一种檀香紫檀HPLC标准指纹图谱及其构建方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110031575A(43)申请公布日2019.07.19(21)申请号201910244373.6(22)申请日2019.03.28(71)申请人汕头出入境检验检疫局检验检疫技术中心地址515031广东省汕头市大华路11号主楼(72)发明人魏建华吴剑光魏霜刘玉莉刘碧琳(74)专利代理机构上海旭诚知识产权代理有限公司31220代理人郑立(51)Int.Cl.G01N30/06(2006.01)G01N30/74(2006.01)G01N30/86(2006.01)权利要求书2页说明书7页附图2页(54)发明名称一种檀香紫檀HPLC标准指纹图谱及其构建方法和应用(57)摘要本发明公开了一种檀香紫檀HPLC标准指纹图谱，其具有6个特征峰，其中保留时间最长的所述特征峰的峰面积最大；以该峰面积最大的所述特征峰为参照峰，6个所述特征峰的相对保留时间tg分别为：0.085，0.099，0.133，0.160，0.271，1.000，RSD％<2％。本发明还公开了该图谱的构建方法。本发明建立的檀香紫檀HPLC标准指纹图谱，通过相似度分析以及对比特征峰的有无，可有效的进行檀香紫檀真伪鉴别。CN110031575ACN110031575A权利要求书1/2页1.一种檀香紫檀HPLC标准指纹图谱，其特征在于，具有6个特征峰，其中保留时间最长的所述特征峰的峰面积最大；以该峰面积最大的所述特征峰为参照峰，6个所述特征峰的相对保留时间tg分别为：0.085，0.099，0.133，0.160，0.271，1.000，RSD％<2％。2.如权利要求1所述的檀香紫檀HPLC标准指纹图谱，其特征在于，6个所述特征峰的相对峰面积分别为：0.0207，0.0790，0.0535，0.0144，0.0290，1.000，RSD<1.0。3.一种如权利要求1所述的檀香紫檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、供试品溶液的制备：称取檀香紫檀心材部分木屑，加入甲醇、高纯水，震摇，超声提取，滤纸过滤，微孔滤膜过滤，得到所述供试品溶液；步骤二、HPLC检测：将所述步骤一得到的供试品溶液进行HPLC检测，色谱条件为：AgilentEclipseXDB-C18，填料粒径5μm，柱长250mm，柱内径4.6mm；以水为流动相A，乙腈为流动相B，采用梯度洗脱方式：从0～20min，流动相B的体积百分含量由8％提高至23％，流动相A的体积百分含量由92％降低至77％；从20～33min,流动相B的体积百分含量为23％，流动相A的体积百分含量为77％；从33～43min，流动相B的体积百分含量由23％提高至30％，流动相A的体积百分含量由77％降低至70％；从43～53min,流动相B的体积百分含量30％，流动相A的体积百分含量为70％；从53～69min，流动相B的体积百分含量由30％提高至38％，流动相A的体积百分含量由70％降低至62％；从69～76min，流动相B的体积百分含量38％，流动相A的体积百分含量为62％；从76～91min，流动相B的体积百分含量由38％提高至49％，流动相A的体积百分含量由62％降低至51％；从91～92min，流动相B的体积百分含量49％，流动相A的体积百分含量为51％；从92～95min，流动相B的体积百分含量由49％降低至8％，流动相A的体积百分含量由51％提高至92％；从95～103min，流动相B的体积百分含量8％，流动相A的体积百分含量为92％；检测波长为290nm；柱温30℃；流速1.0mL/min；得到HPLC检测结果。4.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述步骤一具体为：称取檀香紫檀心材部分木屑0.2g，置于50mL离心管中，加入5mL甲醇、5mL高纯水，震摇5min，超声提取5min，滤纸过滤，再以0.2μm的微孔滤膜过滤，得到所述供试品溶液。5.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，还包括步骤三、分析比较多批来源不同的檀香紫檀的HPLC检测结果，得到由其共有特征峰构成的所述檀香紫檀HPLC标准指纹图谱。6.如权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述步骤三具体为：将所述多批来源不同的檀香紫檀的HPLC检测结果导入国家药典委员会颁布的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”，选取时间窗宽度为0.2min，以中位数生成对照谱图，经过多点校正后自动匹配，生成檀香紫檀指纹图谱共有模式，并计算所述多批来源不同的檀香紫檀的HPLC检测结果与该檀香紫檀指纹图谱共有模式的相似度，使得所述相似度在0.9以上。7.如权利要求1所述的檀香紫檀HPLC标准指纹图谱在鉴别檀香紫檀真伪方面的应用。8.如权利要求7所述的应用，其特征在于