棉籽粕中提取棉籽蛋白的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106801080A(43)申请公布日2017.06.06(21)申请号201710046307.9(22)申请日2017.01.22(71)申请人嵊州市派特普科技开发有限公司地址312400浙江省绍兴市嵊州市经济开发区浦南大道388号科创大楼301室(72)发明人施春华张美芬(74)专利代理机构北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙)11548代理人李静(51)Int.Cl.C12P21/06(2006.01)C07K1/36(2006.01)C07K1/34(2006.01)C07K1/30(2006.01)C07K1/14(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称棉籽粕中提取棉籽蛋白的方法(57)摘要本发明提供一种棉籽粕中提取棉籽蛋白的方法，操作步骤为：1）预处理；2）木质素酶酶解；3）棉铃虫活性酶液制备；4）棉铃虫酶液酶解；5）等电点沉淀；6）滤膜除杂、浓缩。有益效果为：超声波联合木质素酶酶解对棉籽细胞细胞壁的破坏彻底，棉籽细胞的细胞质流出量大，从而使棉籽蛋白的提取率提高；棉铃虫活性酶液能够酶解棉籽蛋白，将大分子的棉籽蛋白水解成小分子，增大棉籽蛋白在水中的溶解度，提高棉籽蛋白的提取率；用棉铃虫活性酶液酶解后的棉籽蛋白会具有较强的功能活性，如抗氧化性、抑菌；最后得到的棉籽蛋白的分子量小，易被人体吸收，纯度高，活性强，无溶剂残留，绿色安全。CN106801080ACN106801080A权利要求书1/1页1.棉籽粕中提取棉籽蛋白的方法，其特征在于以下步骤：1）预处理：将棉籽粕粉碎，加入脱脂剂，回流提取，取残留固体；2）木质素酶酶解：在固体中加入蒸馏水、木质素酶和助溶剂，超声波助溶，过滤；3）棉铃虫活性酶液制备：将棉铃虫洗净、匀浆，加入蒸馏水，超声波助溶，离心取上清液即为棉铃虫活性酶液；4）棉铃虫酶液酶解：在步骤2得到的滤液中加入步骤3得到的棉铃虫活性酶液，酶解，酶解结束后灭酶，过滤；5）等电点沉淀：调节步骤4得到的滤液的pH，搅拌，静置，离心，沉淀即为棉籽蛋白；6）滤膜除杂、浓缩：在步骤5得到的棉籽蛋白中加入蒸馏水，通过微滤膜装置进行除杂，滤过液在经过纳滤膜装置进行浓缩并去盐，干燥得粉状棉籽蛋白。2.根据权利要求1所述的棉籽粕中提取棉籽蛋白的方法，其特征在于：所述的步骤1中脱脂剂为石油醚-丙酮混合液，石油醚：丙酮体积比为1:0.9~1:1.5，棉籽粕粉末：混合液体积比为1:12~16，脱脂温度为50~60℃，每次脱脂40~50min，重复1~3次。。3.根据权利要求1所述的棉籽粕中提取棉籽蛋白的方法，其特征在于：所述的步骤2中固体：蒸馏水质量体积比为1g：（40~60）mL，木质素酶加入量为0.05~0.07%，酶解温度为36~42℃，pH为3.3~4.0，酶解时间为10~14h。4.根据权利要求1所述的棉籽粕中提取棉籽蛋白的方法，其特征在于：所述的步骤2中助溶剂成份及其重量份为：12~16份单月桂酸丙二醇酯、0.002~0.004份柴胡皂苷、5~9份壬基酚聚氧乙烯醚、0.005~0.007份烟酸和8~13份大豆卵磷脂，加入量为0.00003~0.00007%。5.根据权利要求1所述的棉籽粕中提取棉籽蛋白的方法，其特征在于：所述的步骤2中超声波功率为380~420W，超声波作用时间为30~40min。6.根据权利要求1所述的棉籽粕中提取棉籽蛋白的方法，其特征在于：所述的步骤3中匀浆：蒸馏水体积比为1:8~13，温度为56~60℃，pH为7.6~7.9，超声波功率为240~280W，超声时间为22~30min。7.根据权利要求1所述的棉籽粕中提取棉籽蛋白的方法，其特征在于：所述的步骤4中棉铃虫酶液：滤液体积比为1:400~420酶解温度为56~60℃，pH为5.4~5.9，酶解时间为1.2~1.8h。8.根据权利要求1所述的棉籽粕中提取棉籽蛋白的方法，其特征在于：所述的步骤5中调节滤液pH为4.4~4.6。9.根据权利要求1所述的棉籽粕中提取棉籽蛋白的方法，其特征在于：所述的步骤6中微滤膜装置的工作条件为：压力0.2~0.24Mpa，温度为42~49℃，流量为86~92L/min，微滤膜过滤孔径为0.8~1.0nm；纳滤膜装置的工作条件为：压力1.6~1.9Mpa，温度42~49℃，流量为18~20L/min，纳滤膜孔径为0.1~0.4nm。2CN106801080A说明书1/5页棉籽粕中提取棉籽蛋白的方法技术领域[0001]本发明涉及蛋白质提取技术领域，具体是一种棉籽粕中提取棉籽蛋白的方法。背景技术[0002]棉籽提取了油脂之后的棉籽粕中含有大量的蛋白质，其含量约为50%左右，是一种极为丰富的植物性蛋白质资源。棉籽蛋白的性质与大豆蛋