克服突释、保持抗体活性的多囊脂质体凝胶及制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109985236A(43)申请公布日2019.07.09(21)申请号201910307285.6A61K47/26(2006.01)(22)申请日2019.04.17A61K47/42(2017.01)A61K47/32(2006.01)(71)申请人烟台大学A61P9/10(2006.01)地址264003山东省烟台市莱山区清泉路30号(72)发明人慕宏杰王毅云孙考祥(74)专利代理机构北京中济纬天专利代理有限公司11429代理人马国冉(51)Int.Cl.A61K39/395(2006.01)A61K9/127(2006.01)A61K9/06(2006.01)A61K47/34(2017.01)A61K47/18(2006.01)权利要求书2页说明书7页附图3页(54)发明名称克服突释、保持抗体活性的多囊脂质体凝胶及制备方法(57)摘要本发明公开了克服突释、保持抗体活性的多囊脂质体凝胶，属于生物大分子药物的眼用缓控释制剂领域。单抗克隆抗体药物被包裹在具有良好生物相容性及生物可降解性的多囊脂质体中，进而多囊脂质体分散于温敏性高分子材料形成的溶胶中，当溶胶经玻璃体腔注射后会在体温下凝固成半固体凝胶形成多囊脂质体-温敏水凝胶复合制剂，从而控制抗体药物的释放。本发明根据多囊脂质体和水凝胶制剂的优势，保持抗体药物体外释放可达60天左右，减小抗体药物一般剂型的突释问题，同时极大保持了抗体药物的活性，更大程度上延长了抗体药物在玻璃体注射后眼内的滞留时间，减少注射频次的同时提高了患者的顺应性。CN109985236ACN109985236A权利要求书1/2页1.一种克服突释、保持抗体活性的多囊脂质体凝胶，其特征在于，所述凝胶包括下列重量份的各组分：抗VEGF单抗1份；蛋白稳定剂1～20份；中性磷脂1～10份；二棕榈酰磷脂酰甘油0.2～20份；三油酸甘油酯0.2～20份；胆固醇0.8～80份；渗透压调节剂A1～20份；渗透压调节剂B1～20份；赖氨酸20～30份；温敏性凝胶材料5～100份；所述渗透压调节剂A是蔗糖、海藻糖中一种或多种；所述渗透压调节剂B是葡萄糖、蔗糖、海藻糖中的一种或多种。2.一种如权利要求1所述的克服突释、保持抗体活性的多囊脂质体凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)配制含渗透压调节剂A和蛋白稳定剂的抗VEGF单抗溶液作为内水相；(2)将中性磷脂、二棕榈酰磷脂酰甘油、三油酸甘油酯和胆固醇溶于有机溶剂中，得到脂质相；(3)配制含渗透压调节剂B和赖氨酸的水溶液作为外水相；(4)将所述内水相在8000～12000rpm高速剪切条件下滴加到所述脂质相中，形成w/o初乳；(5)将所述初乳在2000～8000rpm高速剪切条件下滴加到所述外水相溶液中，形成w/o/w复乳，氮吹或37℃～40℃旋转蒸发，除去有机溶剂，所得溶液3000rpm离心，弃去上清液，加入生理盐水重新分散，得到多囊脂质体混悬液；(6)取一定体积多囊脂质体混悬液在3000rpm离心10min，弃去上清液，沉淀用生理盐水洗涤3次，离心，取下部沉淀与温敏性凝胶材料涡旋混匀，缓慢升温可得所述多囊脂质体凝胶缓释制剂；所述渗透压调节剂A质量浓度为3％～10％；所述渗透压调节剂B质量浓度为2％～8％。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(6)中所述温敏性凝胶材料为聚乳酸羟基己酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基己酸或聚乳酸羟基乙酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸三嵌段共聚物，溶胶质量百分浓度为10％～40％，优选20％～30％；溶胶的相变温度为32℃～37℃。4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述温敏性凝胶材料的制备方法：取一定量聚乳酸羟基己酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基己酸或聚乳酸羟基乙酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸三嵌段共聚物溶于pH值6.0～9.8的缓冲液中或含有碱性物质的去离子水中，其中碱性物质与三嵌段共聚物质量比为1：1～1：10，三嵌段共聚物在溶液中的浓度为10％～40％；在0℃～4℃条件下，溶胀3h～48h，形成溶胶。2CN109985236A权利要求书2/2页5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述抗VEGF单抗为贝伐单抗、雷株单抗、阿柏西普中的一种，浓度为5～100mg/mL。6.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述有机溶剂为氯仿或氯仿与乙醚的混合溶液；优选氯仿与乙醚的混合溶液中，二者体积比为1：1。7.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述赖氨酸质量浓度为10～80mmol/L。8.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述内水相与所述脂质相的体积比为1：1～1：10。9.如权利要求2所述的制备方法