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观察哺乳动物胃肠平滑肌的一般(yībān)生理特性。学习哺乳类动物离体器官灌流的一种方法。实验(shíyàn)原理生理学实验中常用的生理溶液(róngyè)有生理盐水、任氏液(Rinne)、乐氏液(Locke)及台氏液(Tyrode)。这些生理溶液(róngyè)是为了在进行离体器官或组织实验时使标本尽可能处于近似在体内的环境中以保证其正常的功能活动。而用于灌流组织的液体其电解质成分、晶体渗透压、pH、缓冲能力、温度及营养物质应与组织液相近。实验(shíyàn)材料方法(fāngfǎ)和步骤2、仪器安装与调试实验安装恒温水浴锅控制加热恒温工作点定(diǎndìnɡ)在38℃。将充满氧气的道氏袋与通气钩相连接将肠段一端系在通气管钩上另一端与张力换能器相连。控制通气量使氧气从通气管前端呈单个而不是成串逸出。仪器调试:选择“实验项目”中的“消化实验”选中“消化道平滑肌生理特性”。第七页共二十五页。3、观察项目(xiàngmù)(附部分参考实验结果)第九页共二十五页。第十一页共二十五页。第十三页共二十五页。4)记录对照肠段运动曲线后加入(jiārù)2滴肾上腺素(1:10000)观察并记录曲线变化。第十五页共二十五页。5)记录对照肠段运动曲线后加入1—2滴乙酰胆碱(1:100000)观察(guānchá)并记录曲线变化。第十七页共二十五页。6)记录对照(duìzhào)肠段运动曲线后加入3滴阿脱品后立即加入与前面同样剂量的乙酰胆碱记录并观察曲线变化。注意事项结论(jiélùn)实验讨论(tǎolùn)(参考)在浴槽中加入0.01%乙酰胆碱(Ach)2滴(约0.2ml)后可见离体肠管活动增强描记曲线出现收缩频率变快幅度增加。出现上述现象(xiànxiàng)的机理目前认为与消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+的内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结合使得两类通道开放:一类为电位敏感性Ca2+专用通道另一类为特异性受体活化Ca2+专用通道。前一类通道对Ach敏感小剂量Ach即引起开放;后一类通道对Ach相对不敏感只有大剂量Ach才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中Ca2+增高进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统使平滑肌收缩肌张力增加。在浴槽中加入0.01%肾上腺素2滴(约0.2ml)后可见离体肠管活动减弱描记曲线出现收缩频率变慢幅度(fúdù)减小以及基线下移。出现上述现象的机理目前认为与肠肌细胞膜上存在α和β两种受体α受体又分为α抑制型受体和α兴奋型受体有关。肾上腺素作用于α抑制型受体引起肠肌膜上一种特异性受体活化使K+外流增多细胞膜发生超极化肠肌兴奋性降低肌张力下降。同时肾上腺素还作用于β受体①它的激活引起肠肌细胞膜中的cAMP合成增多cAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+泵活动使肌浆中Ca2+浓度降低亦使肌张力降低;②β受体激活后还促使K+及Ca2+外流增加加速膜的超极化促进了肠肌肌张力的减低。浸浴小肠肠管的台氏液温度以38℃~40℃为宜低于或高于这个温度都会影响结果。因为肠管平滑肌对温度改变极为敏感当温度降到30℃以下时由于代谢水平的降低兴奋性减弱可出现收缩曲线基线下移频率变慢收缩幅度变小。有时可能会见到基线先上移后下降的现象。这是因为降温本身对肠管是一种(yīzhǒnɡ)刺激也可短暂地加强代谢活动所以肌张力升高。当温度高于40℃时由于酶活性提高各离子通道活性增加使得基线上移收缩频率增高幅度增加。当然如果台氏液温度过高(50℃以上)可因蛋白变性使肠管收缩功能消失。内容(nèiróng)总结