可诱导的里氏木霉启动子.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107624129A(43)申请公布日2018.01.23(21)申请号201680029662.9(74)专利代理机构北京市金杜律师事务所(22)申请日2016.04.2211256代理人孟凡宏王月(30)优先权数据15536672015.04.23FR(51)Int.Cl.C12N1/15(2006.01)(85)PCT国际申请进入国家阶段日C12N1/38(2006.01)2017.11.22C12N9/42(2006.01)(86)PCT国际申请的申请数据C12N15/80(2006.01)PCT/FR2016/0509502016.04.22C12P19/00(2006.01)(87)PCT国际申请的公布数据C12P1/02(2006.01)WO2016/170283FR2016.10.27C12P7/10(2006.01)C12R1/885(2006.01)(71)申请人IFP新能源公司地址法国吕埃－马迈松(72)发明人C·德洛S·布朗凯权利要求书2页说明书16页序列表20页附图5页(54)发明名称可诱导的里氏木霉启动子(57)摘要本发明涉及其中纤维素酶基因的启动子的诱导性被改造的里氏木霉菌株。这些里氏木霉菌株的纤维素酶表达通过存在诱导底物来诱导，所述诱导底物对于非改造的里氏木霉菌株不发挥诱导作用或几乎不发挥诱导作用，同时保留其诱导底物对纤维素酶的诱导性。CN107624129ACN107624129A权利要求书1/2页1.一种里氏木霉的菌株，其基因组通过在编码纤维素酶的基因的启动序列中插入调控选自xyn1和xyn2的基因的启动序列的至少一个元件而被改造，这应理解为：-调控xyn1基因的启动序列的元件包含SEQIDNO：1所示的序列或SEQIDNO：3所示的序列；-调控xyn2基因的启动序列的元件包含SEQIDNO：2所示的序列或SEQIDNO：4所示的序列。2.权利要求1所述的菌株，其特征在于，所述插入发生在相对于编码所述纤维素酶的基因的翻译起始位点的位置-800和0之间。3.权利要求1或2所述的菌株，其特征在于，所述纤维素酶选自外切-β-1,4-葡聚糖酶或纤维二糖水解酶、内切-β-1,4-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶。4.权利要求1或2所述的菌株，其特征在于，所述纤维素酶是β-葡萄糖苷酶。5.权利要求4所述的菌株，其特征在于，所述β-葡萄糖苷酶的启动子包含选自SEQIDNO:5、6、8或9所示序列的序列。6.权利要求1-5任一项所述的菌株，其特征在于，所述菌株的纤维素酶生产可通过选自以下的诱导底物来诱导：-木聚糖；-木糖；-木糖寡聚物；-阿拉伯糖；-包含葡萄糖、木糖、半乳糖、甘露糖、纤维二糖和乙酸的组合物；和-它们的混合物。7.权利要求1-5任一项所述的菌株，其特征在于，所述菌株的纤维素酶生产可通过选自乳糖和纤维素或其混合物之一的底物和选自以下的诱导底物来诱导：-木聚糖；-木糖；-木糖寡聚物；-阿拉伯糖；-包含葡萄糖、木糖、半乳糖、甘露糖、纤维二糖和乙酸的组合物；和-它们的混合物。8.权利要求1-7任一项所述的菌株，其特征在于，所述菌株的纤维素酶生产可通过以下来诱导：-乳糖；-木糖；和-乳糖和木糖的混合物。9.权利要求4-7任一项所述的菌株，其特征在于，所述调控xyn1基因的启动序列的元件包含SEQIDNO:1所示的序列，且被插入至相对于编码β-葡萄糖苷酶的基因的翻译起始位点的位置-628和-411之间。10.权利要求4-7任一项所述的菌株，其特征在于，所述调控xyn1基因的启动序列的元2CN107624129A权利要求书2/2页件包含SEQIDNO:3所示的序列，且被插入至相对于编码β-葡萄糖苷酶的基因的翻译起始位点的位置-633和0之间。11.权利要求4-7任一项所述的菌株，其特征在于，所述调控xyn2基因的启动序列的元件包含SEQIDNO:2所示的序列，且被插入至相对于编码β-葡萄糖苷酶的基因的翻译起始位点的位置-396和-341之间。12.权利要求4-7任一项所述的菌株，其特征在于，所述调控xyn2基因的启动序列的元件包含SEQIDNO:4所示的序列，且被插入至相对于编码β-葡萄糖苷酶的基因的翻译起始位点的位置-395和0之间。13.一种突变盒，其包含选自SEQIDNO：10、11、13和14所示序列的序列。14.权利要求1-12任一项所述的菌株用于生产纤维水解酶的用途。15.权利要求1-12任一项所述的菌株用于将纤维素水解为葡萄糖的用途。16.权利要求1-12任一项所述的菌株用于生产生物来源于葡萄糖的产物的用途。17.权利要求1-12任一项所述的菌株用于生产生物燃料的用途。18.一种从纤维素或木质纤维素材料生产生物燃料的方法，包