一种检测甲氰菊酯的试纸条及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111735951A(43)申请公布日2020.10.02(21)申请号202010493885.9(22)申请日2020.06.03(71)申请人北京勤邦生物技术有限公司地址102206北京市昌平区回龙观国际信息产业基地高新四街8号申请人广州勤邦生物技术有限公司(72)发明人何方洋吴小胜朱亮亮刘玉梅王琳琛马玉华赵正苗冯才伟(51)Int.Cl.G01N33/577(2006.01)G01N33/558(2006.01)G01N33/543(2006.01)G01N33/532(2006.01)G01N33/53(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图1页(54)发明名称一种检测甲氰菊酯的试纸条及其应用(57)摘要本发明公开了一种检测甲氰菊酯的试纸条及其应用。试纸条包括样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)和底板(7)，所述反应膜上具有包被有甲氰菊酯半抗原‑载体蛋白偶联物的检测线(5)和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线(6)，所述结合物释放垫(2)喷涂有甲氰菊酯单克隆抗体‑胶体金标记物。本发明还提供了一种应用上述甲氰菊酯试纸条检测黄瓜、苹果等蔬菜及水果中甲氰菊酯残留的方法。本发明所提供的试纸条具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低等特点，适合大量样本的筛查和现场监控。CN111735951ACN111735951A权利要求书1/1页1.一种检测甲氰菊酯的试纸条，包括样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)和底板(7)，其特征在于所述反应膜上具有包被有甲氰菊酯半抗原-载体蛋白偶联物的检测线(5)和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线(6)，所述结合物释放垫(2)喷涂有甲氰菊酯单克隆抗体-胶体金标记物，所述甲氰菊酯半抗原的制备方法如下：取乙烯基甲氰菊酯3.61g，加乙腈30ml溶解，加1mol/LHCl1ml，充分搅拌，加含1.58g高锰酸钾水溶液3ml，50℃反应3h，停止反应，加水200ml，加乙酸乙酯100ml×3萃取三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，蒸干，得到红色油状物，上硅胶柱，石油醚/乙酸乙酯(v/v，5/1)洗脱，分离，得到羧基甲氰菊酯半抗原产物3.4g，收率89.7％。2.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于所述样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)依次粘贴在底板(7)上。3.如权利要求1-2任一项所述的试纸条，其特征在于所述结合物释放垫1/3～1/2被覆盖于样品吸收垫下。4.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于所述甲氰菊酯半抗原-载体蛋白偶联物由甲氰菊酯半抗原与载体蛋白偶联得到，所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白、人血清白蛋白。5.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于所述甲氰菊酯单克隆抗体是以甲氰菊酯半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得，所述羊抗鼠抗抗体是将鼠源抗体免疫羊得到。6.一种制备权利要求1-5任一项所述试纸条的方法，其包括步骤：1)制备喷涂有甲氰菊酯单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫；2)制备具有包被有甲氰菊酯半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线的反应膜；3)将1)和2)制备好的结合物释放垫、反应膜与样品吸收垫、吸水垫和底板组装成试纸条。7.一种检测黄瓜、苹果等蔬菜及水果中甲氰菊酯残留的方法，其包括步骤：1)用权利要求1-5任一项所述的试纸条进行检测；2)分析检测结果。2CN111735951A说明书1/6页一种检测甲氰菊酯的试纸条及其应用技术领域[0001]本发明涉及一种检测甲氰菊酯的试纸条及其应用，具体涉及一种用于检测甲氰菊酯的胶体金试纸条，其特别适用于黄瓜、苹果等蔬菜及水果中甲氰菊酯残留的检测。背景技术[0002]农药在现代农业生产中发挥了极其重要的作用，拟除虫菊酯类农药因具有性质稳定，杀虫谱广，杀虫活性高，残效期短等特点，在世界范围内广泛应用，在中国也是用量增长最快的农药，其中甲氰菊酯是应用较多的一种。甲氰菊酯长期大规模生产和使用，严重危害了生态环境安全及农产品品质。[0003]甲氰菊酯国内外的研究方法多采用GC和HPLC法检测。与这两种方法相比，免疫化学检测法对药物检测具有快速、特异、灵敏、准确、可以批量监测、样品处理简单、能实现自动化操作等优点。而免疫化学法检测甲氰菊酯的前提是需要具备针对甲氰菊酯的抗体，本申请发明了甲氰菊酯人工抗原制备方法，并将其应用于快速检测试纸条中，用时短，操作简单，成本较低，适用于基层单位大批量地检测样品。发明内容[0004]本发明的目的是提供一种灵敏度高、操作简单、成本低、检测时间短的甲氰菊酯残留检测试纸条。[0005]本发明所提供的检测甲氰菊酯残留的试纸条，包括样品