一种无褐化杉木外植体及其制备方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115486370A(43)申请公布日2022.12.20(21)申请号202211221358.8(22)申请日2022.10.08(71)申请人四川省林业科学研究院地址610081四川省成都市星辉西路18号(72)发明人黄振王丽华李佳蔓陈炙杨勇智肖兴翠郭洪英(74)专利代理机构北京正华智诚专利代理事务所(普通合伙)11870专利代理师王玲玲(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图3页(54)发明名称一种无褐化杉木外植体及其制备方法(57)摘要本发明提供了一种无褐化杉木外植体及其制备方法，制备方法包括如下步骤：剪取成年杉木树冠当年生枝条，保留枝条的带芽茎段和顶芽，剪掉其余部分，获得茎段；将茎段末端的针叶剪掉，保留基部，然后将茎段完全置于预处理液中浸泡并搅拌；将预处理后的茎段完全置于浸泡液一中浸泡；将浸泡液一中处理后的茎段进行消毒，制得。该杉木外植体具有来源广泛、污染率低的优点，可有效解决现有的杉木外植体存在的来源局限性大，培育过程中污染率高，存在褐化的问题。CN115486370ACN115486370A权利要求书1/1页1.一种无褐化杉木外植体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)剪取成年杉木树冠当年生枝条，保留枝条的带芽茎段和顶芽，剪掉其余部分，获得茎段；(2)将茎段末端的针叶剪掉，保留基部，然后将茎段完全置于预处理液中浸泡并搅拌；(3)将预处理后的茎段完全置于浸泡液一中浸泡；(4)将浸泡液一中处理后的茎段进行消毒，制得。2.如权利要求1所述的无褐化杉木外植体的制备方法，其特征在于，步骤(1)中茎段的长度为10‑15cm。3.如权利要求1所述的无褐化杉木外植体的制备方法，其特征在于，步骤(1)中枝条上的针叶排布为轮状叶。4.如权利要求1所述的无褐化杉木外植体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中预处理液包括无菌水、PVP和吐温‑80，其中PVP的浓度为0.5‑2.0g/L，吐温‑80的浓度为0.4‑0.6g/L。5.如权利要求1所述的无褐化杉木外植体的制备方法，其特征在于，步骤(3)中浸泡液一包括无菌水、PVP和PEG6000，其中PVP的浓度0.5‑2.0g/L，PEG6000的浓度为8‑12g/L；茎段在浸泡液一中浸泡时间为2‑10h。6.如权利要求1所述的无褐化杉木外植体的制备方法，其特征在于，步骤(3)中浸泡处理结束到步骤(4)中消毒处理之间还包括以下步骤，具体为：将浸泡液一中的茎段取出，削去叶片，保留腋芽，将无叶茎段剪成带有1‑2腋芽的小段，将带有腋芽的小段置于浸泡液二中浸泡。7.如权利要求1所述的无褐化杉木外植体的制备方法，其特征在于，浸泡液二包括无菌水和PVP，其中PVP的浓度为0.5‑2.0g/L；带有腋芽的小段在浸泡液二中浸泡时间为15‑30min。8.如权利要求4、5或7中任一项所述的无褐化杉木外植体的制备方法，其特征在于，预处理液、浸泡液一和浸泡液二中的PVP为PVPK‑20、PVPK‑30或PVPK‑40。9.如权利要求1所述的无褐化杉木外植体的制备方法，其特征在于，步骤(4)中消毒液为有效氯含量为1.6‑2.1g/L的84消毒液，消毒时间为25‑40min，消毒过程中摇动容器若干次，每次不低于30s，消毒完成后，用浸泡液二震荡冲洗，然后将茎段置于浸泡液二中备用。10.一种无褐化杉木外植体的制备方法，其特征在于，采用权利要求1‑9中任一项所述的方法制得。2CN115486370A说明书1/6页一种无褐化杉木外植体及其制备方法技术领域[0001]本发明属于杉木繁殖技术领域，具体涉及一种无褐化杉木外植体及其制备方法。背景技术[0002]杉木是我国南方地方最重要的乡土用材林树种，我国人民利用杉木的历史悠久，远在秦汉期间《尔雅》中就有提及，表明很早以前人民利用了该木材。杉木主要用于房屋、轮船、矿山、造纸、家具家装等生活和生产场景，是最重要的建筑材、纸浆造纸用材和装饰用材。以前杉木的主要繁殖类型有实生繁殖和无性系繁殖两种，目前，随着组培快繁技术的提高，通过组培快繁的方法对杉木进行繁殖成为主要的繁殖方式。目前组培快繁的外植体来源主要是幼龄树(小于10年)的基部萌条或者是大树伐桩上的萌条，这些材料的特点是萌条数量多，萌条位置低易于观察和选择，萌条幼嫩，杉木油等次生代谢物相对较少，组培的过程中不容易褐化，培养过程中反应快，液芽萌发快、萌发能力强，且该萌条具有生长的特性，其发育的植株不会出现偏冠现象。而成年大树冠层穗条节间显著小于基部萌条，冠层针叶紧密，尤其是针叶基部更为致密，导致针叶间缝隙较小，消毒液难以渗透，缝隙内的微生物难以杀灭，非常容易污染；而且冠层穗条直径要大于同龄的基部萌条，杉木油等内含物更多