一种提取血耳中活性成分的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115448991A(43)申请公布日2022.12.09(21)申请号202211143124.6(22)申请日2022.09.20(71)申请人湖北文理学院地址441053湖北省襄阳市隆中路296号(72)发明人隋哲杨铭鑫黄银银余海忠田朋姣(74)专利代理机构深圳市世纪恒程知识产权代理事务所44287专利代理师罗敏(51)Int.Cl.C08B37/00(2006.01)A23L31/00(2016.01)权利要求书2页说明书11页附图5页(54)发明名称一种提取血耳中活性成分的方法(57)摘要本发明公开一种提取血耳中活性成分的方法，包括以下步骤：将血耳粉末与低共熔溶剂混合，在室温下对所述血耳粉末进行超声萃取，然后离心并收集上清液，得血耳浸提液；向所述血耳浸提液中加入沉淀助剂，经混匀、静置、离心后取沉淀物，将所述沉淀物洗涤、离心后加入至蒸馏水中进行水浴溶解，得溶解液；采用超滤管对所述溶解液进行过滤，分别得到滤过物和截留物；向所述滤过物中加入冷冻的乙醇，离心后取上清液进行旋蒸，得到以血耳粗多酚为主的小分子提取物；将所述截留物加水溶解稀释，得到以血耳粗多糖为主的大分子提取物。本发明以低共熔溶剂作为萃取溶剂，同时以超声萃取为辅助手段，从而实现在室温下高效提取出血耳中的多种活性成。CN115448991ACN115448991A权利要求书1/2页1.一种提取血耳中活性成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：将血耳粉末与低共熔溶剂混合，在室温下对所述血耳粉末进行超声萃取，然后离心并收集上清液，得血耳浸提液；向所述血耳浸提液中加入沉淀助剂，经混匀、静置、离心后取沉淀物，将所述沉淀物洗涤、离心后加入至蒸馏水中进行水浴溶解，得溶解液；采用超滤管对所述溶解液进行过滤，分别得到滤过物和截留物；向所述滤过物中加入冷冻的乙醇，离心后取上清液进行旋蒸，得到以血耳粗多酚为主的小分子提取物；将所述截留物加水溶解稀释，得到以血耳粗多糖为主的大分子提取物。2.如权利要求1所述的提取血耳中活性成分的方法，其特征在于，所述低共熔溶剂的氢键受体为氯化胆碱，所述低共熔溶剂的氢键供体为丙二醇、氯化锌、乙二醇、尿素、丙三醇、聚乙二醇、山梨醇、草酸或柠檬酸。3.如权利要求1所述的提取血耳中活性成分的方法，其特征在于，将血耳粉末与低共熔溶剂混合，在室温下对所述血耳粉末进行超声萃取，然后离心并收集上清液，得血耳浸提液的步骤之前，还包括：以尿素为氢键供体，氯化胆碱为氢键受体，加入去离子水，混匀后于75～85℃下孵育至溶液澄清透明且无晶体析出，得到低共熔溶剂。4.如权利要求3所述的提取血耳中活性成分的方法，其特征在于，以尿素为氢键供体，氯化胆碱为氢键受体，加入去离子水，混匀后于75～85℃下孵育至溶液澄清透明且无晶体析出，得到低共熔溶剂的步骤中：所述氢键受体、氢键供体的摩尔比为1:1～4，所述去离子水的质量为所述氢键受体和氢键供体总质量的15～25％。5.如权利要求1所述的提取血耳中活性成分的方法，其特征在于，将血耳粉末与低共熔溶剂混合，在室温下对所述血耳粉末进行超声萃取，然后离心并收集上清液，得血耳浸提液的步骤中：每0.1～1g的所述血耳粉末对应与10～200mL的所述低共熔溶剂混合；和/或，所述血耳粉末的目数不小于100目；和/或，所述超声萃取的超声波功率为150～650W，超声开启频率为工作30s/停止30s，萃取时间为0.5～2.5h，萃取温度为不高于25℃的室温。6.如权利要求1所述的提取血耳中活性成分的方法，其特征在于，向所述血耳浸提液中加入沉淀助剂，经混匀、静置、离心后取沉淀物，将所述沉淀物洗涤、离心后加入至蒸馏水中进行水浴溶解，得溶解液的步骤中：所述沉淀助剂包括无水乙醇和异戊醇，所述无水乙醇和所述异戊醇的体积比为3～5:1；和/或，所述血耳浸提液与所述沉淀助剂的体积比为1:3～5；和/或，所述水浴溶解的温度不高于37℃，溶解时间为1～3h。7.如权利要求1所述的提取血耳中活性成分的方法，其特征在于，采用超滤管对所述溶解液进行过滤，分别得到滤过物和截留物的步骤，包括：将所述溶解液置于超滤管中，于10000～15000g的条件下离心10～20min，收集滤过液，2CN115448991A权利要求书2/2页即得所述滤过物，然后将所述超滤管倒置，于800～1200g的条件下离心10～15min，收集滤过液，即得所述截留物；其中，所述超滤管的截留分子量为3000Da。8.如权利要求1所述的提取血耳中活性成分的方法，其特征在于，向所述滤过物中加入冷冻的乙醇，离心后取上清液进行旋蒸，得到以血耳粗多酚为主的小分子提取物的步骤中：所述冷冻的无水乙醇的体积为所述滤过物体积的4～6倍。9.如权利要求1所述的提取血耳中活性成