一种生物磁性微球及其制备方法和使用方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112111042A(43)申请公布日2020.12.22(21)申请号202010560956.2C12N15/10(2006.01)(22)申请日2020.06.18C12N15/87(2006.01)C12N11/14(2006.01)(66)本国优先权数据C12N11/08(2020.01)201910540132.62019.06.21CN(71)申请人康码（上海）生物科技有限公司地址201321上海市浦东新区芙蓉花路118弄12号楼(72)发明人郭敏吴亮徐丽琼张政苏杰于雪(51)Int.Cl.C08F292/00(2006.01)C08F220/06(2006.01)G01N33/543(2006.01)G01N33/68(2006.01)C07K1/14(2006.01)权利要求书2页说明书25页附图3页(54)发明名称一种生物磁性微球及其制备方法和使用方法(57)摘要本发明提供一种生物磁性微球及其制备方法和用于蛋白质分离纯化的方法，所述生物磁性微球的磁性微球本体外表面具有至少一种带有支链的线型聚合物，该带有支链的线型聚合物一端共价偶联于磁性微球本体外表面，其他部分游离于磁性微球本体外表面，所述线型聚合物的主链为聚烯烃主链，线型聚合物的主链形成过程中可以无需交联剂。制备的生物磁性微球能实现目标蛋白的高效洗脱，有效减少目标蛋白的滞留时间和滞留比例，且操作使用便捷，用途广泛。CN112111042ACN112111042A权利要求书1/2页1.一种生物磁性微球，其特征在于：所述生物磁性微球的磁性微球本体外表面具有至少一种带有支链的线型聚合物，该带有支链的线型聚合物一端共价偶联于所述磁性微球本体外表面，其他部分游离于所述磁性微球本体外表面，所述线型聚合物的主链为聚烯烃主链；所述线型聚合物的支链含有功能基团，所述功能基团能够与目标物进行结合。2.根据权利要求1所述的生物磁性微球，其特征在于：所述线型聚合物由丙烯酸、丙烯酸盐、丙烯酸酯、甲基丙烯酸、甲基丙烯酸盐、甲基丙烯酸酯、其它丙烯酸类单体之一或其组合通过聚合得到；优选地，所述线型聚合物的主链形成过程中无需交联剂。3.根据权利要求1所述的生物磁性微球，其特征在于：所述功能基团含有特异性结合位点，所述特异性结合位点能够与目标物特异性结合；优选地，所述特异性结合位点为镍离子，能够与His标签的标记物特异性结合。4.根据权利要求1所述的生物磁性微球，其特征在于：所述线型聚合物的功能基团为羧基、羟基、氨基、巯基之一或其组合。5.根据权利要求1-4任一项所述的生物磁性微球，其特征在于：所述线型聚合物直接或通过连接基团间接固定于所述磁性微球本体的外表面。6.根据权利要求1-4任一项所述的生物磁性微球，其特征在于：所述磁性微球本体为SiO2包裹的磁性颗粒。7.根据权利要求6所述的生物磁性微球，其特征在于：所述磁性颗粒的化学成分包括铁化合物、铁合金、锌的氧化物、锰的氧化物、钆的氧化物、钴化合物、镍化合物、镍合金、锰氧化物、锰合金、锌的氧化物、钆的氧化物、铬的氧化物中任一种或其任意组合；优选之一，所述磁性颗粒的化学成分包括铁的氧化物、锌的氧化物、锰的氧化物、钆的氧化物、钴的氧化物、镍的氧化物、锰氧化物、锌的氧化物、钆的氧化物、铬的氧化物中任一种或其任意组合；2+优选方式之一，所述磁性颗粒的化学成分包括氧化铁、铁、钴、Co、氮化铁、Mn3O4、GdO、2+镍、Ni中任一种或其任意组合；其中，氧化铁优选为Fe3O4、γ-Fe2O3或者其组合；另优选方式之一，所述磁性颗粒的化学成分包括Fe3O4、γ-Fe2O3、氮化铁、Mn3O4、AlNi(Co)、FeCr(Co)、FeCrMo、FeAlC、AlNi(Co)、FeCrCo、ReCo、ReFe、PtCo、MnAlC、CuNiFe、AlMnAg、MnBi、FeNi(Mo)、FeSi、FeAl、FeNi(Mo)、FeSiAl、BaO·6Fe2O3、SrO·6Fe2O3、PbO·6Fe2O3、GdO中任一种或其任意组合；其中，所述Re为稀土元素铼。8.根据权利要求1-7中任一项所述生物磁性微球的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)对所述磁性微球本体进行化学修饰，将氨基引入到所述磁性微球本体的外表面，形成磁性微球A；优选之一，利用硅烷偶联剂对磁性微球本体进行化学修饰；(2)利用羧基与氨基之间的共价反应将丙烯酸分子共价偶联到所述磁性微球A的外表面，从而引入碳碳双键，形成磁性微球B；(3)在无交联剂的条件下，利用碳碳双键的聚合反应，将丙烯酸类单体分子进行聚合，得到的线型聚合物共价偶联于所述磁性微球B的外表面，进行固液分离，去除液相，得到磁性微球C；2CN112111042A权