最新精编医学专题—侧脑室注射.doc

侧脑室注射一、大鼠侧脑室注射（需定位器）SD大鼠侧脑室的坐标是以前囟点为中心定好坐标旁开1.5mm向后囟方向1.1mm深4.5mm。一、实验器具和药品（一）器具小号的注射用针头（外径为0.7mm内径为0.5mm要磨平磨光滑长度大概为1cm中间套有一小的塑料垫片以便固定）不锈钢的细铁丝（长度大概为1.2-1.5cm要求与小号针头的内径相一致用作导管外的塞子外面套有与小号的注射用针头粗细一致的塑料用作塞帽便于打开）小号螺钉（固定用）和螺丝刀剪毛剪镊子眼科剪（镊）手术刀片（柄）小号注射器注射针头烧杯铝饭盒手术灯墨水（作标记）棉签酒精棉球（二）药品生理盐水青霉素戊巴比妥钠H2O2502胶水义齿基托树脂义齿基托树脂液II型二、实验动物健康的成年大鼠体重在170-200g动物手术前在实验室条件下适应性饲养1周并于手术前称重以确定麻醉剂用量。三、实验步骤（一）、麻醉麻醉剂为戊巴比妥钠溶液浓度为20mg/ml腹腔注射。体重在170-200g的成年大鼠注射剂量为0.65ml/只即可保证整个实验过程动物一直安静。（二）、固定1、在一水平桌面上水平调整好立体定向器（江弯I型C）包括水平上的左右2根钢针、前面的牙齿固定针以及上方的钢针部分。要求左右2根钢针在一水平线上左右距离一致牙齿固定针部位水平与左右2根钢针在一水平面上并且与左右2根钢针的尖端连接处形成一个等边三角形。上方钢针保持垂直其尖端处与牙齿固定处以及2耳蜗连线的中点在同一个竖直平面上。立体定向器的中空部分用一个空的形状适宜柔软的纸盒垫平位置与底座左右2根坐杆齐平。2、将已麻醉的动物（大鼠）水平并以俯卧的姿势置于盒子的上方并使水平上的左右2根钢针的尖端刚好对准耳蜗先将牙齿卡好然后慢慢的旋紧水平钢针使之尖端缓缓的伸进耳蜗（一边一边进行）直至松紧适宜整个头颅水平固定不能摇动为止（可从定向器前方察看）。（三）、安装步骤1、在头颅的正中部位术野处剪毛大小适宜用酒精棉球搽拭消毒后以左右耳蜗的连线为基线（稍微向前一点点）以头颅中轴为方向沿头部用刀片切开一小切口（0.5-1cm左右）深度适宜（先只需切开皮肤切勿伤及颅盖）用棉签蘸去流出的少量血液然后用眼科镊（剪）轻轻挑起并剪开皮下筋膜并稍微做钝性分离直至暴露颅盖用棉签蘸去流出的少量血液。2、用棉签蘸取适量的10%H2O2在颅盖表面轻轻搽拭消毒。3、确定安装导管的位置。导管安装在侧脑室（单侧）。解剖位置为：前骨缝的交点处即前囱沿着中骨缝向后0.8mm然后水平离中骨缝靠右1.5mm的位置。4、先用大号的注射针头（尖端蘸点墨水好做标记）在前囱的位置处做一标记（打一小孔眼）然后在定向器上方钢针的顶端安上一小的锋利的注射针头（尖端蘸点墨水好做标记）并调整好位置使针头慢慢的靠近前囱的位置待吻合后然后微调定向器上方的旋钮（前后刻度刚好和导管安装的位置相吻合）使上方钢针上的针头的位置刚好对准导管安装处的位置然后微调定向器最上方的旋钮使上方钢针上的针头慢慢靠近导管安装位置并在导管安装位置上打一小孔眼同时也作好导管安装处的标记。然后慢慢的移去针头但是上方钢针的位置已经调整好了切勿移动。5、用一钝性针头在先前已经作好标记的前囱的位置处先钝性扩大一下孔眼然后将一细小的螺钉沿着孔眼慢慢的旋转使之进入适宜的深度后用502胶水将螺钉固定在颅盖上（螺钉最好是垂直固定）。同时用一钝性针头在先前已经作好标记的安装导管的位置处先钝性扩大一下孔眼以便导管容易进入。6、将事先已经磨好的并且已经安上相匹配塞子的导管安装在定向器上方钢针的顶端固定好后慢慢的旋紧旋钮使导管顶端慢慢的接近导管安装的位置待位置吻合后慢慢的旋紧定向器最上方的旋钮使导管最顶端慢慢的伸入侧脑室直至到达侧脑室位置（大概在颅骨以下4.5mm处）松紧适宜。7、倒取适量的专用固定剂于一小瓶盖上（义齿基托树脂上海二医张江生物材料有限公司电话[phone]）然后滴加适量的义齿基托树脂液II型（自疑牙托水上海二医张江生物材料有限公司）混合均匀后用钝针头慢慢吸取树脂液均匀涂于刚安装上的导管的周围以及前囱位置上的螺钉的周围使之相互粘连和固定。8、慢慢的旋开定向器上方钢针侧边的旋钮使之与导管松开然后慢慢的旋转定向器最上方的旋钮使之与导管脱离后移开。此时导管外端完全暴露然后在导管的周围均匀涂上树脂液厚度适宜并且使之与周围的皮肤粘合完整封闭自然晾干。（在这个过程中一定要保证导管没有摇动否则导管进口处可能不封闭）9、吸取适量的青霉素溶液（约0.2ml）腹腔注射。10、慢慢的松开耳蜗里的2根钢针和牙齿固定针将动物放回笼子稍待片刻后动物自然舒醒。11、手术后的动物要注意观察其行为变化手术部位有无液体流出以及是否有红肿和感染如有则要进行护理和消炎处理。动物每天注射青霉素（约0.2ml）2次/天连续注射3天。保证笼子四周平整以防动物将导管刮坏（掉）