木瓜中齐墩果酸提取.docx

木瓜中齐墩果酸提取摘要:从木瓜中提取､分离､鉴定齐墩果酸｡方法:采取回流法､索氏提取法和冷浸法从木瓜中提取齐墩果酸然后采用酸碱沉降法､氯仿萃取法分离纯化并用高效液相色谱法进行鉴定｡结果:结果显示回流法提取效果最好｡结论:为齐墩果酸的工业化生产提供了一定的理论依据｡关键词:木瓜;齐墩果酸;提取;分离;高效液相色谱法0前言木瓜又称皱皮木瓜铁脚犁酸木瓜等为蔷薇科木瓜属植物贴梗海棠的果实｡木瓜是具有食用药用观赏的多用途植物果实成熟后色泽金黄气味芳香果实营养极为丰富｡齐墩果酸(Oleanolicacid)分子式为C30H48O3是木瓜的主要有效成分别名土当归酸大部分以游离酸或糖苷的形式存在为五环三萜类化合物是我国首次从植物中发掘出来的是治疗急性黄疸型肝炎和慢性病毒性肝炎比较理想的药物｡本实验以干木瓜为原料在单因素实验的基础上设计正交实验优化提取齐墩果酸的最佳工艺条件｡通过酸碱沉降或氯仿萃取的方法分离纯化最后经高效液相色谱法对其进行鉴定｡该种方法准确可靠为初步研究建始木瓜中齐墩果酸提供试验基础为齐墩果酸的工业化生产提供了一定的理论依据｡1材料与方法1.1材料1.1.1试验原料干木瓜片粉碎机粉碎1.1.2试验的主要仪器和设备HHS型电热恒温水浴锅RE52-99型旋转蒸发器722可见分光光度计紫外分光光度计电子天平分析天平液相设备分析柱:HypersilODS25μm｡1.1.3试验主要试剂95%工业酒精分析醇的95%乙醇､甲醇､冰醋酸､高氯酸､浓硫酸､乙酸乙酯､香草醛齐墩果酸标准品｡1.2方法1.2.1齐墩果酸提取方法的比较(1)回流提取法:称取木瓜粉25g分别用100ml80ml70ml的95%工业酒精在60℃下回流提取时间依次为432小时合并提取液用乙醇定容至250ml作为供试样｡(2)索氏提取法:称取木瓜粉25g用95%工业酒精在索氏提取器中提取在90℃下至虹吸下溶液近无色(约8小时)将提取液转移至250ml容量瓶定容至刻度作为供试样｡(3)冷浸提取法:称取木瓜粉25g用95%工业酒精150ml浸提一周再用100ml乙醇浸提5天合并浸提液将提取液转移至250ml容量瓶定容至刻度作为供试样｡1.2.2比色法测定齐墩果酸的含量精密称取香草醛0.3g用移液管加入6ml冰醋酸配置成5%香草醛-冰醋酸溶液｡分别取回流法索氏提取法和冷浸法提取的样品0.01ml(每种做3个平行)加入试管中加热挥发溶剂试剂空白为对照｡精密加入新制的香草醛-冰醋酸0.2ml和高氯酸0.8ml在70℃恒温水浴加热15分钟｡流水冷却至室温精密加入乙酸乙酯4ml摇匀在波长560nm处测定吸光值比较三种方法提取率｡1.2.3回流提取的单因素实验(1)温度对提取率的影响:分别称取10g木瓜粉以95%工业酒精料液比为1:15按4050607080℃五个温度梯度提取9h提取3次合并提取液定容至250ml｡分别取0.01ml提取液加入试管中通过比色法测定齐墩果酸的含量(每个样品3个平行)｡(2)时间对提取率的影响:分别称取10g木瓜粉以95%工业酒精料液比为1:15按3h5h7h9h11h五个时间梯度置于60℃水浴锅提取3次时间间隔分别为1.510.5h;2.51.51h;32.51.5h;432h;4.53.53h｡合并提取液定容至250ml｡分别取0.01ml提取液加入试管中通过比色法测定齐墩果酸的含量(每个样品3个平行)｡(3)料液比对提取率的影响:按料液比为1:51:101:151:201:25以95%工业酒精置于60℃水浴锅中9h提取3次每次的溶剂用量为251510ml;503020ml;705030ml;907040ml;1008070ml｡合并提取液定容至250ml｡分别取0.01ml提取液加入试管中通过比色法测定齐墩果酸的含量(每个样品3个平行)｡1.2.4正交试验