小鼠肿瘤模型的建立方法及评价手段.docx

小鼠肿瘤模型的建立方法及评价手段【摘要】动物模型的建立是进行医学科研工作的重要研究手段之一。肿瘤是机体自身与外界施加因素之间对立平衡外界因素的干扰逐渐被机体所转化和接纳从而形成肿瘤。因此任何影响正常机体内外环境和施加因素的条件均可改变肿瘤形成的起始、进展和结局。本文就几种肿瘤动物模型的建立过程对不同模型特点和选择进行评价。【关键词】肿瘤；动物模型；评价方法【中图分类号】R392.11【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）03-0459-02人类疾病的发展过程十分复杂为深入探讨疾病的发生机制以人体作为实验对象存在很多的局限性而且很多的实验方法在道义上也受到限制。人类疾病动物模型是在医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟性表现的动物疾病材料。借助于动物模型来间接研究一些疾病的发病全过程从而更方便、更有效、更全面的认识人类疾病的发生发展规律同时也避免了人体实验造成的伤害。目前已展现出大量建立肿瘤动物模型的方法本文做一综述。1小鼠肿瘤动物模型的类型及建立方法1.1自发性小鼠肿瘤模型自发性肿瘤是指实验动物在自然情况下未经任何有意识的人工处理而发生的肿瘤。其发病特征和人类肿瘤很相似所以对人类肿瘤的研究有很高的价值而且自发肿瘤的产生可提供前瞻性和回顾性研究。若自发性肿瘤没有人为因素的干扰则更接近于人体肿瘤的真实状态。然而与人类疾病完全相同的动物自发性疾病模型并不多且样本数量有限而且在自然状态下细胞癌变的概率较低故很难得到条件满足、数量足够的动物模型所以该法在研究中很少使用。1.2诱发性小鼠肿瘤模型人为地运用各种致癌因素作用于实验动物的特定组织或器官从而产生相应肿瘤这就是诱发性动物肿瘤模型。给药途径和诱导剂的不同导致最后生成的肿瘤的类型有差异其成瘤率也不一样。化学诱导的肿瘤属实验动物的原发肿瘤其发病机制及肿瘤生长环境接近于人体原发肿瘤建立方法相对简单实验重复性好因此目前运用较为广泛。但该方法诱导周期仍较长成瘤率与移植法相比也有一定差距[1-2]。1941年Loreny和Stewart用二甲蒽喂养小鼠成功诱发小肠肿瘤。此后人们又陆续发现许多化合物如多环芳烃类、亚硝胺类和偶氮染料均具有致癌性[3]常见的为二甲胺肼（DMH）、黄曲霉素等。1.3移植性小鼠肿瘤模型将外源性肿瘤移植到小鼠体内而形成肿瘤这种方法建立的模型称之为移植性小鼠肿瘤模型。此模型与人类肿瘤有着类似的生物学特性因此应用的较多。按移植部位的不同可分为皮下移植和原位移植等。原位移植模型是将人体的肿瘤细胞株或组织移植到实验动物的相应部位其生长环境与原发肿瘤接近较好的反应肿瘤的生物学特性。皮下移植瘤是指将外来的组织或肿瘤细胞接种在试验动物的皮下使动物皮下形成瘤组织常用的有细胞悬液皮下注射和组织块皮下种植。其建立的模型成瘤率高容易建立和观察也能较好地反应肿瘤的生物学特性。1.4转基因小鼠肿瘤模型应用分子生物学方法对实验动物相应的基因进行改造或修饰培育出相应肿瘤的动物模型称之为转基因动物肿瘤模型。建立转基因肿瘤动物模型的方法有两种：①外源癌基因导入②基因敲除。人们将可诱导表达系统用于调控基因的时相表达如反式因子vtTA与四环素类似物强力霉素结合后可激活四环素操纵子的表达而tTA与强力霉素结合则抑制四环素操纵子的表达[4]诱导性的Hras-G12v小鼠黑色素瘤[5]、C-myc诱导性表达的T细胞淋巴瘤[6]及bar-abl诱导性表达的急性髓系白血病等肿瘤模型。转基因动物模型在理论上可能与原发肿瘤一致但目前对癌基因及抑癌基因的研究还有待深入只能作为一种发展方向短期内较难普及。随着肿瘤发病机制的深入研究及转基因技术的普及本法将渐趋成熟[7]。2小鼠肿瘤模型的评价手段2.1剖取肿瘤探查动物模型建立后需对该建模方法进行评价评价方法一般是待肿瘤形成后仔细观察肿瘤的生长情况每隔一段时间处死一批动物取出瘤组织测量其大小、观察组织形态及周围组织改变、肿瘤的转移情况并做肿瘤细胞生物学观察进行肿瘤标志物检测等。但剖腹探查必须定时处死动物样本量越来越少观察的情况和信息收集也十分有限。2.2MRI显像技术MRI显像技术是临床肿瘤诊断中十分重要的手段其组织分辨率高无创伤在动态监测活体肿瘤生长情况及肿瘤与周围组织的相互作用的同时还可获得检测部位的解剖与生理信息但该技术需特殊设备需专业技术人员操作完成且一般实验室无专门用于活体动物观察的磁共振仪不适合对大量实验动物进行连续观察[8]。2.3活体荧光成像技术活体生物荧光成像技术是近年来发展起来的一种分子生物学检测技术。运用