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本课件主要参考有关网上资源制作,因未能找到作者,不能明确说明,特此致谢!观察哺乳动物胃肠平滑肌的一般生理特性。 学习哺乳类动物离体器官灌流的一种方法。实验原理生理学实验中,常用的生理溶液有生理盐水、任氏液(Rinne)、乐氏液(Locke)及台氏液(Tyrode)。这些生理溶液是为了在进行离体器官或组织实验时,使标本尽可能处于近似在体内的环境中,以保证其正常的功能活动。而用于灌流组织的液体,其电解质成分、晶体渗透压、pH、缓冲能力、温度及营养物质应与组织液相近。实验材料方法和步骤2、仪器安装与调试实验安装 恒温水浴锅控制加热,恒温工作点定在38℃。将充满氧气的道氏袋与通气钩相连接,将肠段一端系在通气管钩上,另一端与张力换能器相连。控制通气量,使氧气从通气管前端呈单个而不是成串逸出。 仪器调试:选择“实验项目”中的“消化实验”选中“消化道平滑肌生理特性”。3、观察项目(附部分参考实验结果)4)记录对照肠段运动曲线后,加入2滴肾上腺素(1:10000),观察并记录曲线变化。5)记录对照肠段运动曲线后加入1—2滴乙酰胆碱(1:100000),观察并记录曲线变化。6)记录对照肠段运动曲线后加入3滴阿脱品后立即加入与前面同样剂量的乙酰胆碱,记录并观察曲线变化。注意事项结论实验讨论(参考)在浴槽中加入0.01%乙酰胆碱(Ach)2滴(约0.2ml)后,可见离体肠管活动增强,描记曲线出现收缩频率变快,幅度增加。出现上述现象的机理,目前认为与消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+的内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结合,使得两类通道开放:一类为电位敏感性Ca2+专用通道,另一类为特异性受体活化Ca2+专用通道。前一类通道对Ach敏感,小剂量Ach即引起开放;后一类通道对Ach相对不敏感,只有大剂量Ach才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中Ca2+增高,进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统,使平滑肌收缩,肌张力增加。在浴槽中加入0.01%肾上腺素2滴(约0.2ml)后,可见离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩频率变慢,幅度减小以及基线下移。出现上述现象的机理,目前认为与肠肌细胞膜上存在α和β两种受体,α受体又分为α抑制型受体和α兴奋型受体有关。肾上腺素作用于α抑制型受体,引起肠肌膜上一种特异性受体活化,使K+外流增多,细胞膜发生超极化,肠肌兴奋性降低,肌张力下降。同时,肾上腺素还作用于β受体,①它的激活引起肠肌细胞膜中的cAMP合成增多,cAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+泵活动,使肌浆中Ca2+浓度降低,亦使肌张力降低;②β受体激活后还促使K+及Ca2+外流增加,加速膜的超极化,促进了肠肌肌张力的减低。浸浴小肠肠管的台氏液温度以38℃~40℃为宜,低于或高于这个温度,都会影响结果。因为肠管平滑肌对温度改变极为敏感,当温度降到30℃以下时,由于代谢水平的降低,兴奋性减弱,可出现收缩曲线基线下移,频率变慢,收缩幅度变小。有时可能会见到基线先上移后下降的现象。这是因为降温本身对肠管是一种刺激,也可短暂地加强代谢活动,所以肌张力升高。当温度高于40℃时,由于酶活性提高,各离子通道活性增加,使得基线上移,收缩频率增高,幅度增加。当然,如果台氏液温度过高(50℃以上),可因蛋白变性,使肠管收缩功能消失。