一种黄芪多糖的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110551230A(43)申请公布日2019.12.10(21)申请号201910895452.3(22)申请日2019.09.21(71)申请人天津赛诺制药有限公司地址301700天津市武清区新技术产业园区来源道(72)发明人王英实郑岩伍瑞(74)专利代理机构北京华科联合专利事务所(普通合伙)11130代理人孟旭涂荣昌(51)Int.Cl.C08B37/00(2006.01)权利要求书1页说明书25页(54)发明名称一种黄芪多糖的制备方法(57)摘要本发明涉及一种黄芪多糖的制备方法，所述方法，步骤如下：1)取黄芪加水煎煮，煎液滤过浓缩，浓缩液加乙醇后，室温放置；2)过滤除去上清液，沉淀加乙醇，过滤除去上清液，沉淀加水，溶解；3)溶液加乙醇使含醇量为30-40％，取上清液加乙醇使含醇量为60-80％，放置，过滤除去上清液，沉淀加水定容、过滤，滤液加水超滤至定容体积的25％～30％；4)滤液分别通过阳离子交换层析柱和阴离子交换层析柱，以醋酸-醋酸钠缓冲液洗脱，洗脱液经过滤膜滤过，再经过超滤系统分级超滤，得到两级超滤液，分别超滤至透过液电导率≤150μs/cm，继续超滤至保留体积为洗脱液体积的10％～15％；5)两部分滤液分别经-30至-70℃冷冻1-10天后室温复融，离心，上清液浓缩至药液糖度为20％～26％，浓缩液加乙醇使含醇量为85-95％，滤去上清液，沉淀用乙醇溶解、滤去上清液，干燥、粉碎、混合，即得。CN110551230ACN110551230A权利要求书1/1页1.一种黄芪多糖的制备方法，所述方法，步骤如下：1)取黄芪饮片加水煎煮，煎液滤过浓缩，浓缩液放置至室温，加乙醇使含醇量为60-80％，室温放置；2)过滤除去上清液，沉淀加乙醇至乙醇含量＞94％，过滤除去上清液，沉淀加水，溶解；3)溶液加乙醇使含醇量为30-40％，取上清液加乙醇使含醇量为60-80％，放置，过滤除去上清液，沉淀加水溶解、过滤，滤液加水超滤至透过液电导率≤350μs/cm，继续超滤至保留体积为原体积的25％～30％；4)滤液分别通过阳离子交换层析柱和阴离子交换层析柱，以醋酸-醋酸钠缓冲液洗脱，洗脱液经过滤膜滤过，再经过超滤系统分级超滤，超滤至透过液电导率≤150μs/cm，继续超滤至至保留体积为洗脱液体积的10％～15％；5)滤液经-30至-70℃冷冻1-10天后室温复融，离心，上清液浓缩至药液糖度为20％～26％，浓缩液加乙醇使含醇量为85-95％，滤去上清液，沉淀用乙醇溶解、滤去上清液，干燥、粉碎、按照比例将不同极性及分子量的中间品进行混合，可得黄芪多糖粉末。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)取黄芪饮片420kg，加水煎煮三次，第一次10倍量、第二次8倍量、第三次6倍量，煎液合并后滤过，滤液浓缩至25℃相对密度为1.14～1.18％，浓缩液放置至室温，加乙醇使含醇量为70％，边加边搅拌，室温放置；2)除去上清液，沉淀加乙醇至上清液乙醇含量＞94％，除去上清液，按沉淀溶解后18％的浓度计算加水量，加水溶解沉淀；3)溶液加乙醇使含醇量约为35％，搅拌均匀，离心，除去沉淀；上清液再加乙醇使含醇量约为70％，放置，除去上清液，沉淀加水溶解、过滤，滤液加水定容到糖度20～26％，超滤至透过液电导率≤350μs/cm，继续超滤至保留液体积为超滤前溶液加水定容体积的25％～30％。4)保留液分别通过阳离子和阴离子交换层析柱，以20mmol/L醋酸-醋酸钠缓冲液洗脱，洗脱液经过三级串联微孔滤膜滤过，滤液经分级超滤系统分两级超滤，分别收集不同极性及分子量的超滤保留液I和超滤保留液II，滤液加水超滤至透过液电导率≤150μs/cm，继续超滤至至保留液体积为洗脱液体积的10％～15％。5)分级超滤所得的保留液I和II分别经-30至-70℃冷冻1-10天后室温复融，使用高速离心机离心，上清液在温度35-45℃、真空度小于1000mbar条件下用真空簿膜浓缩机浓缩浓缩至药液糖度为20％～26％，浓缩液加乙醇使含醇量为90％，离心，除去上清液，沉淀用乙醇搅拌至完全溶解、离心、除去上清液，反复2-3次，沉淀低温干燥、粉碎，得到两种不同极性及分子量的黄芪多糖粉末中间品I和黄芪多糖粉末II，将两者混合后，得到分子量分布范围在48000～140000、分布系数不大于23.0的黄芪多糖。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，其中，步骤4)保留液分别通过Pharmacia公司生产的SerharoseSPBigBeads和SepharoseQBigBeads规格为GE-G300×500×500的阳离子、阴离子交换层析柱，滤液经Millipore公司生产的型号为PZB0