一种疝补片、制备方法及其在疝修补中的应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108261565A(43)申请公布日2018.07.10(21)申请号201810128084.5(22)申请日2018.02.08(71)申请人北京桀亚莱福生物技术有限责任公司地址100084北京市海淀区农大南路88号1号楼B座四层B403室(72)发明人孙继煌石清东(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002代理人王文君陈征(51)Int.Cl.A61L27/36(2006.01)权利要求书2页说明书9页附图3页(54)发明名称一种疝补片、制备方法及其在疝修补中的应用(57)摘要本发明涉及一种疝补片、制备方法及其在疝修补中的应用。该疝补片是由异体皮原料经完全去除可引起宿主免疫排斥反应的所有细胞、完整地保留与原有组织结构相同的细胞外基质而制成；所述脱细胞异体真皮基质的拉伸强度3.0MPa-7.0MPa、缝合强度18N-22N、拉伸伸长率为10％-30％、顶破强度20KPa-30KPa。本发明疝补片具有诱导组织生成的作用，在植入人体后能被人体组织细胞识别为自体组织，很快有新生血管和成纤维细胞长入，引导细胞沿其胶原框架有序生长，达到补充、特别是快速修复的目的，补片补入后24周而不降解。CN108261565ACN108261565A权利要求书1/2页1.一种脱细胞异体真皮基质的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，将异体皮原料投入酶溶液中，浸泡振荡处理，得半成品A；所述酶为磷脂酶，或者所述酶为磷脂酶和蛋白酶；步骤二，将半成品A取出，用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品B；步骤三，将半成品B投入表面活性剂溶液中，超声浸泡处理，得半成品C；步骤四，将半成品C用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品D；步骤五，将半成品D投入DNA水解酶溶液中，振荡处理，得半成品E；步骤六，将半成品E用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品F；步骤七，将半成品F取出，投入交联剂溶液中，浸泡24-36小时，得半成品G；步骤八，将半成品G用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品H；步骤九，将半成品H用注射用水清洗浸泡，得成品I；或者，进一步地，还包括以下步骤：步骤十，将成品I取出，置于含有冻干保护剂的溶液中进行冷冻干燥，得成品J；或者，进一步还包括步骤十一，将成品J取出，包装，灭菌，得成品K。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤一中所述磷脂酶为磷脂酶A1、磷脂酶A2、磷脂酶C、磷脂酶D的一种或多种，更优选地，所述磷脂酶为磷脂酶A1、磷脂酶A2、磷脂酶C、磷脂酶D按照质量比为1:1:1:1的混合物；和/或，所述蛋白酶包括胰蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、dispase酶中的一种或多种。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤一中所述酶溶液pH值为7.0-8.0；和/或，优选地，磷脂酶浓度为0.05g/L-0.4g/L；和/或，优选地，所述蛋白酶的浓度为0.05g/L-0.2g/L。4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤一振荡处理条件为振荡0.5-4小时，振荡转速为10-200rpm，温度为10-40℃。5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤三所述表面活性剂溶液中含有0.1-0.3g/L的SDS，或所述表面活性剂溶液中含有0.1-0.3g/L的TritonX-100；优选地，超声浸泡条件为：40-80KHz，100-400W，温度为1-20℃，超声3-8分钟，浸泡2-4小时，重复2-4次。6.根据权利要求1-5任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤五中所述DNA水解酶溶液的浓度为4-8g/L，pH7.0-8.0；优选浓度为4-6g/L；和/或，所述步骤五中振荡处理条件为振荡2-8小时，振荡转速为10-200rpm，温度为10-40℃。7.根据权利要求1-6任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤七中所述交联剂溶液含有交联剂A、交联剂B和缓冲剂，其中，交联剂A为N-羟基琥珀酰亚胺、1-羟基苯并三氮唑中的一种或几种；交联剂B为1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、二环己基碳二亚胺、二异丙基碳二亚胺中的一种或几种，缓冲剂为2-(N-吗啉)乙磺酸一水合物、磷酸盐缓冲溶液中的一种或两种；优选地，用缓冲剂将交联剂溶液pH值调整至5.0-7.0；和/或，优选地，交联剂A与交联剂B的摩尔比为1:5-1:2，交联剂B的浓度为2.5-10g/L；和/或，2CN108261565A权利要求书2/2页优选地，交联温度为1-10℃。8.根据权利要求1-7任一项所述的制备方法，其特征在于，所述步骤二、步骤四、步骤六、步骤八振荡处理条件为振荡1-2小时，振荡转速为80-150rpm，更换生理盐水，继续振荡处理，重复该操作4-6次，温度