一种快速筛查鸡蛋中兽药残留的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111257472A(43)申请公布日2020.06.09(21)申请号202010199035.8(22)申请日2020.03.20(71)申请人吉林大学地址130012吉林省长春市前进大街2699号(72)发明人袁媛覃璐璐(74)专利代理机构长春市恒誉专利代理事务所(普通合伙)22212代理人李荣武(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)权利要求书1页说明书2页附图2页(54)发明名称一种快速筛查鸡蛋中兽药残留的方法(57)摘要本发明公开了一种快速筛查鸡蛋中兽药残留的方法，样品加入均质子和水后，加入酸化乙腈提取，经QuEChERS盐包萃取后，采用固相萃取柱净化提取液，氮吹至全干后加入甲醇水溶液复溶，离心取上清液，再由液相色谱串接高分辨质谱(LC-HRMS)测定。本发明的检测方法步骤简单，实验时间短，检测结果稳定，可靠。且高分辨质谱有很强的定性能力，大大降低了检测结果的假阳性，为一线样品筛查提供了良好的检测方法，提高工作效率。CN111257472ACN111257472A权利要求书1/1页1.一种快速筛查鸡蛋中兽药残留的方法，其特征在于：本检测方法的提取试剂为0.3％甲酸乙腈和6mL水，经QuEChERS盐包萃取后，用固相萃取柱净化过滤，50℃氮吹全干后加入甲醇水溶液复溶，再次离心取上清液，用液相色谱串接高分辨质谱检测。2.根据权利要求1所述的一种快速筛查鸡蛋中兽药残留的方法，其特征在于：12种待测兽药经BEHC18色谱柱分离后，在正模式和负模式下检测，检测时间一针仅需16min。3.根据权利要求1或2所述的一种快速筛查鸡蛋中兽药残留的方法，其特征在于：通过加标法来说明检测能力，目标筛查物浓度(STC)如表所示，在添加1倍和2倍目标物筛查浓度下，平均回收率在60％-108.58％之间，RSD＜22％，样品的检测结果稳定且符合理论值，说明本方法可行、可靠。2CN111257472A说明书1/2页一种快速筛查鸡蛋中兽药残留的方法技术领域[0001]本发明属于食品安全检测领域，用仪器检测食品中的有害物质。背景技术[0002]食品中的兽药残留威胁到人类的健康安全问题，是百姓关心的问题，也是企业关注的食品安全问题。兽药的不合理使用和滥用都会导致动物性食品原料中兽药残留超标，因此需要一种快速的检测方法，在原料收购阶段就及时拦截不合格产品，减少人们食用到兽药残留超标产品的机会，保护大家的健康安全。根据国标对食品中兽药残留的最大残留限量(MRL)要求，许多企业、科研机构等单位发明了多种检测方法，酶联免疫法、胶体金检测法、液相色谱法、液相质谱法等。发明内容[0003]本发明提供了一种快速检测、操作简单，可用于一线原料收购检测的方法，且根据国标要求设置了相应地目标筛查物浓度浓度，易于推广。[0004]为实现快速检测的目的，本发明中液相质谱检测时间为16min，可快速得到结果，实现了快速检测的目的；操作方面也非常简便，将萃取液加入固相萃取柱中，收集滤液即可，这一步的操作免去了过滤膜的步骤，缩短了操作时间，也减少了实验耗材的使用；目标筛查物浓度浓度是根据国标要求的最大残留限量设定的，该浓度即可满足国标要求，又在本发明使用的液相条件和质谱条件下有好的相应。直接使用本发明可以筛查出鸡蛋中的兽药残留，在两个添加水平下(n＝6)，平均回收率在60％-108.58％之间，RSD＜22％。附图说明[0005]图1为本发明兽药在鸡蛋中的平均回收率；[0006]图2为具体实施方式部分兽药色谱图；具体实施方式[0007]1.样品前处理[0008]取2.0g鸡蛋于50ml离心管中，加入30ml乙腈，0.1ml甲酸，6mL水，均质1min后加入QuEChERS盐包萃取，3500rpm下离心8min，取上清液8ml至固相萃取柱中，过滤，取5ml滤液，50℃下氮吹至全干，加入0.5mL甲醇水溶液复溶后上机检测。[0009]2.色谱条件[0010]选择甲酸水和甲酸甲醇溶液作流动相A、B。色谱柱选择WatersACQUITYUPLCBEHC18色谱柱。进样体积:10μL，流速:0.4mL/min。[0011]梯度洗脱程序:[0012]0-0.5min:A:90％；[0013]0.5-2.5min:A:90％-60％；3CN111257472A说明书2/2页[0014]2.5-9min:A:60％-5％；[0015]9-11min:A:5％-0％；[0016]11-12min：A：0％[0017]12-12.5min:A:0％-95％；[0018]12.5～16min:A:95％。[0019]3.质谱条件[0020]HESI源:鞘气流速50psi,