一种生物发酵提取制备天然橙皮苷的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113072599A(43)申请公布日2021.07.06(21)申请号202110262288.XC12N1/16(2006.01)(22)申请日2021.03.10C12N1/14(2006.01)C12R1/685(2006.01)(71)申请人武汉市华甜生物科技有限公司C12R1/69(2006.01)地址436070湖北省武汉市葛店开发区创C12R1/125(2006.01)业北路12号(72)发明人谢新春王红波胡思前王亚珍黄冬云万伟雄谢一溉(74)专利代理机构武汉维盾知识产权代理事务所(普通合伙)42244代理人彭永念(51)Int.Cl.C07H1/06(2006.01)C07H1/08(2006.01)C07H17/07(2006.01)C12N1/20(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图1页(54)发明名称一种生物发酵提取制备天然橙皮苷的方法(57)摘要本发明公开了一种生物发酵提取制备天然橙皮苷的方法，首先配制发酵培养液，并将其与新鲜的桔皮或橙皮混合，然后进行蒸汽爆破处理，后对物料接种微生物并进行培养，再调整温度通气量等参数进行酶解，酶解完成之后进行结晶，过滤得到橙皮苷。其收率可以达到42%。本发明直接以新鲜桔皮或橙皮为原料，无需进行烘干及粉碎等操作，避免了提取阶段的高温条件对橙皮苷的降解，也避免了石灰水等碱液对环境的污染，整个过程设备要求简单，工艺流程短，橙皮苷的提取收率高。CN113072599ACN113072599A权利要求书1/1页1.一种生物发酵提取制备天然橙皮苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、配制发酵培养液，并将其与新鲜的桔皮或橙皮混合，固液质量比1:1~1.5;S2、将S1中得到的物料进行蒸汽爆破处理，压力为1.0~1.2MPa，处理时间为1‑2min；S3、S2处理后得到的物料接种微生物菌种，接种量为物料质量的1~3%，在30~35℃通气培养18~24小时；S4、S3中的物料降低通气量进行酶解反应，调整pH为4~5，酶解时间在14~22h；酶解反应后停止通气，直接在20‑25℃静置结晶，晶体进行过滤即得橙皮苷。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：S1中所述的发酵培养液包括可溶性淀粉10g/L‑15g/L，甘油2g/L‑5g/L，豆粕10g/L‑15g/L，酵母粉5g/L‑10g/L，大豆多肽粉1g/L‑2g/L，二丁基羟基甲苯0.1g/L‑0.2g/L，硫酸镁0.1g/L‑0.2g/L和氯化锌0.05g/L‑0.1g/L，用水配置。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：S2中蒸汽爆破处理时，先通入蒸汽升压至0.5~0.7MPa，保压6~8min，然后快速通入蒸汽升压至1.0~1.2MPa，爆破处理完成后泄至常压。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：快速通入蒸汽升压至1.01.2MPa所用的时~间在5min内。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：S3所述的微生物菌种为黑曲霉、米曲霉、枯草芽孢杆菌和酵母菌。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：黑曲霉、米曲霉、枯草芽孢杆菌的接种量均为3%，酵母菌的接种量为2%。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：S3中通气量为0.3VVM‑0.5VVM。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：S4中酶解反应时，先控制温度为15~20℃，酶解反应6~12小时，再将温度调整为35~40℃，酶解反应8‑10h。9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：S4中酶解反应时，通气量调整为0.2VVM‑0.3VVM。10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：结晶过程中，结晶时间为12~18h。2CN113072599A说明书1/4页一种生物发酵提取制备天然橙皮苷的方法技术领域[0001]本发明涉及植物提取技术，具体涉及一种技术领域，具体为一种生物发酵提取制备天然橙皮苷的方法。背景技术[0002]橙皮苷是一种具有多种生物活性的天然功能性组分,在医药、食品和化工等领域应用广泛。橙皮苷具有维持血管正常渗透压、增强毛细管韧性、降低胆固醇、调节免疫力、抗癌抗肿瘤等多种功效。橙皮苷广泛存在于桔皮和橙皮中，从桔皮和橙皮中高效环保提取橙皮苷对提高柑橘产业附加值具有重要意义。与此同时，橙皮苷是合成新型甜味剂新橙皮苷二氢查耳酮的原料。[0003]目前，从桔皮和橙皮中提取橙皮苷的主要提取方法有索氏提取法、微波提取法、超声波提取法和碱提取酸沉淀法。其中索氏提取法提取操作简单，但提取速率慢，且溶剂消耗量大。微波提取法和超声提取法环境危害小，但提取过程中温度易升高且温度不易控制，不利于橙皮苷的稳定，不适宜工业化大规模生产。传统大规模生产的碱提取酸沉淀法成本低廉方法简单，但大