一种提高轮叶党参抗癌活性的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102091117A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102091117A(43)申请公布日2011.06.15(21)申请号201110032025.6(22)申请日2011.01.30(71)申请人延边大学地址133000吉林省延边朝鲜族自治州延吉市公园路977号(72)发明人韩春姬朴惠善李美子(74)专利代理机构延边科友专利商标代理有限公司22104代理人柳明哲(51)Int.Cl.A61K36/344(2006.01)A61P35/00(2006.01)A61K125/00(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称一种提高轮叶党参抗癌活性的方法(57)摘要本发明涉及一种提高轮叶党参抗癌活性的方法，将鲜轮叶党参切片或匀浆，或者将干轮叶党参粉碎，或者将干燥的轮叶党参粉末，然后用水浸泡，高压灭菌，在温度降至30℃以下时在无菌条件下加入活性酵母0.5%~5.0%，葡萄糖1%~8%，在20~37℃条件下发酵1~10天，发酵结束后，加入极性溶剂，在0℃~100℃下提取5分钟~24小时，过滤，回收溶剂，减压浓缩或冷冻干燥。用本发明可以提高轮叶党参对肿瘤生长抑制作用。CN10297ACCNN110209111702091123A权利要求书1/1页1.一种提高轮叶党参抗癌活性的方法，其特征在于：将鲜轮叶党参切片或匀浆，或者将干轮叶党参粉碎，或者将干燥的轮叶党参粉末，然后用水浸泡，高压灭菌，在温度降至30℃以下时在无菌条件下加入活性酵母0.5%~5.0%，葡萄糖1%~8%，在20~37℃条件下发酵1~10天，发酵结束后，加入极性溶剂，在0℃~100℃下提取5分钟~24小时，过滤，回收溶剂，减压浓缩或冷冻干燥。2.如权利要求1所述的一种提高轮叶党参抗癌活性的方法，其特征在于所述的极性溶剂为乙醇或水。3.如权利要求1所述的一种提高轮叶党参抗癌活性的方法，其特征在于所述的发酵结束后，加入极性溶剂，在70℃~100℃下提取。2CCNN110209111702091123A说明书1/5页一种提高轮叶党参抗癌活性的方法技术领域[0001]本发明涉及一种提高轮叶党参中抗癌活性成分的方法，具体地说，本发明涉及一种利用酵母菌发酵技术，提高轮叶党参中抗癌活性成分含量的方法。背景技术[0002]轮叶党参（CodonopsisLanceolataBenth.etHook.F.）又名羊乳、四叶参、山胡萝卜、山海螺及白蟒肉等，是桔梗科党参属植物羊乳的根，多分布于中国东北、华南、西南地区及朝鲜、日本、俄罗斯等国家，在民间常将它作为山野菜食用。传统上其根入药，味甘、性平，是常用的补中益气药，有排脓消肿、清热解毒、补虚通乳、养阴润肺及祛痰之功效。主要用于病后体虚、乳少、肺阴虚、肿痈、乳痈、疮疡肿毒等症。现代药理研究表明轮叶党参具有镇静镇痛、提高学习记忆、抗氧化和增强免役等作用。文献报道轮叶党参中含有多糖、齐墩果酸、皂苷类、黄酮类、挥发油类等成分。而有研究表明多糖，齐墩果酸有较好的预防肿瘤的作用。然而，用一定浓度的乙醇水溶液浸泡轮叶党参生药材24小时后，得到的提取物对小鼠肿瘤生长没有明显的抑制作用。发明内容[0003]本发明的目的是提供一种提高轮叶党参抗癌活性的方法，具体是提供一种生物发酵方法，以显著提高轮叶党参抗癌有效成分含量。[0004]本发明的技术方案为：一种提高轮叶党参抗癌活性的方法，首先将鲜轮叶党参切片或匀浆，或者将干轮叶党参粉碎，或者将干燥的轮叶党参粉末，然后用水浸泡，高压灭菌，在温度降至30℃以下时在无菌条件下加入活性酵母0.5%~5.0%，葡萄糖1%~8%，在20~37℃条件下发酵1~10天，发酵结束后，加入极性溶剂，在0℃~100℃优选70℃~100℃下提取5分钟~24小时，过滤，回收溶剂，减压浓缩或冷冻干燥。[0005]所述的极性溶剂为乙醇或水。[0006]所述经减压浓缩或冷冻干燥后所得到的轮叶党参提取物，用液液分配技术和色谱技术进行精制，得到轮叶党参皂苷，用于制备抗癌药物或食品，也可在肿瘤化学预防制剂中的应用。[0007]将发酵的轮叶党参分别用蒸馏水、30%乙醇、50%乙醇及70%乙醇加热回流提取5分钟~24小时，过滤或离心，除去不溶性物质后，减压浓缩，用65%~80%乙醇醇沉，去掉蛋白质和多糖，回收乙醇，真空干燥或冷冻干燥，得到轮叶党参提取物，通过柱层析方法进行精制，得到轮叶党参皂苷，用于肝癌抑制实验和二乙基亚硝胺（DEN）诱发肝癌的预防实验。[0008]本发明人用轮叶党参乙醇提取物进行动物酒精性肝损伤保护作用研究，证明其具有明显抑制乙醇对肝脏的损伤作用，还证明了轮叶党参总皂苷具有明显的抗突变作用。本3CCNN110209111702091123A说明书2/5页发明人对轮叶党参乙醇提