一种特异性捕获游离细胞的微流控芯片.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112048425A(43)申请公布日2020.12.08(21)申请号202010905837.6(22)申请日2020.09.01(71)申请人贝勒知临（杭州）生物技术有限公司地址310018浙江省杭州市经济技术开发区白杨街道科技园路20号13幢4层(72)发明人徐天宏高学娟徐知临(51)Int.Cl.C12M1/00(2006.01)C12M1/36(2006.01)B01L3/00(2006.01)权利要求书1页说明书8页序列表1页附图1页(54)发明名称一种特异性捕获游离细胞的微流控芯片(57)摘要本发明公开了一种特异性捕获分离游离胎儿细胞或循环肿瘤细胞的微流控芯片及其方法和用途。所述微流控芯片包括：含有螺旋形排列的管道的微流控芯片和管壁表面修饰特异性识别游离胎儿细胞或循环肿瘤细胞的分子。螺旋形排列的管道不仅会增加细胞混合液在芯片中移动的总路程，也会因轨道半径的不断改变使细胞在芯片中运动时的离心力随之不断改变，增加细胞与连有特异性捕获分离标签的管道壁的接触，从而确保目的细胞能够被该芯片捕获分离。芯片与气压泵之间活口连接，不同的芯片表面连有不同的捕获分离标签，从而可以捕获分离不同类型的细胞。气压泵上连有可以控制流速的电子芯片，从而可以根据不同的细胞类型和使用者的不同需求调控流速。CN112048425ACN112048425A权利要求书1/1页1.一种特异性捕获分离游离胎儿细胞或循环肿瘤细胞的微流控芯片，所述微流控芯片包括：如图1所示的螺旋形环绕的管道在芯片中，管道的直径为50到150微米之间，两圈管道间的距离为0到500微米，芯片的最中心管道直径为50到300微米之间，直接通过软管与气压泵相连，管道最外圈的开口与进样软管相连；在管壁表面修饰特异性识别游离胎儿细胞或循环肿瘤细胞的分子；微流控芯片只有一个进样口和一个出样口，样本进入芯片以后必须走完管道才能从芯片出口离开，这样就使得样本里的细胞与管壁表面修饰的特异性识别分子有充分的接触机会；微流控芯片进口气压泵上连有可以控制流速的电子芯片，可以调控流速以使得微流控的细胞捕获效率达到最优。2.根据权利要求1所述的微流控芯片，所述的在管壁表面修饰的特异性识别游离胎儿细胞或循环肿瘤细胞的分子为能与特定细胞表面特异性分子或表面抗原特异性结合的小分子螯合物、抗体、蛋白、核酸适配体、多肽序列或类似的小分子化合物。3.根据权利要求1所述的微流控芯片，所述的在管壁表面修饰的特异性识别游离胎儿细胞或循环肿瘤细胞的分子为该多肽序列：EDVKDINFDTKEKFLAGCLIVSFHEGKCSEQIDNO.1。4.一种捕获游离胎儿细胞或循环肿瘤细胞的方法，所述方法包括：把含有待检测细胞的样品加样通过权利要求1至3任一项所述的微流控芯片。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述样品为经过预处理的血样样品，所述预处理是指去除样品中的红细胞。6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述样品为血液以外的其他生物体液样品，如尿液、腹水、脑脊液、组织灌洗液、胸水、淋巴液等。7.权利要求1-6任一项所述的微流控芯片作为产前筛查或诊断、肿瘤筛查或诊断、肿瘤进展或预后的检测试剂或工具的用途。2CN112048425A说明书1/8页一种特异性捕获游离细胞的微流控芯片技术领域[0001]本发明涉及一种游离细胞捕获分离微流控芯片及其相关产品和用途。背景技术[0002]从母体血液中精确地鉴定并分离出胎儿细胞，从肿瘤患者的血液中精确地捕获并分离出循环肿瘤细胞，从特定的细胞群体中精确地检测、分离和鉴定出某种细胞亚型；这些在大量的背景细胞中检测、分离和鉴定出极少数的目的细胞的方法能否成功，在其各自的领域，为医疗诊断及其后期的相关应用上具有重要的意义。然而实现这种分离方法犹如“大海捞针”无论在技术方法还是仪器精度上都有着极高的要求，使得其目前在医学及科研领域还不能被广泛的使用。[0003]目前广泛使用的三种产前筛查检测方法主要为：羊水穿刺术、绒毛膜绒毛取样术以及胎儿游离DNA(cfDNA)检测。但是，这三种技术都存在着一定的局限性。羊膜穿刺术：专业技术人员将针头插入胎儿羊膜囊，取羊水20-30ml，然后对其中的胎儿细胞进行细胞遗传学检验，通常在妊娠16周进行；绒毛膜取样：专业技术人员获取胎盘的少量生物活检样本并进行遗传学检测分析，通常在8-12周进行。这两种检测手段能为临床决策提供准确的信息，但这些检测手段为侵入性检测手段，存在增加流产风险(0.6～2％)、给孕妇造成创伤等不利因素。血浆游离胎儿DNA的检测被证明在胎儿非整倍体疾病(21-三体、18-三体、13-三体)诊断中具有良好的灵敏性。然而，在妊娠的早期和妊娠晚期，cfDNA分别仅占总血浆