一种天然新橙皮苷的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112079884A(43)申请公布日2020.12.15(21)申请号202010913719.X(22)申请日2020.09.03(71)申请人江西海富生物工程有限公司地址336400江西省宜春市上高县工业园沙基东路(72)发明人何安乐刘庚贵黄华学(74)专利代理机构长沙星耀专利事务所(普通合伙)43205代理人王艳宁星耀(51)Int.Cl.C07H1/06(2006.01)C07H17/07(2006.01)权利要求书2页说明书7页(54)发明名称一种天然新橙皮苷的制备方法(57)摘要一种天然新橙皮苷的制备方法。本发明制备方法包括以下步骤：（1）浸提：将原料破碎后，用热水浸提；（2）固液分离：将浸提液过滤，进行超滤，收集透过液；（3）搅拌结晶：将收集的透过液浓缩后，加入稀醇和盐后低温搅拌结晶；（4）层析：将浑浊的结晶液反向上活性炭柱，酸性冷水反向洗柱，用碱性水溶液正向梯度解吸，解吸液分段收集；（5）纳滤：将得到的解吸液分别纳滤，收集截留液；（6）干燥粉碎：将得到的截留液分别浓缩、干燥和粉碎，即得不同含量的天然新橙皮苷产品。本发明方法采用碱式盐低温粗结晶除杂、活性炭柱反向上柱、碱性水溶液梯度洗脱等工艺进行分离和纯化，获得高纯度的天然新橙皮苷产品。CN112079884ACN112079884A权利要求书1/2页1.一种天然新橙皮苷的制备方法，包括以下步骤：（1）浸提：将原料破碎后，用热水浸提，得浸提液；（2）固液分离：将步骤（1）所得浸提液过滤，进行超滤，收集透过液；（3）搅拌结晶：将步骤（2）收集的透过液浓缩，然后加入盐和稀醇溶液，得混合液，低温搅拌结晶，得浑浊结晶液；（4）层析：将步骤（3）所得浑浊结晶液反向上活性炭柱，酸性冷水反向洗柱，用碱性水溶液正向梯度解吸，按碱性水溶液的pH范围不同；分段收集解吸液；（5）纳滤：将步骤（4）收集的解吸液分别纳滤，收集截留液；（6）干燥粉碎：将步骤（5）收集的截留液分别浓缩、干燥和粉碎；步骤（1）中，所述原料为芸香科柑橘属植物的果实或果实皮。2.根据权利要求1所述天然新橙皮苷的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述原料为芸香科柑橘属植物中的枳实、枳壳、陈皮或酸橙；破碎至粒度为2～30目；所述热水的加入量为枳实重量的10~20倍，温度为80~100℃热水，所述浸提的次数为2~5次，每次浸提1~3h。3.根据权利要求1或2所述天然新橙皮苷的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述超滤为截留分子量为2000~4000Da。4.据权利要求1~3任一项所述天然新橙皮苷的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，浓缩至原体积的1/10~20；所述稀醇溶液中的醇为乙醇、甲醇、异丙醇中的任意一种，优选为乙醇；所述盐为钠或钾的氯化盐、硫酸盐、硝酸盐、硫酸盐、碱式氯化盐或碱式硫酸盐中的一种，优选为氯化钠、氯化钾、硫酸钠或硫酸钾；所述混合液中，乙醇体积分数为3~10%，优选为4~6%，盐的浓度为1~3wt%，优选为1.5~2.0wt%。5.据权利要求1~4任一项所述天然新橙皮苷的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，所述低温为-4至10℃，优选为-2至4℃；所述搅拌结晶为将稀醇溶液和盐加入浓缩液后，在低温条件下，在搅拌速度为60-100r/min，保持低温持续搅拌12~24h。6.据权利要求1~5任一项所述天然新橙皮苷的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，所述反向上活性炭柱是使上柱液从层析柱底部进入活性炭柱，上柱液持续保持低温搅拌状态；所述酸性冷水反向洗柱是使酸性冷水从层析柱底部进入活性炭。7.据权利要求1~6任一项所述天然新橙皮苷的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，所述活性炭柱径高比为1:5~10，上柱流速为0.5~1BV/h；所述活性炭粒径为2~30目；活性炭柱的温度保持4~35℃。8.据权利要求1~7任一项所述天然新橙皮苷的制备方法，其特征在于，步骤（4）中，所述所述酸性冷水pH为3~6，酸为柠檬酸、盐酸、苹果酸、抗坏血酸中的一种；所述酸性冷水温度与活性炭柱温度保持一致，±5℃，所述酸性冷水反向洗柱的流速为1~2BV/h，用量为2~4BV。9.据权利要求1~9任一项所述天然新橙皮苷的制备方法，其特征在于，所述碱性水溶液正向梯度解吸方式为碱性水溶液从层析柱顶部进入层析柱，流速为1~2BV/h，用量为2~4BV；所述碱为氢氧化钠或氢氧化钾中的一种；优选地，所述梯度解吸先以pH为7.5~8.5碱性水溶液解吸，然后以pH为9~13碱性水溶液解吸，解吸液分别单独收集。10.据权利要求1~10任一项所述天然新橙皮苷的制备方法，其特征在于，步骤（5）中，所2CN112079884A权利要求书2/2页述纳滤的截留分子量为400~600Da