一种白芨多酚的制备方法与应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109864943A(43)申请公布日2019.06.11(21)申请号201910265025.7A61K8/49(2006.01)(22)申请日2019.04.03A61Q11/00(2006.01)(71)申请人黄山峰源生物科技有限公司地址242700安徽省黄山市祁门县经济开发区(72)发明人吴永祥章鏴吴丽萍王卫东耿玉闯卢玮玮戴毅胡长玉方建新吕顺清(74)专利代理机构芜湖众汇知识产权代理事务所(普通合伙)34128代理人曹宏筠(51)Int.Cl.A61K8/9794(2017.01)A61K8/92(2006.01)A61K8/9789(2017.01)权利要求书2页说明书8页附图1页(54)发明名称一种白芨多酚的制备方法与应用(57)摘要本发明公开了一种白芨多酚的制备方法，该方法通过微生物固态发酵促进白芨须根中可溶性多酚类物质的释放，采用超声波-负压空化耦合双水相萃取技术制备白芨多酚组分，利用超滤膜截留技术去除其中的多糖和蛋白等生物大分子，结合大孔吸附树脂富集纯化，得到纯度高、活性强的白芨多酚。通过实验，发现了白芨多酚的抑菌、止血消炎效果，同时开发了一种白芨多酚中草药牙膏。CN109864943ACN109864943A权利要求书1/2页1.一种白芨多酚的制备方法，包括如下步骤：(1)原料预处理：将白芨须根原料洗净晾干并切成均匀细状的白芨须根原料，进行高压湿热灭菌；(2)微生物固体发酵：向所述均匀细状的白芨须根原料中分别接种质量比为0.05％～5％的发酵微生物菌种菌悬液，发酵培养的温度28～45℃、发酵培养的时间为1～8d；将固体发酵后的白芨须根冷冻干燥，粉碎过60～100目筛，制得白芨须根发酵产物粉末；(3)双水相体系组成：配制pH值范围为4.5～7.5的体系缓冲液，将亲水小分子有机溶剂和无机盐，用体系缓冲液溶解、混合，形成萃取白芨多酚的双水相体系；(4)超声波-负压空化耦合双水相体系提取工艺：将所述的白芨须根发酵产物粉末按照固液比1:10～1:55(g/mL)的比例加入到所述萃取白芨多酚的双水相体系中，在负压强度-0.02～-0.08Mpa、超声功率50～450W、提取温度25～45℃、提取时间5～30min条件下萃取，然后静置30min，体系分为两相，目标物被萃取到有机相中，制得白芨多酚提取液；(5)膜过滤：将所述白芨多酚提取液通过3kD～10kD的超滤膜过滤，截留蛋白及多糖，合并滤液，制得白芨多酚滤液；(6)分离纯化：将所述白芨多酚滤液加到非极性或弱极性大孔树脂，按照洗脱溶剂8％～78％乙醇溶液、洗脱速度1.2～3.5BV/h进行动态洗脱，洗脱溶液经浓缩、真空冷冻干燥得白芨多酚。2.如权利要求1所述的白芨多酚的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，发酵微生物菌种为如下至少一种：云芝菌、桑黄菌、杏鲍菇菌、木蹄层孔菌、灵芝、裂褶菌、酿酒酵母、木醋杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、嗜热链球菌、两歧双歧杆菌、乳酸乳球菌，所述发酵微生物菌种菌悬液浓度为1×106～1×108CFU/mL。3.如权利要求1所述的白芨多酚的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中所述无机盐为如下至少一种：硫酸铵、氯化钠、氯化钾、碳酸钾，在体系中的最终浓度范围为0.51％～48.98％；所述亲水小分子有机溶剂为如下至少一种：乙醇、异丙醇、甲醇、氟醇，在体系中的最终浓度范围为10.18％～78.89％。4.如权利要求1所述的白芨多酚的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)重复该步骤进行二次提取，合并两次提取液，制得白芨多酚提取液。5.如权利要求1所述的白芨多酚的制备方法，其特征在于：所述步骤(6)中，所述大孔树脂为如下至少一种：NKA-Ⅱ型，XDA-7型、D101型、ADS-17型。6.一种白芨多酚由权利要求1～5任一所述白芨多酚的制备方法制得。7.一种含白芨多酚的中草药牙膏，由如下重量的原料制成：白芨多酚0.5～15份、白术多酚0.3～12份、松针精油0.05～10份、柳叶蜡梅叶精油0.1～5份、珠兰花精油0.05～8份、三七提取物3～12份、桑白皮提取物3～13份、香薷提取物2～10份、牙膏基质35～78份；所述牙膏基质由28～48份摩擦剂、1.5～7.5份保湿剂、1～6粘结剂、1～6份发泡剂、0.2～0.6份pH调节剂、0.1～0.5份缓冲剂、0.1～0.9份防腐剂和0.5～1份调味剂组成，所述白芨多酚由权利要求6所述的白芨多酚的制备方法制得。8.如权利要求7所述含白芨多酚的中草药牙膏，其特征在于：所述摩擦剂为碳酸钙和水合硅石，所述保湿剂为山梨醇和硅油，所述粘结剂为黄原胶、羧甲基纤维素和卡波姆，所述发泡剂为月桂醇硫酸酯钠，所述pH调节剂为氢氧化钠，所述缓冲剂为焦磷酸钠