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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111196865A(43)申请公布日2020.05.26(21)申请号202010156053.8(22)申请日2020.03.09(71)申请人杭州奥得科技有限公司地址311121浙江省杭州市余杭区仓前街道文一西路1378号1幢F座312室(72)发明人王淑玲高建华李欣岳夏仙(74)专利代理机构杭州华知专利事务所(普通合伙)33235代理人杨秀芳(51)Int.Cl.C08B37/00(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图2页(54)发明名称一种铁皮石斛活性成分的提取方法(57)摘要本发明公开了一种铁皮石斛活性物质的提取方法,包括酶-溶剂提取、酶-Sevag试剂脱蛋白、活性炭脱色、透析、干燥步骤。本发明在常规水提取之前进行乙酸乙酯脱脂和酶解,并在Sevag试剂脱蛋白前先酶解,有效地增加了铁皮石斛多糖的释放、减少了铁皮石斛多糖的损失、降低了脂溶性成分和醇溶性糖的含量,同时保证了石斛多糖较高的提取率和较高的活性。本方法避免了单一成分提取对名贵药材的浪费,在获得石斛多糖的同时获得石斛碱,不仅保持了多糖的高收率,且具有较高的经济效益。CN111196865ACN111196865A权利要求书1/1页1.一种铁皮石斛活性成分的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:1)酶解提取:以80目以上的干铁皮石斛粗粉为原料,加入乙酸乙酯脱脂,过滤,得到的滤渣Ⅰ干燥后中加入加适量水和酶试剂,在40~70℃进行酶解,酶解pH为3.0~6.0;升温使酶灭活,过滤,得到的滤渣Ⅱ干燥后加入酸性乙醇加热回流进行醇提,过滤得到滤液①和滤渣Ⅲ,在干燥的滤渣Ⅲ中加水进行水提,过滤得到滤液②和滤渣Ⅳ;将滤液②浓缩至适量,加入乙醇醇沉,在2~5℃下醇沉过夜;过滤,得到的滤渣Ⅴ干燥后得到粗多糖;2)脱蛋白:取粗多糖复溶,加入蛋白酶30~50℃进行恒温处理,离心,取上清液,加入由氯仿:正丁醇(vol)=4.0:1~4.5:1形成的Sevag试剂,剧烈震荡,离心取上清液,重复上述步骤至无变性蛋白析出;3)脱色:向步骤2)中脱蛋白后的上清液加入活性炭或大孔吸附树脂脱色,抽滤,得到溶液A;4)透析:将步骤3)中脱色后的溶液A进行透析除去水溶性小分子杂质,得到溶液B;5)干燥:将步骤4)处理后的溶液B冷冻干燥,得到铁皮石斛多糖。2.根据权利要求1所述的铁皮石斛活性成分的提取方法,其特征在于,所述步骤1)还包括:滤液①经过减压蒸干、1~2%盐酸水溶液溶解、二氯甲烷萃取、氨水调节pH=8~12、氯仿萃取、减压蒸干可以得到铁皮石斛总生物碱提取物。3.根据权利要求1所述的铁皮石斛活性成分的提取方法,其特征在于,所述步骤1)的酶试剂为纤维素酶和/或果胶酶,每100mL溶液添加酶试剂0.5~2.0g。4.根据权利要求1所述的铁皮石斛活性成分的提取方法,其特征在于,所述步骤1)中的乙酸乙酯的加入量为10~30倍量,温度为50~90℃。5.根据权利要求1所述的铁皮石斛活性成分的提取方法,其特征在于,所述步骤1)中的醇提为加入10~30倍量、pH=3~5的70~95%酸性乙醇在40~70℃回流提取1.5~2.5h,重复1~4次。6.根据权利要求1所述的铁皮石斛活性成分的提取方法,其特征在于,所述步骤1)中的水提为加入10~30倍量水提取1~4h,重复1~4次。7.根据权利要求1所述的铁皮石斛活性成分的提取方法,其特征在于,所述步骤1)中的醇沉的含醇量为65~85%,醇沉时间为12~24h。8.根据权利要求1所述的铁皮石斛活性成分的提取方法,其特征在于,所述步骤2)中的蛋白酶为胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶的一种或多种。9.根据权利要求1所述的铁皮石斛活性成分的提取方法,其特征在于,所述步骤2)中的Sevag试剂与粗多糖溶液的体积比为1∶3~1∶5。10.根据权利要求1所述的铁皮石斛活性成分的提取方法,其特征在于,所述步骤3)中的活性炭的加入量为每100mL溶液加入活性炭0.5~1.5g,水浴时间为0.5~2h;所述大孔吸附树脂的加入量为每100mL溶液4~7g,脱色过程为200r/min摇床震荡吸附2h。11.根据权利要求1所述的铁皮石斛活性成分的提取方法,其特征在于,所述步骤4)为:将步骤3)中脱色后的溶液装入已处理好的透析袋中,置于容器中通自来水,使水流自下而上,之后再通纯净水透析,其中自来水透析24~48h、纯净水透析12~24h。2CN111196865A说明书1/7页一种铁皮石斛活性成分的提取方法【技术领域】[0001]本发明属于植物多糖领域,具体涉及一种铁皮石斛活性成分的提取方法。【背景技术】[0002]铁皮石斛是属兰科石斛多年附生的草本植物,俗称黑节草、铁吊兰,是中国传统的名贵药材,享有“救命仙草”