇等有机溶剂中，然后在将得到的含有甲强龙和地塞米松的无水乙醇溶液在搅拌条件下按体积比1：2-20与上述得到的慢速和快速药物释放速度的丝素蛋白溶液分别充分混合均匀，然后得到的溶液置于-20℃冰箱中5-24小时，室温下解冻形成乳状乳液；然后将得到的乳液按体积比1:10-500加入到去离子水中透析3-8h以除去没有封装或吸附在丝素蛋白表面的甲强龙和地塞米松，之后除去有机溶剂，得到所述的负载甲强龙和地塞米松释放速度可控的丝素蛋白纳米微球。7.根据权利要求6所述的方法，其特征是上述提到的有机溶剂为乙醇、甲醇和丙醇等；所述的滴加过程在常温下进行；所述除去有机溶剂的方法为挥发。8.根据权利要求6所述的方法得到负载甲强龙和地塞米松的丝素蛋白纳米微球在治疗中枢神经系统损伤、急性脊髓损伤应用或作为可控甲强龙和地塞米松缓释时间的缓释制剂应用；即作为甲强龙和地塞米松的缓释制剂以控制在特定剂量下甲强龙和地塞米松作