一种绞股蓝提取物的制备方法及绞股蓝提取物中绞股蓝总皂苷的含量测定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110025650A(43)申请公布日2019.07.19(21)申请号201910467013.2(22)申请日2019.05.31(71)申请人嘉应学院医学院地址514031广东省梅州市梅江区黄塘路146号(72)发明人梁香钟娜娜吴凌凤程亚涛张声源丘波聂华(74)专利代理机构佛山帮专知识产权代理事务所(普通合伙)44387代理人颜德昊(51)Int.Cl.A61K36/424(2006.01)G01N21/31(2006.01)权利要求书2页说明书6页(54)发明名称一种绞股蓝提取物的制备方法及绞股蓝提取物中绞股蓝总皂苷的含量测定方法(57)摘要本发明属于本发明涉及中药提取技术领域，具体公开了一种绞股蓝提取物的制备方法及绞股蓝提取物中绞股蓝总皂苷的含量测定方法。所述绞股蓝提取物的制备方法，其包含如下步骤：取绞股蓝干燥全草，粉碎后加入乙醇进行加热回流提取，然后将提取液浓缩干燥后即得所述的绞股蓝提取物；所述的绞股蓝干燥全草与乙醇的用量比为1g：7～9mL；所述的乙醇为体积分数为体积分数为65％～75％的乙醇水溶液；所述的加热回流次数为3～4次；每次加热回流时间为40～50min。该方法中以无毒的乙醇为提取溶剂，有效避免了使用其它有毒溶剂提取造成的溶剂残留，同时该方法能够提取得到较高的绞股蓝总皂苷。CN110025650ACN110025650A权利要求书1/2页1.一种绞股蓝提取物的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：取绞股蓝干燥全草，粉碎后加入乙醇进行加热回流提取，然后将提取液浓缩干燥后即得所述的绞股蓝提取物；所述的绞股蓝干燥全草与乙醇的用量比为1g：7～9mL；所述的乙醇为体积分数为体积分数为65％～75％的乙醇水溶液；所述的加热回流次数为3～4次；每次加热回流时间为40～50min。2.根据权利要求1所述的绞股蓝提取物的制备方法，其特征在于，所述的绞股蓝干燥全草与乙醇的用量比为1g：8mL。3.根据权利要求1所述的绞股蓝提取物的制备方法，其特征在于，所述的乙醇为体积分数为体积分数为70％的乙醇水溶液。4.根据权利要求1所述的绞股蓝提取物的制备方法，其特征在于，所述的加热回流次数为3次。5.根据权利要求1所述的绞股蓝提取物的制备方法，其特征在于，每次加热回流时间为45min。6.一种绞股蓝提取物中绞股蓝总皂苷的含量测定方法，其特征在于，包含如下步骤：对照品制备步骤：精密称取人参皂苷Rb1，加乙醇制成1.5～2.5mg/mL的人参皂苷Rb1乙醇溶液；供试品制备步骤：取权利要求1～5任一项制备方法制备得到的绞股蓝提取物0.05～0.15g，然后用乙醇溶解定容至500ml容量瓶，再取0.5～1.5ml溶液至10ml容量瓶，挥干溶剂备用；对照品测定以及标准曲线绘制步骤：分别精密吸取不同量的对照品溶液于10ml容量瓶，挥干溶剂，然后加入0.3～0.6mL的香草醛乙醇溶液以及3～6mL的硫酸溶液，于55～65℃水浴加热显色10～20min，于530～540nm波长处测定吸光度，以吸光度值A为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线；样品测定以及含量计算步骤：精密量取供试品，然后加入0.3～0.6mL的香草醛乙醇溶液以及3～6mL的硫酸溶液，于55～65℃水浴加热显色10～20min，于530～540nm波长处测定吸光度；最后根据标准曲线中吸光度对应的浓度计算出绞股蓝总皂苷的含量。7.根据权利要求6所述的含量测定方法，其特征在于，所述的对照品制备步骤具体为：精密称取人参皂苷Rb1，加乙醇制成2mg/mL的人参皂苷Rb1乙醇溶液。8.根据权利要求6所述的含量测定方法，其特征在于，所述的供试品制备步骤具体为：取权利要求1～5任一项制备方法制备得到的绞股蓝提取物0.1g，然后用乙醇溶解定容至500ml容量瓶，再取1ml溶液至10ml容量瓶，挥干溶剂备用。9.根据权利要求6所述的含量测定方法，其特征在于，对照品测定以及标准曲线绘制步骤具体为：分别精密吸取不同量的对照品溶液于10ml容量瓶，挥干溶剂，然后加入0.5mL的香草醛乙醇溶液以及5mL的硫酸溶液，于50℃水浴加热显色15min，于538nm波长处测定吸光度，以吸光度值A为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线；所述的香草醛乙醇溶液为质量分数为8％香草醛乙醇溶液；所述的硫酸溶液为质量分数为77％硫酸溶液；所述的不同量的对照品溶液是指从20μl～200μl等量变化的对照品溶液；所述的标准曲线的回归方程为y＝2.9571x+0.0394,相关系数为0.9952。2CN110025650A权利要求书2/2页10.根据权利要求6所述的含量测定方法，其特征在于，样品测定以及含量计算步骤具体为：精密量取供试品，然后加入0.5mL的香草醛乙