一种用于检测头孢氨苄残留的比率荧光探针的制备方法及其制备的荧光探针和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111647407A(43)申请公布日2020.09.11(21)申请号202010720104.5G01N21/64(2006.01)(22)申请日2020.07.23(66)本国优先权数据202010289256.42020.04.14CN(71)申请人南京师范大学地址210046江苏省南京市栖霞区文苑路1号(72)发明人杨雅琼郝爱月梅艳珍戴传超(74)专利代理机构南京苏高专利商标事务所(普通合伙)32204代理人孙斌(51)Int.Cl.C09K11/88(2006.01)C09K11/65(2006.01)C09K11/02(2006.01)权利要求书2页说明书5页附图3页(54)发明名称一种用于检测头孢氨苄残留的比率荧光探针的制备方法及其制备的荧光探针和应用(57)摘要本发明公开了一种用于检测头孢氨苄残留的比率荧光探针的制备方法及其制备的荧光探针和应用，该制备方法包括：碳量子点制备，碲化镉量子点制备，硅包覆碳点制备，荧光探针的合成。本发明制备工艺简单、原料易得、成本低，易于规模化生产。本发明制备的用于检测头孢氨苄残留的比率荧光探针灵敏度高，同时具有高选择性和特异性，仅对头孢氨苄有荧光响应，对其他抗生素均无反应。采用本发明制备的用于检测头孢氨苄残留的比率荧光探针可有效定量检测头孢氨苄残留，并且更加高效、节约成本、更加精确，对控制食品安全、保护人体健康具有重要的意义。CN111647407ACN111647407A权利要求书1/2页1.一种用于检测头孢氨苄残留的比率荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)碳量子点制备：将乳糖和Tris溶解在水中，并水热回流反应得到碳量子点；(2)碲化镉量子点制备：将碲粉、硼氢化钠、水通气反应得到碲氢化钠前驱体；将氯化镉、巯基丙酸、水混合再加入碲氢化钠前驱体继续反应，得到碲化镉量子点；(3)硅包覆碳点制备：将步骤(1)制得碳量子点、原硅酸四乙酯、3-氨基丙基三乙氧基硅烷、氨水在乙醇溶液中反应生成表面氨基官能化的硅包覆碳点；(4)荧光探针的合成：将碲化镉量子点、硅包覆碳点、头孢氨苄抗体、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基丁二酰亚胺混合反应制成荧光探针。2.根据权利要求1所述的用于检测头孢氨苄残留的比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述水热回流反应优选为在100℃条件下水热回流20-24h制得。3.根据权利要求1所述的用于检测头孢氨苄残留的比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述Tris和乳糖的质量比为15：1-16：1。4.根据权利要求1所述的用于检测头孢氨苄残留的比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述碲粉、硼氢化钠的摩尔比例为1:15-1:20；所述通气反应得到碲氢化钠前驱体为室温通氩气磁力搅拌反应20-30min，当溶液由黑色变为白色时，得到碲氢化钠前驱体溶液。5.根据权利要求1所述的用于检测头孢氨苄残留的比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述将氯化镉、巯基丙酸、水混合再加入碲氢化钠前驱体为将碲氢化钠前驱体溶液加入到氩气饱和的氯化镉和巯基丙酸混合水溶液中，室温搅拌反应，之后在回流反应。6.根据权利要求1所述的用于检测头孢氨苄残留的比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述氯化镉、碲粉和巯基丙酸的摩尔比1：0.5：2.4。7.根据权利要求1所述的用于检测头孢氨苄残留的比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述碳量子点、原硅酸四乙酯(TEOS)、3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)、氨水在乙醇溶液中室温反应，其中TEOS与APTES的体积比为3:1-2:1，碳量子点溶液与TEOS反应体积比为70:1-60:1，TEOS与氨水体积比为1:1.5-1:1.8。8.根据权利要求1所述的用于检测头孢氨苄残留的比率荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述将碲化镉量子点、硅包覆碳点、头孢氨苄抗体、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基丁二酰亚胺混合室温反应，先将碲化镉量子点与硅包覆碳点混合，加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺混合液形成溶液A，搅拌后再加入头孢氨苄抗体溶液以及1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺混合液；其中碲化镉量子点溶液与硅包覆碳量子点溶液体积比为3:1-4:1；1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐与N-羟基丁二酰亚胺质量比为1:1，头孢氨苄抗体溶液与溶液A、第二次加入的及1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺混合液的体积比为3-4：30：5，所述头孢氨苄抗体溶液的