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(由于不知道白蛋白在实验室是否可用,另附一个实验,这两个实验取材以及对象一样,只是觉得下面这个实验操作很简单,所以没有作为第一考虑的设计方案) 实验名称:影响红细胞溶血的因素 一.实验目的 1.了解能够引起红细胞溶血的各种理化因素,引起红细胞溶血的生理生化原理。 掌握红细胞溶血的实验方法。观察不同浓度的低渗溶液与红细胞抵抗力之间的关系。以及红细胞化学溶血的现象 掌握等渗溶液和等张溶液的区别 二.实验原理 1.正常的红细胞悬浮于等渗血浆中,若置于低渗溶液内,则水会进入红细胞使红细胞膨胀而变形,如渗透压持续下降,红细胞会持续破裂而释放血红蛋白,即渗透性溶血。有机溶剂,酸,碱可破坏红细胞膜疏水键和膜蛋白上的次级键,溶解膜脂质,使膜蛋白变性引起化学性溶血。 2.1.9%的尿素是等渗溶液而不是等张溶液,可以自由进入红细胞内部从而导致水大量进入红细胞,导致红细胞破裂溶血。 三、实验对象 家兔 四、实验器材 试管,试管架,滴管,移液管,注射器。 五、实验药品 1%氯化钠生理盐水1%肝素0.1mol/LHCL0.1mol/LNaOH乙醚或氯仿1.9%尿素 六、实验步骤 1制备红细胞悬液:取家兔血,加入肝素,可采用自然沉降法,取血后加肝素静置,使红细胞自然沉降。 2取试管8支,标记排列在试管架上,按下表配制各种浓度氯化钠: 试液123456781%Nacl(ml)1.21.41.61.82.02.22.63.6蒸馏水2.82.62.42.22.01.81.40.4溶液浓(%)0.300.350.400.450.500.550.600.9 每支试管放入红细胞悬液1至2滴,摇匀,静置,30分钟后观察各式管之溶血现象。 (1)管内液体混浊,上层带红色者,称为不完全溶血。记录开始不完全溶血浓度。 (2)管内液体变红而透明者,称完全溶血,记录开始完全溶血浓度。 (3)管内液体分两层,上层浅黄色透明,下层红色不透明者,为不溶血。 4另取试管4支,各盛红细胞悬液2ml,分别加入下列溶液观察红细胞溶血现象: (1)0.9%Nacl1ml (2)氯仿或乙醚0.2ml (3)0.1mol/LHCL1ml (4)0.1mol/LNaOH1ml 半小时后,观察各试管的溶血现象。 5另取试管2支,各盛红细胞悬液2ml,分别加入0.9%NaCL和1.9%尿素,静置,观察尿素管中的溶血现象。 七、注意事项 1.红细胞渗透溶血实验为定量指标实验,所以氯化钠溶液的浓度在配制时,要求准确,(使用移液管)。 2.在实验过程中,要减小机械震动,滴加药品时要靠近液面,以免冲击力太大使红细胞破损,造成人为溶血。 3.在加入化学试剂前,可加入少许生理盐水,使化学试剂所造成溶液渗透压的改变不至于过大而影响实验解释。 4.各试管应标明号数,不要混淆。