一种生物防粘连材料、制备方法及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106983918A(43)申请公布日2017.07.28(21)申请号201710125136.9(22)申请日2017.03.03(71)申请人北京博辉瑞进生物科技有限公司地址102600北京市大兴区中关村科技园区大兴生物医药产业基地药谷一号国际研发孵化园6#厂房西侧(72)发明人赵博王洪权夏磊磊赵延瑞李学军张晋辉(74)专利代理机构宁波市鄞州甬致专利代理事务所(普通合伙)33228代理人沈春红(51)Int.Cl.A61L31/14(2006.01)A61L31/00(2006.01)权利要求书2页说明书8页附图2页(54)发明名称一种生物防粘连材料、制备方法及其应用(57)摘要本发明提供一种生物防粘连材料、制备方法及其应用，其特征在于：该生物防粘连材料以动物的小肠粘膜下层组织材料为原料，然后去除免疫原性、并保留完整的细胞外基质成分制成，该生物防粘连材料包括第一表面、第二表面和位于中间的可降解吸收结构，所述第一表面为光滑面，所述第二表面为粗糙面，中间为渐变连接的可降解吸收结构。本发明防粘连材料的粗糙面有利于引导创面组织细胞的生长，从而修复创面；而光滑面则有利于阻止这些细胞粘连其它组织，从而有效地防止粘连。可用于腹腔、胸腔或盆腔中创面的防粘连处理。CN106983918ACN106983918A权利要求书1/2页1.一种生物防粘连材料，其特征在于：该生物防粘连材料以动物的小肠粘膜下层组织材料为原料，然后去除免疫原性、并保留完整的细胞外基质成分制成，该生物防粘连材料包括第一表面、第二表面和位于中间的可降解吸收结构，所述第一表面为光滑面，所述第二表面粗糙面，中间为渐变连接的可降解吸收结构。2.根据权利要求1所述的生物防粘连材料，其特征在于：所述动物为哺乳动物，优选猪或牛。3.根据权利要求1所述的生物防粘连材料，其特征在于：所述去除免疫原性是指细胞残留量小于10个、DNA残留量小于10ng/mg、半乳糖苷酶清除率为99％以上。4.根据权利要求1所述的生物防粘连材料，其特征在于：所述细胞外基质包含胶原蛋白、多糖物质、活性因子及生长因子；所述胶原蛋白为I型胶原蛋白及III型、IV型和VI型胶原蛋白的组合物；所述多糖物质为包含硫酸软骨素和透明质酸的组合物；所述活性因子包含纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、整合素及其配体的组合物；所述生长因子成分为碱性生长因子和血管内皮生长因子。5.根据权利要求1所述的生物防粘连材料，其特征在于：所述第一表面为经真空干燥组织材料所形成的表面；所述第二表面为经冷冻干燥组织材料所形成的表面；所述的可降解为在体内降解时间1-3个月；所述的生物防粘连材料拉伸断裂强度大于40N/cm，缝合保持力大于8N。6.一种生物防粘连材料的制备方法，其特征在于：步骤包括：(1)组织前置处理：取小肠粘膜下层组织材料，清洗并将水滤干；(2)病毒灭活：采用过氧乙酸-乙醇溶液浸泡小肠粘膜下层组织材料进行病毒灭活；(3)清洗：在超声环境下，分别用PBS溶液处理和水清洗；(4)免疫原去除：将步骤(3)清洗后得到的小肠粘膜下层组织材料进行免疫原去除，包括第一步采用NaOH溶液，超声振荡处理，处理后用盐酸清洗换液；第二步采用含有胰蛋白酶和EDTA的PBS溶液，多频超声振荡；第三步采用NaCl溶液，超声振荡；(5)清洗：在超声环境下，分别用PBS溶液和水清洗；(6)真空干燥：将由步骤(5)清洗的免疫原去除材料固定于模具并干燥；(7)冷冻干燥：将由步骤(5)清洗的免疫原去除的组织材料覆盖于经步骤(6)得到的干燥后的组织材料上，一同进行冷冻干燥。7.根据权利要求6所述的生物防粘连材料的制备方法，其特征在于：步骤(2)采用的过氧乙酸-乙醇溶液中过氧乙酸的体积百分比浓度为0.1％-5％、乙醇的体积百分比浓度为5％-40％，过氧乙酸-乙醇溶液与小肠粘膜下层组织材料的体积比为(3-20)︰1，灭活时间2-4小时，温度范围为10-40℃；步骤(3)清洗具体为：在超声波清洗机中用PBS溶液清洗，然后用水清洗至检测电导率为10μS/cm以下终止，得到小肠粘膜下层基质材料。其中PBS溶液pH值范围为6-8，所使用的水为经过纯化处理的纯化水；步骤(4)第一步采用浓度为0.1-0.5mol/L的NaOH溶液，超声振荡处理1-30min，温度20-25℃，溶液与小肠粘膜下层组织材料的体积比为20-40：1，超声波功率在3000W以上；处理后用浓度为0.1-0.5mol/L的盐酸溶液清洗换液，并调整pH至中性；第二步采用含有质量百分比浓度为0.01-0.2％的胰蛋白酶和浓度为0.1-1mmol/L的EDTA的pH值为7的PBS溶液，多频2CN106983918A权利要求书2/2页超声振荡10-80mi