一种靶向Frizzled7人源化抗体及其制备方法与应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111138539A(43)申请公布日2020.05.12(21)申请号201911078254.4C12N15/13(2006.01)(22)申请日2019.11.06C12N15/867(2006.01)C12N5/10(2006.01)(83)生物保藏信息G01N33/68(2006.01)CCTCCNO:C20192792019.10.30A61K39/395(2006.01)(71)申请人上海健康医学院A61K47/68(2017.01)地址201318上海市浦东新区周祝公路279A61P35/00(2006.01)号(72)发明人解伟黄钢王进张坤驰周兆丽王风仙张艳赵慧杰黄燕娟孙吉(74)专利代理机构上海科盛知识产权代理有限公司31225代理人褚明伟(51)Int.Cl.权利要求书2页说明书16页C07K16/28(2006.01)序列表13页附图14页(54)发明名称一种靶向Frizzled7人源化抗体及其制备方法与应用(57)摘要本发明涉及一种靶向Frizzled7人源化抗体及其制备方法与应用。所述靶向Frizzled7人源化抗体具有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区氨基酸序列如SEQIDNo.11所示，所述轻链可变区氨基酸序列如SEQIDNo.12所示。本发明的靶向Frizzled7人源化抗体SHH002-hu1保留了鼠源单抗SHH002与重组人Fzd7蛋白的高亲和力(KD值均小于1×10-12M)，与Fzd7特异性结合，且与Fzd家族其他受体没有交叉反应，降低了抗体在可能的临床应用中的脱靶风险。SHH002-hu1可以与肿瘤细胞表面Fzd7结合，阻断Wnt信号通路；并可以与病人肿瘤组织中的Fzd7有效结合，具有潜在的肿瘤靶向性，是未来抗肿瘤治疗新的候选药物。CN111138539ACN111138539A权利要求书1/2页1.一种靶向Frizzled7人源化抗体，其特征在于，所述靶向Frizzled7人源化抗体具有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区氨基酸序列如SEQIDNo.11所示，所述轻链可变区氨基酸序列如SEQIDNo.12所示。2.根据权利要求1所示一种靶向Frizzled7人源化抗体，其特征在于，所述靶向Frizzled7人源化抗体的重链氨基酸序列如SEQIDNo.23所示，其中恒定区为从SEQIDNo.23所示碱基序列的第116位至第445位。3.根据权利要求1所示一种靶向Frizzled7人源化抗体，其特征在于，所述靶向Frizzled7人源化抗体的轻链氨基酸序列如SEQIDNo.24所示，其中恒定区为从SEQIDNo.24所示碱基序列的第112位至第218位。4.一种靶向Frizzled7人源化抗体，其特征在于，所述靶向Frizzled7人源化抗体具有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区氨基酸序列如SEQIDNo.13所示，所述轻链可变区氨基酸序列如SEQIDNo.14所示。5.一种靶向Frizzled7人源化抗体，其特征在于，所述靶向Frizzled7人源化抗体具有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区氨基酸序列如SEQIDNo.15所示，所述轻链可变区氨基酸序列如SEQIDNo.16所示。6.一种靶向Frizzled7人源化抗体，其特征在于，所述靶向Frizzled7人源化抗体具有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区氨基酸序列如SEQIDNo.17所示，所述轻链可变区氨基酸序列如SEQIDNo.18所示。7.一种靶向Frizzled7人源化抗体，其特征在于，所述靶向Frizzled7人源化抗体具有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区氨基酸序列如SEQIDNo.19所示，所述轻链可变区氨基酸序列如SEQIDNo.20所示。8.一种重组蛋白，其特征在于，所述的重组蛋白具有：(i)如权利要求1-7任一项所述抗体；以及(ii)任选的协助表达和/或纯化的标签序列。9.一种核苷酸，其特征在于，所述核苷酸编码选自下组的多肽：(1)如权利要求1-7任一项所述的抗体；或(2)如权利要求8所述的重组蛋白。10.一种表达载体，其特征在于，含有如权利要求9所述核酸。11.一种重组宿主细胞，其特征在于，含有如权利要求10所述重组表达载体。12.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括：权利要求1-7中任一项所述的抗体。13.一种免疫偶联物，其特征在于，该免疫偶联物含有：(a)权利要求1-7中任一项所述的抗体或抗体片段，或权利要求8所述的重组蛋白；和(b)选自下组的偶联部分：可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、放射性核素、或酶。14.一种药物组合物，其特征在于，所述组合物包含权利要求1-7中任一项所述的抗体或抗体片段、权利要求