一种多肽金纳米簇荧光探针的合成及应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113061430A(43)申请公布日2021.07.02(21)申请号202110306247.6G01N21/64(2006.01)(22)申请日2021.03.23(71)申请人吉林大学地址130012吉林省长春市前进大街2699号(72)发明人庄红姜欣雨武思佳王淑谨赵寒青黄延军(74)专利代理机构长春市恒誉专利代理事务所(普通合伙)22212代理人李荣武(51)Int.Cl.C09K11/58(2006.01)C09K11/02(2006.01)B82Y20/00(2011.01)B82Y40/00(2011.01)权利要求书1页说明书4页附图5页(54)发明名称一种多肽金纳米簇荧光探针的合成及应用(57)摘要本发明属于功能性生物纳米材料技术领域，具体涉及一种多肽金纳米簇荧光探针的合成及应用，通过设计多肽序列CCYWDAHRDY保证了金属团簇稳定性，CCYWDAHRDY‑AuNCs荧光探针能够特异性检测食品中残留的金属Cu2+,其平均颗粒直径为1.8nm,金纳米簇在280nm附近有明显的吸收峰,当用280nm的激发光照射时，在600‑750nm区间有较强的荧光发射，发射峰在660nm附近。该方法简单,操作性强,成本低,多肽稳定性高，毒性低,且生物亲和性好,在检测Cu2+方面具有广泛的应用前景。CN113061430ACN113061430A权利要求书1/1页1.一种多肽金纳米簇荧光探针，其特征在于，该探针是以十肽即CCYWDAHRDY(Cys‑Cys‑Tyr‑Trp‑Asp‑Ala‑His‑Arg‑Asp‑Tyr)修饰的金纳米簇。2.根据权利要求1所述的多肽金纳米簇荧光探针，其特征在于所述多肽金纳米簇荧光探针在280nm附近有明显的吸收峰，在280nm激发下，在600‑750nm区间有较强的荧光发射，发射峰在660nm附近。3.根据权利要求1所述的多肽金纳米簇荧光探针，其特征在于所述多肽金纳米簇平均粒径约为1.8nm，分散性良好，无粒子团聚现象。4.权利要求1所述的多肽金纳米簇荧光探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)向干净的玻璃瓶内先加入氯金酸水溶液，在37℃下搅拌5min后，将其缓慢倒入BSA溶液(50mg/mL)中，随后迅速加入新制备的NaOH溶液(1mol/L)，将混合液在37℃下剧烈搅拌约24h，并在反应结束后将溶液在蒸馏水中透析12h而得到AuNCs溶液；2)将十肽CCYWDAHRDY溶于超纯水中，得到1mg/mL的CCYWDAHRDY溶液，将500μLCCYWDAHRDY溶液缓慢滴入2mL的AuNCs溶液中，在25℃下温和搅拌培养24h，反应体系颜色变为淡棕色，制备得到多肽金纳米簇溶液。5.根据权利要求1所述的一种多肽金纳米簇荧光探针的应用，其特征在于，其具有靶向标记作用，可用来特异性检测食品中残留的金属Cu2+，将60μL的样品溶液加入到100μL的多肽金纳米簇溶液中，将混合溶液用pH为6的PBS缓冲液稀释到1mL混合均匀，30℃下孵育10min后用荧光分光光度计进行光谱扫描并记录检测数据。2CN113061430A说明书1/4页一种多肽金纳米簇荧光探针的合成及应用技术领域：[0001]本发明涉及荧光探针技术领域，具体涉及一种靶向Cu2+的多肽金纳米簇荧光探针的合成及应用。背景技术：[0002]重金属离子在环境系统内积累，加大了对环境及人类健康的危害风险。Hg2+，Cd2+，Pb2+和Cu2+等重金属离子容易干扰酶和核酸并改变生物体生物学活性。Cu2+作为过渡金属在生物学中有着重要作用，适量的摄入Cu2+对于维持生物体的健康是很有必要的。但是，不适宜浓度的Cu2+可能会引起多种疾病。例如，贫血、视力下降是由Cu2+的缺乏引起的，而铜的含量过多可能会加速阿尔茨海默氏病和帕金森氏病的恶化。Cu2+离子广泛分布在土壤和水中，很容易通过食物链进入人体，此类污染物的实时监测是食品安全和疾病预防的先决条件。检测Cu2+的方法主要包括荧光光谱法、比色法、电化学分析法和气相色谱等。[0003]近年来纳米材料和荧光探针的出现提供了新的方法，特别是AuNCs作为检测环境、食品中的污染物的荧光传感器吸引了许多研究人员的关注。AuNCs是由数十个甚至数百个金原子组成的量子点，平均粒径小于2nm。AuNCs由于其量子特性而具有独特的光学特性，如具有更长的光周期。与传统的荧光染料或蛋白质相比，由于其化学惰性和超细尺寸，金纳米簇对生物体的活性影响很小，它们更稳定，具有低毒和高生物相容性等优异性能。此外，AuNCs具有更大的斯托克斯位移和更强的荧光发射。[0004]综上所述，如何快速检测食品中残留的Cu2+是目前亟待解决的热点问题，通过设计合理有效的