一种铁筷子种苗的繁育方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114731951A(43)申请公布日2022.07.12(21)申请号202210315714.6(22)申请日2022.03.28(71)申请人上海应用技术大学地址201418上海市奉贤区海泉路100号(72)发明人孔家烨董竞宇张志国王艺程叶常青(74)专利代理机构武汉菲翔知识产权代理有限公司42284专利代理师贾双明(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称一种铁筷子种苗的繁育方法(57)摘要本发明涉及铁筷子组织培养技术领域，具体涉及一种铁筷子种苗的繁育方法，具体包括以下步骤：S1、外植体的选择和处理；S2、无菌试管苗的诱导；S3、试管苗的增殖培养；S4、试管苗的生根培养，本发明方法操作简单，培养基配制方便，外植体材料容易获得，诱导率高，增殖系数高，生根率高，再生植株保留了母本的优良性状，实现铁筷子组培苗的植株再生，是铁筷子优良品种繁育的有效途径。CN114731951ACN114731951A权利要求书1/1页1.一种铁筷子种苗的繁育方法，其特征在于，具体包括以下步骤：S1、外植体的选择和处理：于生长季节选取无病虫害、生长良好的植株作为外植体，去除叶片，预处理，灭菌剂灭菌，无菌水浸洗，然后切除伤口处部分组织，将茎切分成段，每段带有一个芽点；S2、无菌试管苗的诱导；S3、试管苗的增殖培养；S4、试管苗的生根培养。2.根据权利要求1所述的一种铁筷子种苗的繁育方法，其特征在于：所述步骤S2中具体步骤为：将经过步骤S1处理的外植体，接种于诱导培养基中，进行暗培养10天，然后转入光培养，45天后获得无菌试管苗。3.根据权利要求2所述的一种铁筷子种苗的繁育方法，其特征在于：所述步骤S3具体为：将步骤S2中获得的外植体切分成段，每段带有一个芽点，接种至增殖培养基中，芽点朝上平铺于诱导培养基上，培养30天，获得大量丛生芽。4.根据权利要求3所述的一种铁筷子种苗的繁育方法，其特征在于：所述步骤S4具体为：将步骤S3中获得的试管苗切分成单株，接种于生根培养基中，培养45天，获得再生植株。5.根据权利要求4所述的一种铁筷子种苗的繁育方法，其特征在于：所述步骤S2、步骤S3和步骤S4中培养条件为：温度保持在25℃，温度浮动范围为±2℃，光照时间12h/d，光照强度1500‑2000LX。6.根据权利要求1所述的一种铁筷子种苗的繁育方法，其特征在于，所述步骤S1中，外植体的选择，在其生长季选取生长健壮无病虫害且生长健壮的植株作为供试材料，切分成段，每个外植体都带有一个芽点，选取生长健康的茎作为外植体，灭菌剂为75％酒精，0.1％升汞溶液，灭菌时间分别是30s和10‑15min。7.根据权利要求2所述的一种铁筷子种苗的繁育方法，其特征在于，步骤S2中，所述诱导培养基以MS培养基为基本培养基，添加6‑BA浓度为1.0‑5.0mg/L、TDZ浓度为0.1‑0.5mg/L、NAA浓度为0.1‑1.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂7.0g/L、AC0.1g/L，PH为5.8‑6.2。8.根据权利要求3所述的一种铁筷子种苗的繁育方法，其特征在于，步骤S3中，所述增殖培养基以MS培养基为基本培养基，添加6‑BA浓度为1.0‑3.0mg/L、ZT浓度为0.1‑0.3mg/L、NAA浓度为0.1‑1.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂7.0g/L、AC0.1g/L，PH为5.8‑6.2。9.根据权利要求4所述的一种铁筷子种苗的繁育方法，其特征在于，步骤S4中，所述生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基，NAA浓度为0.1‑1.0mg/L、2,4‑D浓度为0.1‑0.5mg/L、AC1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂7.0g/L，PH为5.8‑6.2。2CN114731951A说明书1/5页一种铁筷子种苗的繁育方法技术领域[0001]本发明涉及铁筷子组织培养技术领域，具体涉及一种铁筷子种苗的繁育方法。背景技术[0002]铁筷子(Helleborus)为毛茛科(Ranunculaceae)，铁筷子属(Helleborus)植物，多年生常绿草本，株型低矮、花及叶均奇特，花期由冬至翌春，花色丰富，在美国和欧洲被作为花园地被和插花植物非常流行。该属共有22个种，大部分分布于欧洲巴尔干地区，只有Helleborusthibetanus分布于东亚地区，为中国特有种，在四川、陕西、甘肃等地有野生分布。药用其根及根茎，其性凉味苦、具有清热解毒、消肿止痛、活血散瘀等功效，主治膀胱炎、尿道炎、跌打损伤及疮疖肿毒等症。铁筷子中的嚏根草甙元在体外对人体上皮癌KB细胞有抑制效应；铁筷子水提取物对人胃癌细胞及人白血病K562细胞的集落形成均有明显抑制作用；铁筷子多糖可以抑制体