一种六基因缺失的猪伪狂犬病毒、猪伪狂犬病疫苗以及制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109609468A(43)申请公布日2019.04.12(21)申请号201811508839.0A61K39/245(2006.01)(22)申请日2018.12.10A61K47/26(2006.01)A61K47/18(2006.01)(83)生物保藏信息A61K47/42(2017.01)CGMCCNO.162902018.08.29A61P31/22(2006.01)(71)申请人四川华神兽用生物制品有限公司C12R1/93(2006.01)地址610000四川省成都市双流区西南航空港经济开发区西航港大道牧科路6号(72)发明人周远成林艳代洪波王雪涛廖果邝声耀阴文奇(74)专利代理机构北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙)11371代理人周文波(51)Int.Cl.权利要求书1页说明书7页C12N7/00(2006.01)序列表3页附图2页(54)发明名称一种六基因缺失的猪伪狂犬病毒、猪伪狂犬病疫苗以及制备方法(57)摘要本发明公开了一种六基因缺失的猪伪狂犬病毒、猪伪狂犬病疫苗以及制备方法，涉及动物生物制品领域。本发明提供六基因缺失的猪伪狂犬病毒的保藏编号为CGMCCNo：16290。该六基因缺失的猪伪狂犬病毒缺失六个基因，致病性被去除，其免疫原性被有效保留，使用该猪伪狂犬病毒制备的疫苗，可诱导机体产生更高级剂量的干扰素，在紧急免疫接种方面具有更好的免疫效果。CN109609468ACN109609468A权利要求书1/1页1.一种六基因缺失的猪伪狂犬病毒，其特征在于，该猪伪狂犬病毒缺失如下基因：TK、gE、gI、11K、28K和gG。2.根据权利要求1所述的六基因缺失的猪伪狂犬病毒，其特征在于，其保藏编号为CGMCCNo：16290。3.权利要求1或2所述的六基因缺失的猪伪狂犬病毒在制备伪狂犬病疫苗中的应用。4.一种猪伪狂犬病疫苗，其特征在于，其包括权利要求1或2所述的六基因缺失的猪伪狂犬病毒以及稳定剂。5.一种如权利要求4所述的猪伪狂犬病疫苗的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：步骤(a)：将权利要求1所述的六基因缺失的猪伪狂犬病毒接种适宜细胞，收获病毒液；步骤(b)：将收获的病毒液与稳定剂混合。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述稳定剂包括：低聚糖、氨基酸、明胶和蛋白酶解物。7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述低聚糖为蔗糖和海藻糖的组合；优选的，氨基酸为谷氨酸钠；优选的，蛋白酶解物为水解乳蛋白。8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，按质量百分比计，所述稳定剂含有：5％-10％蔗糖、1％-5％海藻糖、1％-5％谷氨酸钠以及2％-10％水解乳蛋白，0.5％～1％的明胶，余量为水。9.根据权利要求5-8任一项所述的制备方法，其特征在于，在步骤(a)中，所述病毒液与稳定剂按照1：1-1：10的比例混合。10.根据权利要求5-8任一项所述的制备方法，其特征在于，所述适宜细胞为BHK21细胞、ST细胞、293T细胞、PK15细胞、Vero细胞或MDBK细胞，优选为BHK21细胞。2CN109609468A说明书1/7页一种六基因缺失的猪伪狂犬病毒、猪伪狂犬病疫苗以及制备方法技术领域[0001]本发明涉及猪伪狂犬病疫苗领域，具体而言，涉及一种六基因缺失的猪伪狂犬病毒、猪伪狂犬病疫苗以及制备方法。背景技术[0002]猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)又称奥耶斯基氏病(Aujeszky'sdisease,AD)，是由伪狂犬病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)所引起的猪、牛、羊等多种家畜和野生动物以发热、奇痒(猪除外)及脑脊髓炎为主要症状的一种高度接触性传染病。猪是该病的天然宿主、主要储存宿主和传染源，无论是新生仔猪、育肥猪，还是成年种猪，都受到PR的威胁。其表现症状为：2周龄内仔猪感染后死亡率很高，可达100％，可出现腹泻、呕吐、共济失调、角弓反张、四肢泳动等神经症状，最后麻痹、衰竭死亡；断奶仔猪也能引起死亡，但主要表现为呼吸系统症状，也有部分猪出现神经症状、腹泻、呕吐等，耐过的仔猪往往发育不良，成为僵猪；育肥猪感染后则大多数伴有体温升高，呼吸困难，偶有神经症状，一般不发生死亡；成年猪感染后不发病或仅表现为体温升高等轻微症状，呈隐形感染，耐过后主要表现生长发育迟缓，饲料报酬降低等，并可长期带毒或排毒，成为最危险的传染源；妊娠母猪感染后会导致流产、产死胎、木乃伊胎等；该病还可引起种猪不育、公猪睾丸肿胀、母猪返情、屡配不孕等。[0003]伪狂犬病毒只有一个血清型，但不同毒株在毒力和生物学特征等方面存在差异。疫苗接种是有效防制猪伪狂犬病最经济、有效的方法。但现有的猪伪狂犬病疫苗的免疫效果并不