一种白及多糖物质及其制备方法与应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113754791A(43)申请公布日2021.12.07(21)申请号202111220617.0A61Q17/04(2006.01)(22)申请日2021.10.20A61Q19/00(2006.01)(71)申请人四川丽妍工坊生物科技有限公司地址620000四川省眉山市眉山经济开发区新区(72)发明人何阳(74)专利代理机构北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)11463代理人陈秋梦(51)Int.Cl.C08B37/00(2006.01)A61K8/73(2006.01)A61K31/715(2006.01)A61P17/16(2006.01)A61P17/18(2006.01)权利要求书2页说明书11页附图5页(54)发明名称一种白及多糖物质及其制备方法与应用(57)摘要本发明公开了一种白及多糖物质及其制备方法与应用，属于化妆品技术领域。其制备可包括以下步骤：用低元醇对白及鳞茎进行回流提取，将回流提取液经固液分离后得到的固相物与复合酶和水共同酶解提取，将酶解提取液经固液分离后得到的液相物进行第一次醇沉，收集第一次醇沉后的沉淀；除去上述沉淀中的蛋白质，进行第二次醇沉，收集第二次醇沉后的沉淀，复溶，第一次透析，收集截留于透析装置内的物质，得到白及粗多糖。白及粗多糖进一步采用离子交换和葡聚糖凝胶分别纯化可获得白及多糖。上述白及粗多糖和白及多糖均能够具有一定的抑制炎症因子表达以及缓解紫外线造成的皮肤损伤的作用，并表现出良好的保湿功能，可用于制备相应的化妆品或药物。CN113754791ACN113754791A权利要求书1/2页1.一种白及多糖物质的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：用低元醇对白及鳞茎进行回流提取去除小分子物质，将回流提取液经固液分离后得到的固相物与复合酶和水共同酶解提取，将酶解提取液经固液分离后得到的液相物进行第一次醇沉，收集第一次醇沉后的沉淀；除去所述沉淀中的蛋白质，随后进行第二次醇沉，收集第二次醇沉后的沉淀，复溶，第一次透析，收集截留于透析装置内的物质，得到白及粗多糖。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，回流提取过程中，所述低元醇与所述白及鳞茎的料液比为1g：8‑12mL，所述低元醇的浓度为92‑98vt％；优选地，所述低元醇为乙醇；优选地，回流提取的次数为2‑3次；优选地，每次回流提取均于20‑30℃的条件下进行2‑3h；优选地，所述白及鳞茎为粉碎过筛后的白及鳞茎粉。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，酶解提取过程中，所述固相物与水的料液比为1g：8‑12mL；所述复合酶包括纤维素酶和木瓜蛋白酶，所述纤维素酶的用量为所述固相物的1.2‑1.8wt％，所述木瓜蛋白酶的用量为所述固相物的0.8‑1.2wt％；优选地，酶解提取是于52‑58℃且pH为5.2‑5.8的条件下进行1.5‑2.5h；优选地，酶解提取的次数为2‑3次。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，除去所述蛋白质包括：将第一次醇沉后的沉淀经溶解得到的多糖溶液与Sevage试剂混合，待蛋白质变性后离心，除去处于多糖溶液层和Sevage试剂层中间的蛋白质变性层；优选地，所述多糖溶液与所述Sevage试剂的体积比为2.5‑3.5：1；优选地，离心是将由所述多糖溶液与所述Sevage试剂混合后的混合物摇晃25‑35min后，以3800‑4200r/min的转速离心8‑12min；优选地，除去所述蛋白质之前，还包括用浓度为92‑98vt％的乙醇对第一次醇沉后的沉淀进行洗涤。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，第一次醇沉和第二次醇沉所用的乙醇加入液相物中后，最终浓度均为78‑82vt％；优选地，先将酶解提取后的所述液相物浓缩后再进行第一次醇沉。6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，还包括对所述白及粗多糖进行纯化，得到白及多糖；优选地，纯化包括：采用离子交换柱对所述白及粗多糖进行初步纯化，初步纯化是用纯水、0.08‑0.12mol/L的NaCl溶液、0.28‑0.32mol/L的NaCl溶液和0.48‑0.52mol/L的NaCl溶液依次作为洗脱剂进行梯度洗脱；收集最后洗脱液中活性成分含量最多的部分，得到初纯化白及多糖；优选地，初步纯化过程中每个洗脱剂的体积为所述离子交换柱的体积的1‑2倍；优选地，所述离子交换柱为DEAE‑52纤维素阴离子交换柱；优选地，纯化还包括：采用凝胶柱对纯化步骤中收集的部分进行再次纯化，再次纯化过程中所用的洗脱剂为去离子水，收集洗脱液中活性成分含量最多的部分；优选地，再次纯化过程中，洗脱剂的洗脱体积为凝胶柱的体积的1‑2倍；2CN113754791A权利要求书2/2页优选地，所述凝胶柱为Sephadex