小鼠肿瘤模型建立.docx

小鼠肿瘤模型的建立及鉴定
[摘要]：目的：建立小鼠荷瘤数据模型，探索肿瘤生长的本质及其发生发展的规律，寻求对肿瘤生长及转移有抑制作用的药物及治疗方法。方法：小鼠右腋下注射H22肿瘤细胞，使小鼠荷瘤，观察肿瘤生长，记录体重数据并建立动物模型。结果：注射部位发生癌变，小鼠肿瘤生长明显，切片结果证明实验成功，模型构建完成，为灵芝多糖抗肿瘤研究奠定了动物实验基础。
关键词：小鼠，肿瘤，体重数据，动物模型
ToEstablishMiceTumorModelandIdentifyCharacteristics
[Abstract]:Purposes:Toestablishmicetumordatamodels,exploretheessenceoftumorgrowth,developthelaw,andseektoaneffectmethodoftumorgrowthandthetransferofdrugsandtreatments.Methods:NamedrightarmpitinjectionsH22tumorcellstoamouseneoplasmobservetumorgrowth.Torecordweightdataandestablishanimalmodels.Results:Injectionpartsturncancertization,themouse'stumorsgrowobviously,theconsequenceofslicesprovetheexperimentsuccessfully,andmodelestablishedcompletely,fortheanti-cancerresearchganodermalucidumpolysaccharidelayaanimalexperimentsfoundation.
Keywords:mouse,tumors,weightdata,animalmodels
0引言
肿瘤是由机体中某些细胞基因发生突变为特征的一种全身性疾病，它的危害不仅在于它损害身体的各器官，而且还会产生各种肿瘤并发症，如转移、积水、疼痛等，最终导致身体各器官功能衰竭而危及患者的生命。肿瘤细胞除了以浸润恶性生长方式向周围侵蚀传播之外，还可以通过其他途径扩散到其它脏器和组织里边去，使这些组织和脏器发生同样的肿瘤，所以肿瘤的发现、诊断、治疗要坚持三早、避免三晚。
近几年来，肿瘤化疗取得了相当的进步，肿瘤患者生存时间明显延长，特别是对白血病、恶性淋巴瘤等的治疗有了突破，但对危害人类生命健康最严重的、占恶性肿瘤90%以上的实体瘤的治疗未能达到满意的效果。药学家和肿瘤学家越来越深刻地认识到：要提高肿瘤治疗的疗效，必须从肿瘤发生发展的机制着手，才能取得新的突破性进展。近年来，分子肿瘤学、分子药理学的发展使肿瘤本质正在逐步阐明；大规模快速筛选、组合化学、基因工程等先进技术的发明和应用加速了药物开发进程；抗肿瘤药物的研究与开发已进入一个崭新的时代。当今抗肿瘤药物的发展战略有以下几点：①以占恶性肿瘤90%以上的实体瘤为主攻对象；②从天然产物中寻找活性成分；③针对肿瘤发生发展的机制，寻找新的分子作用(酶、受体、基因)靶点；④大规模快速筛选(High-throughputscreening);⑤新技术的导入和应用：组合化学、结构生物学、计算机辅助设计、基因工程、DNA芯片、药物基因组学(功能基因组学与药理学结合)等。本实验构建小鼠肿瘤的动物模型，为灵芝多糖抗肿瘤药物的研究提供动物实验基础。
1材料与方法
1.1实验材料
1.1.1动物及分组：取20只昆明鼠随机分成A组（10只），B组（5只），C组对照组（5只），编号饲养。
1.1.2试剂：无菌水，生理盐水，台酚蓝，2%冰醋酸，甲醛，乙醇，二甲苯，石蜡等。
1.1.3仪器：离心机，显微镜，计数板，电子称，超净工作台，温箱，切片机等。
1.2实验方法
1.2.1模型建立：取H22肿瘤细胞，3000转离心分钟，再用无菌生理盐水洗涤肿瘤细胞3次，并做适当稀释，取40微升细胞悬液加入10微升0.4%台酚蓝染色并镜检计数，制成浓度为3*106个/ml的肿瘤细胞悬液，每只小鼠右腋皮下接种肿瘤细胞悬液0.2毫升。
1.2.2：细胞计数：细胞计数液2%冰醋酸溶液。
取50微升细胞悬液加入450微升的细胞计数液中计数。
1.3记录：
接种完成后,逐日观察接种部位有无感染,肿瘤生长后有无自然消退,用游标卡尺，每周测量肿瘤长径a和短径b,并计算平均直径,即r=(a+b)/2，每天称量小鼠体重和肿瘤并记录，绘制曲线。
1.4制备组织切片：
a处死小鼠，将肿瘤组织切成1*1*0.4cm的小块。
b将切块的组织置于螺口瓶中，加入40%甲醛固定，过夜。
c固定完成后，倒出固定液，立即换